王梅
- 作品数：37 被引量：94H指数：5
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- BMP7基因检测在结直肠癌和胃癌诊断中的意义被引量：4
- 2009年
- 目的建立检测骨形态发生蛋白7(BMP7)基因的实时荧光定量RT-PCR法,探讨BMP7对结直肠癌、胃癌的诊断意义。方法构建BMP7基因的标准质粒,建立RT-PCR,real-time RT-PCR等方法检测并比较BMP7基因在21例胃癌组织、19例结直肠癌组织与对应癌旁组织中的表达水平,用免疫组织化学验证BMP7的蛋白水平差异。结果建立的BMP7检测法稳定和准确;19例结直肠癌中16例(84.2%)癌组织表达的BMP7基因显著高于对应的癌旁组织(P<0.05)。21例胃癌组织中11例(52.4%)癌组织表达高于对应癌旁组织,但无显著差异(P>0.05)。免疫组织化学在蛋白水平上证实了肿瘤组织和癌旁组织中BMP7的表达水平差异。结论成功建立了检测BMP7的实时荧光定量PCR方法,BMP7基因可作为结直肠癌检测的新靶点。
- 钱晖谢颖彭秀娟顾红兵曹慧玲许晓蒙王梅张玲陶洋许文荣
- 关键词：骨形态发生蛋白7实时荧光定量PCR结直肠癌
- 实时定量PCR检测胃癌组织miR-20a及初步应用被引量：1
- 2012年
- 目的建立检测人胃癌组织中miR-20a的实时荧光定量PCR方法。方法建立miR-20a标准曲线,评价该法检测的线性范围及灵敏度;对标准质粒扩增产物进行熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳检测以分析该法的特异性。取高、中、低3份不同浓度的标准质粒进行批内和日间变异系数(CV)的检测,分析该法的重复性。收集70例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,定量检测组织中miR-20a的表达水平。结果构建的实时荧光定量PCR法的灵敏度为101copies/μL,扩增的线性范围为101～109copies/μL;扩增产物的熔解曲线峰和电泳片段特异;3份不同浓度标准质粒定量检测的批内CV分别为6.33%、4.74%、5.89%,日间CV分别为9.45%、6.29%、7.48%。定量结果显示75.7%(53/70)胃癌组织中miR-20a的表达高于癌旁组织,差异有显著性(Z=-4.427,P<0.01)。结论建立的实时荧光定量PCR检测miR-20a的方法准确、快速、灵敏、特异,可用于胃癌组织中miR-20a的检测。
- 王梅王胜顾红兵钱晖许文荣
- 关键词：微小RNA实时荧光定量PCR胃癌
- DiO标记对人骨髓间充质干细胞生物学功能的影响
- 2016年
- 目的用细胞膜绿色荧光探针Di O标记人骨髓间充质干细胞(h BMMSCs),探讨其对h BMMSCs生物学功能的影响。方法采用Ficoll密度梯度离心法分离、培养h BMMSCs;流式细胞术检测Di O对h BMMSCs的标记效率;通过Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验分别检测Di O对h BMMSCs迁移、增殖和多向分化能力的影响。结果Di O对h BMMSC的标记效率可达(99.5±0.4)%;Transwell迁移实验、平板克隆实验、生长曲线分析、成脂及成骨诱导实验结果表明,与未标记h BMMSCs相比,标记后的h BMMSCs迁移、增殖及成脂、成骨分化能力未见明显改变,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论经Di O处理未见明显影响h BMMSCs的生物学功能,可做为安全、有效的h BMMSCs体外标记绿色荧光染料。
- 朱梦楚高健蔡静王哲钱晖许文荣王梅
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞标记
- MicroRNA-205对人胃癌SGC7901细胞增殖的影响及其机制初步探讨
- 目的观察MicroRNA-205(miR-205)对人胃癌细胞增殖的影响及可能的机制。方法采用miR-205 mimics转染人胃癌SGC7901细胞后,观察癌细胞的增殖能力并以荧光实时定量PCR检测miR-205的表达...
