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作为基因转移载体的乙型肝炎病毒衣壳对肝癌细胞的靶向性: 2007年; 目的:探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌细胞的靶向性和有效性。方法:采用PEG8000病毒浓缩法、β-丙内脂法从能持续产生HBV的HepG2.2.15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳(hepatitisBvirusenvelope,HBVE),用它包裹绿色荧光蛋白质粒(pIRS2-EGFP)后得到基因转移载体复合物HBVE-GFP,用脂质体包裹pIRS2-EGFP后得到基因转移载体复合物Liposome-GFP。用HBVE-GFP及作为对照的Liposome-GFP转染人成肝细胞瘤HepG2细胞来研究其转导效率;用HBVE-GFP分别转染HepG2细胞及作为对照的人肺腺癌细胞A549、人宫颈癌细胞HeLa、人皮肤成纤维细胞FB来研究其靶向性;荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞术检测细胞发光率。结果:(1)有效性检测:Liposome-GFP组及HBVE-GFP组均可见绿色荧光蛋白的表达,HBVE-GFP组的荧光强度较Liposome-GFP组更强(P<0.01);Liposome-GFP组的转染效率为(49.97±2.37)%,而HBVE-GFP组为(70.65±3.15)%,两者差异显著(P<0.01)。(2)靶向性检测:各种细胞均可见绿色荧光蛋白的表达,HepG2细胞较其他细胞具有更强的荧光强度(P<0.01),HepG2细胞的转染效率为(71.35±0·03)%,显著高于其他3组(P<0.01)。结论:乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌细胞具有较好的转染有效性和靶向性。; 潘德键王东林王卫兵周锡建陈正堂; 关键词：基因转移载体转染效率靶向性肝癌

健择单药联合伽玛刀治疗18例晚期胰腺癌疗效观察被引量：5: 2007年; [目的]观察健择单药联合伽玛刀治疗不能手术胰腺癌的疗效。[方法]18例晚期胰腺癌患者均采用健择1000mg/m2,第1、8天静脉输注,21天为1个周期,治疗6个周期。第1个周期化疗的第2天行伽玛刀治疗,等剂量曲线为55%～70%,肿瘤≤5cm的单次周边剂量4.0Gy～5.5Gy,肿瘤>5cm的单次周边剂量3.0Gy～4.0Gy,治疗总剂量为32Gy～48Gy,治疗次数8～12次,6次/周。[结果]全组18例共完成96个周期化疗,3个月CT检查,CR3例(17%),PR4例(22%),NC10例(56%),PD1例(5%),中位生存期11.8个月,临床受益反应17/18(94%)。主要毒副反应是白细胞、血小板下降。[结论]健择单药联合伽玛刀治疗不能手术的晚期胰腺癌具有较好的耐受性和疗效。; 潘德键王标周锡建王东林李相勇范晓强周仁贵唐新宇; 关键词：健择伽玛刀胰腺肿瘤

伽玛刀联合鸦胆子油乳口服在高龄食管癌患者中的疗效观察被引量：2: 2007年; 目的观察伽玛刀联合鸦胆子油乳口服治疗不能耐受手术的高龄食管癌患者的疗效及副作用。方法22例高龄食管癌患者均采用鸦胆子油乳口服,20ml/次,3次/天,30天为1疗程,连用3个疗程。第一疗程的第3天行伽玛刀治疗,等剂量曲线为60%-70%,单次周边剂量3.5Gy-5.0Gy,治疗总剂量为35Gy-40Gy,治疗次数8-12次,6次/周。结果全组22例均能按计划完成治疗,3个月CT检查,CR4例(18%),PR9例(41%),NC8例(36%),PD1例(5%),中位生存期15个月,临床受益反应12/22(55%)。主要毒性反应是恶心、呕吐及白细胞下降。结论伽玛刀联合鸦胆子油乳口服治疗不能耐受手术的高龄食管癌具有较好的耐受性和疗效。; 潘德键王标周锡建王东林李相勇范晓强周仁贵唐新宇; 关键词：伽玛刀鸦胆子油乳食管癌

