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王兴忠

作品数:11 被引量:21H指数:3
供职机构:江苏大学基础医学与医学技术学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金江苏省医学领军人才基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇会议论文
  • 5篇期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生

主题

  • 9篇干细胞
  • 7篇细胞
  • 6篇间质干细胞
  • 5篇骨髓
  • 5篇骨髓间质
  • 5篇骨髓间质干细...
  • 3篇生物学
  • 3篇生物学特性
  • 3篇肿瘤
  • 3篇细胞培养
  • 3篇基因
  • 3篇间质
  • 3篇TNFΑ
  • 3篇TUMSTA...
  • 2篇人脐带间质干...
  • 2篇融合基因
  • 2篇髓系
  • 2篇髓系白血病
  • 2篇脐带
  • 2篇脐带间质干细...

机构

  • 11篇江苏大学
  • 2篇江苏大学附属...
  • 1篇常州市第一人...
  • 1篇苏州大学附属...

作者

  • 11篇王兴忠
  • 9篇许文荣
  • 8篇乔纯
  • 8篇钱晖
  • 7篇朱伟
  • 7篇杨欢
  • 5篇周洪兴
  • 5篇周忠海
  • 4篇司煜安
  • 4篇徐静
  • 3篇阴晴
  • 3篇胡嘉波
  • 2篇陈永昌
  • 1篇毛飞
  • 1篇邱国强
  • 1篇张蕾蕾
  • 1篇严永敏
  • 1篇李继刚
  • 1篇谢晓宝
  • 1篇韩崇旭

传媒

  • 2篇临床检验杂志
  • 2篇第一届国际肿...
  • 1篇中华检验医学...
  • 1篇中国生物医学...
  • 1篇江苏大学学报...
  • 1篇中国免疫学会...

