王晓萍
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
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- 靶向核定位序列siRNA对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA复制的抑制作用
- 2012年
- 目的针对乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区设计并化学合成2条小干扰RNA(siRNA),观察其对共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)水平的影响。方法将siRNA转染可稳定分泌HBV颗粒的HepG2.2.15细胞,转染后72 h,采用ELISA方法检测上清液中HBsAg、HBeAg的含量,采用Real-time PCR定量检测细胞内cccDNA及细胞培养上清HBV DNA拷贝数。RT-PCR检测靶基因mRNA的抑制效果。结果靶向NLS区的2条siRNA均能不同程度地降低HepG2.2.15细胞cccDNA水平,抑制HBV DNA的复制及HBeAg的分泌,对cccDNA的抑制率分别为93.30%和85.00%(P<0.01),对HBV mRNA抑制率分别为62.80%和48.90%,对HBV DNA抑制率分别为76.56%和66.41%(P<0.01),对HBeAg抑制率分别为57.25%、43.48%(P<0.01)。而无关序列对HBV DNA与cccDNA的复制和HBeAg表达几乎无干扰作用。结论靶向HBV核心蛋白C末端核定位序列的siRNA可特异、高效、稳定地显著降低HBV cccDNA水平,抑制HBV DNA复制及HBeAg分泌,为应用RNA干扰治疗HBV感染奠定了一定基础。
- 陈姝杨光刘晓松崔金环吴祖常王晓萍
- 关键词:小干扰RNA乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA
- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性同型半胱氨酸浓度和脑梗死的相关性研究
- 2017年
- 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性、血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度和脑梗死的相关性,为脑梗死的防治提供依据。方法应用聚合酶链反应(PCR)-RFLP方法检测215例脑梗死患者和200名健康对照者的MTHFR基因C677T多态性,并用循环酶法测定2组的血浆Hcy浓度,比较2组间MTHFR基因型和Hcy浓度的差异,以及基因型与Hcy浓度的相关性。结果 215例脑梗死患者中MTHFR基因TT型、CT型和T等位基因频率(7.4%,30.7%,22.8%)高于对照组(1.5%,15.5%,9.2%)(χ~2=8.374,P=0.004,OR=5.28,χ~2=13.362,P=0.000,OR=2.41;χ~2=27.898,P<0.01,OR=2.90)。脑梗死组和对照组平均Hcy浓度分别为(13.18±6.24)μmol/L和(10.26±3.42)μmol/L,脑梗死组的Hcy浓度显著高于对照组(P=0.000),TT基因的血浆Hcy浓度均显著高于CT型(P=0.019)和CC型(P=0.004),而CT型与CC型的Hcy浓度之间差异均无统计学意义(P=0.107)。结论 MTHFR基因C677T突变可影响Hcy水平,可能与脑梗死的发生密切相关。
- 苏锡康崔金环陈华锦王晓萍杨光
- 关键词:亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性同型半胱氨酸脑梗死
- 育龄人群稀有β地中海贫血基因突变分析被引量:4
- 2014年
- 目的调查研究佛山地区育龄人群稀有β地中海贫血(β地贫)基因突变的类型。方法对近4年来佛山市第一人民医院送检的育龄人群(年龄21岁~43岁,均为佛山籍户口)的血液标本,进行常规的地贫血液学表型分析和地贫基因诊断,其中以反向点杂交法初筛出β地贫患者,另外对常规基因检测不能确诊的基因突变进行β珠蛋白基因序列测定。结果共发现了8种稀有的β地贫基因突变:IVS-II-2(-T)、CD37(TGG>TAC)、CD89-93(-AGTGAGCTGCACTG)、CD19(AAC>AGC)、PolyA(AATAAA>AATGAA)、CD106(CTG>GTG)、CD29(GGC>GAC)和CD22(GAA>GGA)。另外尚有3例可疑β地贫样本经测序分析仍未能检出β地贫。结论佛山地区育龄人群中β地贫的基因突变分布非常广泛而且类型比较丰富。
- 曾劲伟方颖迪崔金环王晓萍
- 关键词:Β地中海贫血稀有基因测序