王丹艺
- 作品数：6 被引量：28H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠肝纤维化时TGFα在Ito细胞中的表达被引量：2
- 1999年
- 采用大鼠肝Ｉｔｏ细胞体外分离的方法，并用逆转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）方法观察ＴＧＦα在Ｉｔｏ细胞中表达的情况。结果显示：正常大鼠（６例）肝Ｉｔｏ细胞ＴＧＦα∶βａｃｔｉｎ＝０８９∶１００＝０８９，肝纤维化大鼠（６例）肝Ｉｔｏ细胞ＴＧＦα∶βａｃｔｉｎ＝３７２∶１００＝３７２，Ｐ＜００５。结果表明肝纤维化时Ｉｔｏ细胞中ＴＧＦα表达显著增加，提示ＴＧＦα在肝纤维化激活及调控中具有重要作用。
- 王丹艺李宣海刘海林巫向前
- 关键词：TGFΑITO细胞肝纤维化病理
- 绿色荧光蛋白及其应用被引量：26
- 2001年
- 源于水母 (Aequoreavietoria)等海洋无脊椎动物的绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)是一种极具潜力的标记物。其内源荧光基团在受到紫外光或蓝光激发时可高效发射清晰可见的绿光 ,且荧光性质稳定 ,与现有的标记物相比 ,GFP具有无可比拟的优势。因而自GFP被发现以来 ,一直作为一个监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白定位的理想标记。广泛应用于转基因动物的研究、融合标记、基因治疗、蛋白在活细胞内功能定位及迁移变化 ,病原菌侵入活细胞的分子过程等。
- 倪培华温惠萍王丹艺周同王鸿利
- 关键词：水母绿色荧光蛋白标记物
- P-选择素凝集样区和绿色荧光蛋白融合基因的构建
- 2001年
- 目的 构建P 选择素凝集样区与绿色荧光蛋白融合基因 (pEGFP N1/L) ,为进一步明确P 选择素不同表位与功能间的关系 ,为阐明P 选择素生理病理意义奠定基础。方法 应用PCR技术扩增质粒pCDM 1/cDNA凝集素样区 ,用T4连接酶将其插入载体 pEGFP N1;经酶切和测序对插入片段进行分析、鉴定。 结果 通过酶切和序列分析证实插入片段序列正确。结论 应用基因工程技术构建 pEGFP N1/L融合基因成功 ,为绿色荧光蛋白作为生物标记分子来研究P
- 王丹艺倪培华宋巍温惠萍周同
- 关键词：P-选择素绿色荧光蛋白基因重组
- P-选择素凝集素样结构域和红色荧光蛋白融合基因的构建
- 2002年
- 目的 构建P 选择素凝集素样结构域与红色荧光蛋白融合基因 (pDsRed1 N1/L) ,以进一步明确P 选择素不同表位与功能间的关系 ,为阐明P 选择素生理病理意义奠定基础。方法 应用PCR技术扩增质粒 pCDM1/cDNA凝集素样区 ,用T4连接酶将其插入载体pDsRed1 N1;经酶切和测序对插入片段进行分析、鉴定。结果 通过酶切和序列分析确定重 ,组pDsRed1/N1的片段为目的基因的核苷酸序列。 结论 应用基因工程技术构建 pDsRed1 N1/L融合基因成功 ,为红色荧光蛋白作为生物标记分子来研究P 选择素分子的构效关系打下基础。
- 王丹艺倪培华宋巍应雅韵周同
- 关键词：P-选择素红色荧光蛋白融合基因
- 人P选择素lectin基因片段的克隆及表达
- 2001年
- 应用PCR技术扩增P选择素lectin基因 ,克隆入pET42b (+)载体 ,测序验证后在大肠杆菌BL2 1中表达了lectinC端融合 6×His蛋白 ,表达产物经Ni2 + NTAsuperflow亲和柱纯化 ,纯度可达 90 %以上 ,得率为 0 9mg/ 10 0ml,其表达量达到总菌体蛋白的 15 %。SDS PAGE和Western印迹试验显示 ,表达产物相对分子质量为 130 0 0。
- 倪培华宋巍周同王丹艺王锋
- 关键词：P选择素基因表达蛋白纯化