年份

  • 3篇2008
  • 2篇2007
  • 6篇2006
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达被引量:1
2008年
目的:构建携带绿色荧光蛋白的TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒表达载体,转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)。方法:设计含有GM-CSF信号肽序列和BglⅡ及HindⅢ酶切位点的引物,PCR扩增TNFα-Tumstatin,将扩增产物亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组。筛选获得含有融合基因的重组腺病毒质粒,酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,经过包装、扩增后感染hUCMSCs并检测细胞内融合基因的表达。结果:重组腺病毒质粒经PCR和PacⅠ酶切鉴定,证实含有TNFα-Tumstatin融合基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒感染的hUCMSCs表达绿色荧光蛋白和融合基因。结论:成功构建了TNFα-Tumstatin融合基因的腺病毒表达载体,能高效率感染hUCMSCs,为进一步研究融合基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤效应奠定了基础。
周忠海许文荣朱伟乔纯王兴忠陈圆司煜安徐静周洪兴张蕾蕾李继刚钱晖
关键词:腺病毒载体融合基因细胞转染
PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞的实验研究被引量:3
2006年
目的建立PKH26标记大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)的方法,并探讨标记MSCs的基本生物学活性。方法大鼠MSCs按PKH26标记程序进行标记后培养,采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析仪等观察细胞生长状态和荧光标记活性变化;应用RT-PCR检测标记后MSCs的GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因的表达;选用碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色及骨形成蛋白3(BMP3)基因表达分析等技术,观察标记后MSCs体外分化成骨细胞的特性。结果PKH26标记后细胞呈红色荧光,荧光的强度随着PKH26浓度的增加而递增,并与传代时间和代数相关;标记后细胞生长状态良好,基本生长特性如传代培养和生长曲线无明显改变;细胞GAPDH、nucleostemin及Bmi-1基因表达未见改变;标记MSCs诱导后ALP、Von Kossa染色阳性,呈现典型的成骨细胞形态和生物学特征,并表达BMP3基因。结论PKH26可稳定标记大鼠骨髓MSCs并能传代培养,标记后细胞形态、生长活力及多向分化潜能等无明显影响,该技术可用于追踪MSCs转归、可塑性及干细胞移植方面的实验研究。
杨欢许文荣朱伟王兴忠乔纯胡嘉波钱晖陈永昌
关键词:骨髓间质干细胞PKH26成骨细胞RT-PCR
腺病毒介导的RNA干扰技术抑制肿瘤细胞Nucleostemin表达的初步研究
目的:研究RNAi效应对肿瘤细胞中Nucleostemin基因的干扰抑制,达到较好的抗肿瘤生长及抗肿瘤转移的目的。方法:体外化学合成针对Nucleostemin基因的小干扰RNA片断(siRNA)P1P2.P3P4,设计...
徐静许文荣韩崇旭乔纯王兴忠杨欢周洪兴司煜安周忠海
文献传递
TNFα-Tumstatin融合基因的重组腺病毒载体构建及其表达与检测
目的:构建带EGFP的TNFα-Tumstatin融合基因的真核表达载体,并探讨该载体在真核细胞如骨髓 MSCs中的表达效率。方法:采用PCR技术从质粒PBV220-TNFα-Tumstatin扩增融合基因,插入pAdt...
王兴忠乔纯杨欢周洪兴司煜安徐静周忠海钱晖许文荣
关键词:TNFΑTUMSTATIN腺病毒骨髓间质干细胞
文献传递
髓系白血病干细胞培养及生物特性研究
目的:对急性髓系白血病骨髓单个核细胞进行体外培养,获得白血病干细胞并研究其生物学特性。 方法:体外培养急性髓系白血病人的骨髓单个核细胞,观察其形态学特征、长期存活及增殖特性,采用染色体分析和流式分析技术研究其核...
周忠海王兴忠阴晴周洪兴钱晖朱伟邱国强谢小宝许文荣
关键词:白血病干细胞生物学特性体外培养
文献传递
骨髓间质干细胞对大鼠急性肾功能衰竭的治疗研究
目的:建立大鼠ARF模型和骨髓MSCs对大鼠急性肾功能衰竭的治疗研究。方法:通过在大鼠两侧后肢肌肉注射50%甘油生理盐水建立ARF模型,应用MSCs尾静脉输注进行治疗,检测血清Cr、BUN等指标观察MSCs对大鼠ARF的...
杨欢许文荣陈巧林朱伟乔纯王兴忠
文献传递
人脐带间质干细胞的分离纯化及生物学特性鉴定被引量:4
2008年
Objective To isolate mesenchymal stem cells(MSCs)from human umbilical cord and investigate the basic biological characteristics.Methods Human umbilical cord mesenchymal stem cells(hUCMSCs)were separated from culture of tissue adherence and the biological characteristics,including morphologic appearance,surface antigens,growth curve,cell cycle,cytogenetic features,differentiation potential and gene expression,were investigated.Results After two weeks of incubation,fibroblast-like cells appeared to be dominant.During the second passage the cells presented a homogeneous population of spindle fibroblast-like cells.Flow cytometry analysis revealed that CD29,CD44,CD95,CD105 and HLA-I were expressed on the surface of cells,but there was no expression of hematopoietic lineage markers,e.g.,CD34,CD38,CD71 and HLA-DR.Chromosomal analysis showed the cells kept normal karyotype.The cell cycle at the third passage showed the percentage of G0/G1,G2/M and S phase were 88.86%,5.69% and 5.45% respectively.The assays in vitro demonstrated the cells exhibited multipotential differentiation into osteogenic and adipogenic cells.Both BMI-1 and nucleostemin genes,expressed in adult MSCs from bone marrow,were also expressed in hUCMSCs.Conclusion Here we show the umbilical cords may be a novel alternative source of human MSCs for experimental and clinical applications,which almost have the same biological characteristics of human adult MSCs.
乔纯许文荣朱伟胡嘉波钱晖阴晴杨欢王兴忠严永敏毛飞陈永昌
关键词:间质干细胞脐带分化
慢病毒-TNFα-Tumstatin的分子构建及抗肿瘤作用的研究
目的:将TNFα-Tumstatin融合蛋白构建到慢病毒表达载体上,研究其抗肿瘤作用。方法:从质粒PBV220-TNFα-Tumstatin扩增融合基因,以NheI和AgeI为酶切位点,插入PNL-EGFP/ CMV质粒...
乔纯许文荣姜润秋钱晖朱伟王兴忠杨欢周洪兴
文献传递
骨髓间质干细胞体内致瘤研究
本研究在对骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)的培养、生物学特性及荧光标记研究的基础上,研究骨髓MSC的体内致瘤性,及临床应用的安全性问题,初步探讨骨髓MSC突变成肿瘤细胞的可能机理,为...
钱晖王兴忠徐静朱伟严永敏许文荣
关键词:间质干细胞肿瘤干细胞细胞培养生物学特性荧光标记
文献传递
人骨髓间质干细胞PKH26荧光标记技术被引量:12
2006年
目的建立一种 PKH26体外荧光标记人骨髓间质干细胞(MSCs)的方法。方法培养人骨髓间质干细胞,按 PKH26标记程序进行标记后培养,采用激光共聚焦显微镜、流式细胞分析,观察标记后人 MSCs 生长状态、荧光强度变化和传代培养效果。应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法观察标记细胞的生物学功能。结果标记后 MSCs 呈红色荧光,标记率达100%,体外连续传代培养7代后,荧光标记细胞荧光强度逐渐减弱,荧光标记细胞百分比逐渐减低。PKH26标记MSCs 的生长形态、生长活力、nucleostemin、三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因表达及体外诱导分化能力等生物学特性不发生改变。结论 PKH26荧光标记人 MSCs 是一种有效、实用的方法,该方法对MSCs 转归、可塑性及 MSCs 移植治疗研究具有重要的价值。
王兴忠许文荣朱伟杨欢乔纯钱晖胡嘉波
关键词:间质干细胞骨髓
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