王学明
- 作品数：13 被引量：25H指数：2
- 供职机构：烟台毓璜顶医院更多>>
- 发文基金：烟台市科学技术发展计划项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脂肪来源干细胞部分生物学性状的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的对体外分离培养人脂肪来源干细胞的部分生物学性状进行分析。方法将肿胀吸脂术获得的脂肪组织通过酶消化法分离培养脂肪来源干细胞，采用流式细胞仪检测细胞的表面标记；取第2代细胞进行成脂、成内皮细胞诱导。结果体外培养的原代脂肪来源干细胞成分较复杂，形态各异，细胞生长缓慢；细胞传至第2代形态渐趋一致，以梭形为主，多次传代后细胞仍保持较强增殖能力。原代细胞CD29、CD31、CD34、CD49d、CDl05、CDl66表达为阳性；第2代细胞CD31、CIM9d转为阴性，而CD29、CD105、CD166、Stro-1、Flk-1表达比例显著多于原代细胞。成脂诱导后细胞内可见大量脂滴形成，油红O染色阳性；成内皮细胞诱导后，细胞表达CD31、vWF等成熟内皮细胞标志。结论通过吸脂术获得的大量原代脂肪干细胞是由极其复杂的各种细胞集合而成，在体外易于分离培养和传代扩增，传代后的细胞在特定条件下可诱导分化为脂肪细胞和血管内皮细胞，并表达间充质干细胞相关的表型，是组织工程理想的种子细胞。
- 林立新黄勇袁继龙王鹏王学明王玉婷姜蕾
- 关键词：脂肪来源干细胞分化
- 不同部位脂肪源性干细胞的生物学特性比较被引量：13
- 2013年
- 背景: 大鼠不同部位来源的脂肪源性干细胞在体外培养时的特性是否存在差异目前尚无定论。目的: 比较同一只大鼠不同部位来源的脂肪源性干细胞在体外培养时的生长特性和成脂诱导分化能力的差异。方法: 无菌操作下取F344大鼠腹股沟及腹腔大网膜脂肪组织各5mL,Ⅰ型胶原酶酶解法分离出脂肪源性干细胞,细胞计数后进行体外培养,观察其形态特征和生长状态,MTT法测定不同部位细胞的倍增时间。取不同部位来源的第2代脂肪源性干细胞进行成脂诱导,诱导14d进行油红O染色,观察不同部位来源的脂肪源性干细胞的成脂分化能力。结果与结论: 在同一只大鼠内脏大网膜脂肪获得的脂肪源性干细胞数目为(281±10)×107L-1,明显多于腹股沟皮下脂肪的(85±5)×107L-1(P<0.01)。从内脏大网膜脂肪与腹股沟皮下脂肪获得的脂肪源性干细胞分别于第5,6天进入指数增长期;第9,10天到达平台期;倍增时间为50h和60h左右。传代后的细胞生长分化活跃,呈成纤维细胞样,成脂诱导后,大网膜组织来源的脂肪源性干细胞的成脂诱导分化率明显高于腹股沟组织来源的脂肪源性干细胞[(38.90±2.86)%,(35.30±3.29)%,P<0.01]。可见同一只大鼠不同部位脂肪组织分离得到的脂肪源性干细胞数目不同,体外成脂诱导分化能力亦存在差异。
- 林立新黄勇王玉婷王鹏王学明姜蕾林冠妤
- 关键词：干细胞脂肪干细胞生物学特性种子细胞
- 骨髓间充质干细胞移植后Tourette综合征大鼠刻板行为及体内多巴胺含量的变化
- 目的考察骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)移植对Tourette综合征(Tourette syndrome,TS)大鼠刻板行为的改善及体内多巴胺(dopamine,DA)含量的影响。方...
- 刘秀梅初清李丽霞王学明王海燕衣明纪
- 人脂肪源性干细胞生物学性状的实验研究
- 林立新黄勇袁继龙王鹏王学明王玉婷姜蕾
- 治愈老年特重烧伤合并酒精中毒性脑病一例
- 目的 分析老年特重烧伤合并酒精中毒性脑病的治疗方法. 方法 患者男,62岁,因醉酒倒于火炉上致全身烧伤于伤后3h入院.追问病史有长期(30余年)酗酒史,每日饮白酒约300 ～ 500 mL.查体：体温37.5℃,脉搏11...
