王惠娟
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒的初步应用
- 2012年
- 目的:制备表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒,并初步探讨其应用。方法:构建制备表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒RVJ11LacZ-I1LGFP;分别利用药物昔多福韦与抗痘苗病毒高效价免疫血清,建立基于该病毒的荧光生成抑制实验及荧光减数中和实验。结果:荧光生成抑制实验与传统的噬斑生成抑制实验相比,结果一致,但判读更直接快速;重组痘苗病毒RVJ11LacZ-I1LGFP亦可用于体外快速高通量评价正痘病毒疫苗的中和能力。结论:利用表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒建立了直接简便快速高通量的抗痘病毒药物筛选及体外中和评价技术。
- 邓瑶孟昕张相民陈红周为民王惠娟阮力谭文杰
- 关键词：重组痘苗病毒绿色荧光蛋白
- 携带绿色荧光蛋白报告基因的HCoV-OC43感染性克隆的构建与病毒拯救被引量：1
- 2016年
- 目的：探索利用HCoV-OC43感染性克隆表达外源基因的可行性及插入区域。方法在HCoV-OC43全长感染性克隆pBAC-OC43 FL的基础上,利用融合PCR和酶切连接等方法,成功构建了在3个不同位置插入绿色荧光蛋白报告基因（ GFP替换 NS2基因或NS12.9基因以及插入N基因后）的重组质粒,利用反向遗传学操作技术进行病毒拯救,通过免疫荧光、Western blot和病毒感染等试验对重组病毒进行鉴定分析。结果 GFP替换NS2或NS12.9基因的感染性克隆可以成功拯救出重组病毒（OC43-GFPΔNS2和OC43-GFPΔNS12.9）,其中OC43-GFPΔNS2在感染BHK-21细胞后能够观察到GFP基因的高效表达,OC43-GFPΔNS12.9在感染细胞后仅有少量GFP基因的表达,而GFP插入N基因后的感染性克隆未能拯救出病毒。结论 NS2基因可以作为HCoV-OC43感染性克隆表达外源基因的插入位点,并且外源基因插入至该位点可获得稳定高效表达,为进一步研究HCoV-OC43的复制规律及研发基于HCoV-OC43的冠状病毒载体提供了参考依据。
- 杨扬申梁陆柔剑王惠娟王文玲谭文杰
- 关键词：感染性克隆病毒拯救绿色荧光蛋白病毒载体
- 表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析被引量：1
- 2011年
- HCoV-NL63是新近发现的人冠状病毒,对其外膜糖蛋白-棘突蛋白的表达及功能的研究仍有待深入。本研究利用天坛株痘苗病毒载体,克隆构建可表达HCoV-NL63棘突蛋白四个片段(N端棘突蛋白:S1;C端棘突蛋白:S2;受体结合区大片段:RL;受体结合区小片段:RS)的重组痘苗病毒(vJSC1175-S1;vJSC1175-S2;vJSC1175-RL;vJSC1175-RS),酶切测序证实表达载体构建正确,免疫荧光分析(IFA)各重组痘苗病毒中棘突蛋白不同片段的表达与定位,Western-Blot分析表明各种重组蛋白表达正确。分析结果显示:4种重组蛋白均能有效表达,S1、RL及RS蛋白的荧光主要分布在细胞膜上,而S2蛋白的荧光则主要分布于细胞浆,各个片段的分子量大小与文献报道相同,并可进行正确的翻译修饰(糖基化)。本研究首次采用痘苗病毒天坛株载体构建制备了表达HCoV-NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒,为进一步分析人冠状病毒HCoV-NL63棘突蛋白的结构功能及探索其抗原性和免疫原性奠定了基础。
- 赵国霞周为民陆柔剑王惠娟赵敏张庭瑛邓瑶高基民谭文杰
- 一种具有中和活性的MERS-CoV合成肽疫苗及其应用
- 一种具有中和活性的MERS-CoV合成肽疫苗及其应用。本发明涉及一种MERS-CoV合成肽疫苗及其应用，所述肽段选自下述氨基酸序列：SEQ ID NO：1，肽段的氨基酸序列为：CALPDTPSTLTPRSVR。含有该肽段...
- 谭文杰文波邓瑶杨扬耿合员孟昕王惠娟
- 文献传递
