王华洪
- 作品数：19 被引量：73H指数：6
- 供职机构：岳阳市疾病预防控制中心更多>>
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- 医院污水中EV71病毒核酸的检验被引量：1
- 2009年
- 目的研究医院污水EV71病毒核酸的检测方法,为手足口病控制提供依据。方法用载阳电荷的硅胶滤材吸附浓集污水中的EV71病毒,然后用RT-PCR和实时荧光PCR技术检测EV71病毒。结果建立的载阳电荷硅胶浓集方法能有效浓集医院污水中的EV71病毒,通过对6家医院的医院污水检测有2家检出EV71病毒核酸,所有检出EV71核酸的医院污水余氯都不符合国家卫生标准。结论医院污水中含有EV71病毒核酸,提示其为环境中EV71病毒的重要污染源,因此需要加强医院污水消毒的监督检查。
- 王华洪白志永
- 关键词：医院污水EV71病毒
- 危重脑炎脑膜炎患儿的临床诊断与病原学检测分析被引量：6
- 2013年
- 目的对脑炎脑膜炎病例进行临床诊断与实验室检测,在病原学上为临床治疗提供直接依据。方法对入院患儿进行血常规、尿常规、生化及血凝检查,采集患儿脑脊液、血液及咽拭子标本,进行脑膜炎奈瑟菌、B型流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、猪链球菌、大肠杆菌等分离培养;ELISA法检测麻疹病毒、风疹病毒IgM抗体;设计特异性引物RT-PCR法检测肠道病毒、乙脑病毒、水痘-带状疱疹病毒、单纯疱疹病毒、腮腺炎病毒,对核酸检测阳性的病原体进行基因测序、Blast比对及应用Mega 5.0构建分子进化树;根据病原体的种类及基因型别,有针对性地选择药物进行临床救治。结果脑炎脑膜炎患儿脑脊液、血液及咽拭子标本细菌培养均为阴性;咽拭子标本腮腺炎病毒PCR核酸检测阳性,琼脂糖凝胶电泳产物大小约300 bp;阳性产物测序结果与腮腺炎病毒疫苗株比较,存在部分核苷酸变异,关键的抗原位点没有发生变化;所测基因序列经分子进化分析确定为腮腺炎病毒基因F型,与目前中国流行毒株基因型别一致,患儿经对症治疗已康复出院。结论细菌学和病毒学实验室筛查,对引起脑炎脑膜炎的常见病原体具有积极的作用,早期病毒核酸测序能确诊腮腺炎病毒感染类别及基因型别。
- 周志红王华洪
- 关键词：病原学检测腮腺炎病毒
- 一例麻疹病例的实验室确诊及病毒种系进化分析
- 2012年
- 目的对一例疑似麻疹病例进行实验室诊断,同时对病毒种系进化进行分析。方法应用Measles IgM试剂盒(μ-capture)对疑似患者血清进行病毒IgM抗体的检测,采集咽拭子标本,提取总RNA,合成麻疹病毒核蛋白基因特异性扩增引物,应用RT-PCR及Real-time PCR进行扩增,回收阳性扩增产物,进行序列测定,将所测序列与国内外麻疹病毒株序列进行核苷酸同源性分析,应用MEGA5.0软件构建核蛋白基因种系进化树。结果疑似病例血清麻疹病毒IgM抗体为阳性;RT-PCR法扩增病毒核蛋白基因可见一约330bp大小的条带;与Genbank报道的国内Mvi Hunanstrain 1、MviHunan strain 2、MviHunan strain 3的同源性最高;种系进化分析表明MviHunan Yueyang strain同所有H1型的麻疹病毒聚集在进化树的B组内,为麻疹病毒H型H1亚型。结论分离的病毒为麻疹病毒H1型,基因分型技术能进一步对病毒亚型进行鉴定。
- 陈力王华洪
- 关键词：麻疹麻疹病毒核蛋白基因
- 岳阳市吸毒人群四种血液传染病感染的流行病学调查被引量：7
- 2005年
- 目的了解岳阳市吸毒人群中艾滋病、丙型肝炎、乙型肝炎和梅毒等四种血液传染病的感染状况及其影响因素,为做好综合防治提供依据。方法对岳阳市强制戒毒所吸毒人员进行问卷调查,并采用常规方法检测Anti-HIV、Anti-HCV、HBsAg和梅毒抗体并作统计分析。结果277名吸毒人员中HIV感染率4.69%,HCV感染率81.95%,HBV感染率(HBsAg阳性率)14.08%,梅毒感染率2.53%,13名HIV感染者均合并感染HCV。结论本市吸毒人群中HIV、HCV感染率较高,静脉吸毒和共用针具吸毒是HIV和HCV传播的高危因素,不洁性行为增加了HIV、HCV、梅毒、乙肝由吸毒人员向其它人群传播的危险性。
- 王华洪吴日明张大迁李水雄
- 关键词：吸毒人群HIVHCVHBV梅毒
- “二劳”人员中HBV、HCV感染的血清流行病学调查被引量：1
- 2006年
- 目的了解监狱和劳教所人群中HBV、HCV感染状况,为制定特殊人群中预防控制措施提供依据。方法用ELISA法对1 976人血标本进行血清学检测及分析。结果HBV总感染率81.73%,HCVIgG阳性率为10.98%,HBV标记得出16种感染组合模式,HCV标记得出14种感染组合模式。结论劳改、劳教人员中的HBV和HCV感染率均高于普通人群。
- 何华先王华洪张大迁
- 关键词：HBVHCV感染率
- rpoB基因突变与结核分枝杆菌利福平耐药相关性研究被引量：8
- 2013年