- 黄勇王鹏王学明林立新陈才远毕庆霞
- hTERT反义寡核苷酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及端粒酶活性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究hTERT基因反义寡核苷酸(ASODN)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖及端粒酶活性的抑制作用,探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用。方法应用ASODN封闭瘢痕疙瘩成纤维细胞hTERT基因的表达,不同浓度不同时间以ASODN作用于体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞,细胞计数和MTT法检测成纤维细胞生长增殖情况,端粒酶PCR-ELISA法检测不同处理浓度和时间成纤维细胞端粒酶活性。结果 ASODN作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞72h后,成纤维细胞生长受抑,增殖能力减弱,并具有浓度、时间依赖性。端粒酶活性检测显示:ASODN0.5、1.0和1.5μmol/L作用组OD450-690值分别为0.612±0.038、0.535±0.027、0.423±0.023,与空白对照组(0.898±0.058)比较,差异有统计学意义(P<0.05);正义寡核苷酸1.0μmol/L作用组(OD450-690值为0.893±0.042)与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hTERT基因ASODN能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长增殖,降低成纤维细胞端粒酶活性是其重要作用机制之一。通过抑制端粒酶活性进行抗瘢痕疙瘩治疗可能是一个新途径。
- 黄勇林立新王鹏王学明王玉婷姜蕾
- 关键词：瘢痕疙瘩
- 多批大面积烧伤患者一次集中成功救治
- 目的 讨论多批大面积烧伤患者一次集中成功救治的经验. 方法 本组患者共四批患者，其中男19例、女8例.年龄6～58岁[(34±8)岁]，烧伤面积22％～95％[(57.3±15.8)％]，其中Ⅲ度面积...
- 黄勇王鹏王学明林立新陈才远毕庆霞
- 骨髓间充质干细胞移植对Tourette综合征大鼠纹状体脑源性神经营养因子表达的影响
- 本文考察骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)移植对Tourette综合征(Tourette Syndrome,TS)大鼠纹状体内脑源性神经营养因子(brain-derived neuro...
- 刘秀梅王学明衣明纪
- 关键词：TOURETTE综合征骨髓间充质干细胞移植脑源性神经营养因子疗效评价
- 胎鼠纹状体神经干细胞分离培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 背景:从胎鼠神经系统的多个部位如大脑半球、海马、皮质、脑室区等可分离出神经干细胞。目的:探讨胚胎大鼠大脑纹状体神经干细胞的取材、分离、培养和鉴定方法,观察神经干细胞增殖、传代和分化的规律。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-03/08在烟台毓璜顶医院中心实验室完成。材料:选用普通级健康成年Wistar大鼠12只,按雌雄1∶1比例于每晚6时合笼,次晨检查出阴道栓子(阴道内皮结晶)为妊娠0d。方法:在无菌条件下取孕13d胚胎大鼠脑纹状体组织,用无血清培养技术在体外进行神经干细胞的培养、扩增和传代。分别用抗巢蛋白抗体、抗微管相关蛋白2抗体和抗胶质原纤维酸性蛋白抗体对培养的细胞进行干细胞特性和多分化潜能的免疫组织化学鉴定。主要观察指标:①显微镜下观察细胞生长情况。②神经干细胞分化情况及免疫鉴定。结果:①原代细胞种植后24h可见大量分裂期的神经干细胞,呈对称或不对称分裂,细胞核较大,连续观察可见细胞分裂成2个完全独立的神经干细胞;48h后出现许多由4～10个细胞疏松连接的细胞团;神经干细胞进入快速增殖期5d后出现许多大小不等的细胞集落,即神经球,神经球呈规则的圆球状,细胞排列紧密,表面光滑没有突起。②培养4～6h后悬浮的神经干细胞球逐渐贴壁,大部分细胞分化后胞体呈圆形或椭圆形,具有1个或2个长突起,少量细胞具有多个粗长突起。贴壁分化3d左右,具有1个或2个突起的神经元样细胞逐渐减少,具有多个粗长突起的星形胶质细胞样细胞逐渐增多。悬浮的神经干细胞球经巢蛋白染色呈阳性反应,部分细胞呈微管相关蛋白2和胶质原纤维酸性蛋白染色阳性。结论:从胎鼠纹状体中分离培养的神经干细胞具有自我增殖、自我更新能力,并能分化为神经元及神经胶质细胞。
- 王学明刘秀梅衣明纪黄勇
- 关键词：神经干细胞巢蛋白
- 瘢痕疙瘩端粒酶分子调控机制的研究
- 黄勇邢新王鹏王学明陈才远毕庆霞
- 本研究以增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织标本和培养的成纤维细胞为对象，采用免疫组化、PCR-ELISA和半定量RT-PCR的方法研究hTERT、bcl-2和p53在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达及端粒酶活性。研究发现，端粒酶在瘢痕...
- 关键词：
- 关键词：瘢痕疙瘩端粒酶分子调控机制