- 赵崇晖王梅张斌张玲朱琼芳钱晖许文荣
- 循环miR-17-5p/20a在胃癌预后预测和化疗疗效监测中的应用研究
- 目的:探讨分析循环miR-17-5p/20a在胃癌患者血浆中表达的临床意义以及在胃癌患者预后预测及化疗疗效监测中的应用价值。材料与方法:收集65例胃癌患者术前、16例术后和6例复发患者血浆标本。采用Real-timeRT...
- 王梅顾红兵张斌史云燕赵崇晖钱晖朱伟许文荣
- 文献传递
- 胃癌患者血清CEA、CA19-9和CA72-4联合检测的临床意义被引量：21
- 2011年
- 目的:探讨血清CEA、CA19-9和CA72-4在胃癌患者诊疗中的临床价值。方法:采用电化学发光法检测胃癌、胃良性疾病患者以及健康人血清中CEA、CA19-9和CA72-4的水平,并进行统计学分析。结果:胃癌患者血清CEA、CA19-9和CA72-4的水平均显著高于胃良性疾病患者及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。血清CEA、CA19-9和CA72-4在胃癌各分化组之间差异无统计学意义(P>0.05),同时淋巴结转移组患者血清CEA、CA19-9和CA72-4水平与未转移组比较,差异也无统计学意义(P>0.05)。应用ROC曲线分析CEA、CA19-9和CA72-4对胃癌的鉴别能力,其曲线下面积分别为0.694±0.051,0.651±0.053,0.703±0.049,与胃良性疾病及对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:联合检测血清CEA、CA19-9和CA72-4的水平变化,不仅有助于提高胃癌诊断敏感性,同时对胃癌患者的病情以及预后判断也有一定临床意义。
- 丁志祥王梅钱高潮赵崇晖钱晖
- 关键词：胃癌糖类抗原19-9糖类抗原72-4
- GC-MSCs和癌组织来源microRNA在胃癌诊断中的作用
- 目的:联合研究胃癌微环境细胞胃癌间质干样细胞(gastric cancer-derived mesenchymal stemcell-like cells,GC-MSC)、胃癌组织、与胃癌细胞共培养后的骨髓间充质干细胞(...
- 赵崇晖王梅徐会涛沈俐张玲钱晖许文荣
- 文献传递
- 巨噬细胞活化的huc-MSC对胃癌细胞PDGFD的调控作用
- 2014年
- 目的探讨巨噬细胞(THP-1)活化的人脐带间充质干细胞(huc-MSC)对胃癌细胞系HGC-27中血小板源性生长因子(PDGFD)的调控作用。方法将THP-1与huc-MSC直接共培养,观察共培养前后细胞的形态变化;western blot检测huc-MSC中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)相关指标;将HGC-27分为阴性对照组、huc-MSC间接共培养组及THP-1活化的huc-MSC间接共培养组,ELISA法检测各组上清液中PDGFD含量;免疫荧光法检测HGC-27中PDGFD的表达;western blot检测HGC-27中JAK1-STAT3通路活化情况。结果与huc-MSC直接共培养后THP-1细胞部分呈纤长形。huc-MSC中E-cadherin蛋白表达下调(P<0.01),N-cadherin(P<0.01)和vimentin(P<0.01)表达上调,呈现CAF样活化。与阴性对照组比较,huc-MSC和THP-1活化后huc-MSC均促进HGC-27中PDGFD的表达,THP-1活化的huc-MSC较huc-MSC促进作用更显著(P<0.01)。与阴性对照组比较,huc-MSC和THP-1活化后huc-MSC处理组HGC-27中JAK1和STAT3蛋白水平均显著增加(P<0.01),THP-1活化后huc-MSC组较huc-MSC组增加更显著(P<0.01)。结论 THP-1促进huc-MSC呈CAF样活化,可上调胃癌细胞HGC-27中PDGFD的表达,可能与JAK-STAT3通路活化有关。
- 王梅杨婷婷蔡洁黄锋朱梦楚钱晖许文荣
- 关键词：脐带间充质干细胞巨噬细胞胃癌血小板源性生长因子
- miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P<0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P<0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P<0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P<0.01;t=23.14,P<0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P<0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P<0.01;t=7.94,P<0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。
- 杨欢付海龙毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：微小RNA-1胃癌迁移上皮间质转化
- 低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响
- 2016年
- 目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P<0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P<0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。
- 付海龙杨欢毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌细胞5-氟尿嘧啶低浓度转录因子