- 目的探讨临床患者痰标本中分离的结核分枝杆菌rpoB基因突变与利福平耐药之间的关系。方法对115株结核分枝杆菌应用L-J药敏培养法,检测对利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星的耐药情况;根据rpoB基因序列设计包含利福平耐药决定区(RRDR)的扩增引物,PCR法进行扩增,运用生物信息学方法对耐药决定区扩增产物序列进行比对分析,对耐药株与非耐药株基因突变率进行统计学分析。结果 115株结核分枝杆菌经比例法药敏试验,RIF耐药株53株,占所有菌株的46.09%;53株RIF耐药株中39株rpoB基因存在不同位点的变异,突变率为73.58%,突变位点包括531、526、522、516、513、511,最主要的突变位点集中在531位,引起氨基酸呈Ser531Gln、Ser531Leu、Ser531Trp 3种形式改变;RIF敏感株62株,其中有2株检测到rpoB基因的突变,敏感株与耐药株突变率经McNemar统计检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论岳阳地区rpoB基因变异与利福平耐药呈高度相关,rpoB基因最主要的突变位点位于531位和526位。
- 周志红王华洪
- 关键词：结核分枝杆菌利福平耐药RPOB基因突变
- 巢式PCR在腺病毒F亚属引起的致腹泻肠道感染检测中的应用被引量：3
- 2009年
- 目的建立一种特异、敏感、快速地检测致腹泻肠道腺病毒F亚属的巢式PCR方法,了解引起肠道致腹泻感染中腺病毒的携带情况。方法根据腺病毒F亚属基因编码序列,设计一对通用引物扩增靶基因片段,扩增后片段长度为520 bp,另根据相对保守序列设计一对特异性的引物以第一次PCR扩增后的产物为模板,再进行PCR扩增,片段长度为300 bp。通过ABI3130基因检测仪来评价该方法的特异性;对腺病毒模板做10倍比系列稀释后进行巢式PCR检测,并对其敏感性进行分析,对PCR扩增产物进行电泳和测序鉴定。结果肠道致腹泻肠道感染中通过巢式PCR扩增反应可检出腺病毒F亚属,通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;在敏感性检测中PCR检测肠道腺病毒模板的下限为2.08×10-4μg/ml。结论本研究建立了一个快速、特异、敏感的肠道腺病毒PCR检测方法,适用于流行病学调查及临床检测。
- 张志华王华洪兰喆
- 关键词：巢式PCR肠道腺病毒基因测序
- 人源性甲型流感病毒(H1N1)分离株血凝素生物学特征分析被引量：2
- 2010年
- 目的分离人甲型H1N1流感病毒,探讨血凝素基因的生物学特征。方法采集流感患者鼻咽分泌物,MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制实验测定病毒滴度,提取病毒总RNA,设计特异性引物,RT-PCR扩增HA基因ORF开放阅读框cDNA,克隆到pUCm-T载体,转化大肠杆菌XL1-Blue,经蓝白斑筛选阳性克隆,PCR鉴定后进行基因序列测定,通过生物信息学软件对HA的基因组结构和生物学特征进行分析。结果通过MDCK细胞培养成功分离出人甲型H1N1流感病毒,并于接种后24 h出现CPE,第二代病毒培养物滴度为256;成功扩增出产物大小为1 701 bp的H1N1流感病毒HA基因;构建了pUCm-T/HA载体并测序成功;BLAST结果显示与A/California/04/2009(H1N1)病毒株核苷酸与氨基酸同源性均为99%,所分离的毒株包含20种566个氨基酸。结论甲型H1N1流感病毒的分离和HA基因的测序,为后续HA蛋白的功能学研究奠定了坚实基础。
- 王华洪袁丹何太平
- 关键词：A型流感病毒病毒分离
- 两种协同过筛法检测细菌β-内酰胺酶的比较研究
- 2010年
- 目的比较以EDTA-Na2或2-巯基乙醇为酶抑制剂的协同过筛法检测细菌金属酶的敏感性,为临床筛选金属酶,探究细菌的耐药机制提供依据。方法收集68株产金属酶耐亚胺培南(IPM)或三代头孢的细菌,以EDTA-Na2或2-巯基乙醇为酶抑制剂,头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)和亚胺培南(IPM)为底物在MH平板上用纸片扩散法进行抗生素协同敏感性检测。结果 2-巯基乙醇筛选法检出金属酶的阳性率为77.9%(53/68);EDTA筛选法阳性率为57.4%(39/68);两种方法联合使用阳性率为92.6%(63/68)。结论两种方法阳性率差异无统计学意义(χ2=3.12,P>0.05),联合应用对金属酶的检出率更高。
- 周丹王华洪
- 关键词：阳性率耐药性
- 2009年华容县80例手足口病患儿病原学及临床特征研究被引量：4
- 2010年
- 目的对疑似手足口病的住院患儿结合临床症状应用分子生物学方法进行实验室检测,及早确定治疗方案与预防策略,防止暴发流行。方法对疑似患儿进行流行病学调查,采集肛拭纸、咽拭纸、疱疹液及脑脊液,提取RNA,运用3对特异性引物进行PCR扩增,对阳性病例的性别、年龄和流行月份等指标进行统计学分析。结果 80例疑似手足口病患儿经RT-PCR检测,肠道病毒通用引物阳性的有64例(80%),其中EV71引物阳性的39例(48.75%),COX-A16引物阳性的19例(23.75%),EV71与COXA16引物同时阳性的有6例(7.5%),患儿性别差异无统计学意义(P>0.05),全年病例主要分布在5月份(18.75%)。无死亡病例。结论对手足口病疑似患儿进行病原学检测,能为临床治疗及制定预防措施提供科学依据。
- 戴毅张志华王华洪
- 关键词：手足口病RT-PCR分子流行病学