乙肝病毒衣壳作为肝癌基因转移载体对肝癌是否有靶向性: 2007年; 背景与目的：乙型肝炎病毒（HBV）具有嗜肝性的主要原因在于病毒衣壳（HBVE）上镶嵌的外衣壳蛋白PreS1,利用此生物特性有可能将HBVE改造成肝癌靶向性基因转移载体.本研究探讨乙型肝炎病毒衣壳作为基因转移载体对肝癌是否有靶向性.方法：采用PEG 8000病毒浓缩法、β-丙内脂法从Hep G 2.2.15细胞上清液中制备乙型肝炎病毒衣壳（HBVE）,用它包裹绿色荧光蛋白质粒（pIRS2-EGFP）后得到基因转移载体复合物HBVE-GFP,用HBVE-GFP分别转染Hep G2、A549、HeLa、FB细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,通过流式细胞仪检测细胞发光率.结果：荧光显微镜下观察可见,各组均可见绿色荧光蛋白的表达,Hep G2组较之其他3组具有更高的荧光强度;流式细胞仪检测结果显示,Hep G2组的转染效率为（71.35±0.03）%,显著高于其他3组（P＜0.001）,且其荧光强度是其他3组的3～4倍（P＜0.001）.结论：乙型肝炎病毒衣壳作为载体对肝癌具有较好的靶向性.; 潘德键王东林陈正堂; 关键词：靶向性肝癌基因转移

FP启动子调控增强型绿色荧光蛋白在人肝癌细胞中表达的研究被引量：5: 2004年; 目的　研究人 0 3kb的AFP启动子序列对EGFP在人肝癌细胞中表达的影响。方法　通过设计含有特定酶切位点的引物 ,选择性地从人基因组中扩增出人甲胎蛋白启动子 (AFPpromoter)序列 ,分别构建含有AFP启动子序列和增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)及AFP启动子序列和DTA基因的真核表达载体pAF EGFP、pAF DTA ;将pAF EGFP转染HepG2、SMMC 772 1及NIH3T3后进行荧光强度检测。结果　转染pAF EGFP质粒细胞的EGFP表达量在HepG2细胞中明显高于SMMC 772 1、NIH3T3细胞 ,组间差异显著 (P <0 0 1)。结论　AFP启动子可以特异性地启动它后面的目的基因在AFP阳性的细胞中高效表达。; 郝萍王东林; 关键词：人肝癌细胞启动子 EGFP 增强型绿色荧光蛋白 SMMC-7721 酶切位点

早期肠内营养对改善重症颅脑损伤患者炎症反应的临床效果探讨被引量：18: 2013年; 目的通过对接受早期肠内营养的重症颅脑损伤患者炎性标记物血清C反应蛋白含量进行观察,探讨早期肠内营养对于改善重症颅脑损伤患者全身炎症反应的临床效果。方法选取2008年6月至2012年10月我院收治的128例重症颅脑损伤患者,随机分入治疗组和对照组各64例,入院48 h内分别给予肠内营养和肠外营养。分别于入院1、3、5、7和14 d测定两组患者血清C反应蛋白含量和格拉斯哥昏迷评分,进行统计分析。结果两组患者C反应蛋白均呈下降趋势,但治疗组患者3、5、7、14 d C反应蛋白水平显著低于对照组(P<0.01);格拉斯哥昏迷评分第14天治疗组优于对照组(P<0.01),其他检测节点差异不明显(P>0.05)。结论早期的肠内营养不仅能够有效地减少重症颅脑患者的全身炎症反应,并且能够促进患者早日康复,具有重要的临床价值。; 余慧青马惠文田玲杨列军王东林毛德强戴勤弼; 关键词：肠道营养颅脑损伤 C反应蛋白质

含EWS-FLI1结合序列的DTA载体对报告基因表达抑制的研究被引量：1: 2004年; 目的　研究含尤文家族肿瘤EWS FLI1结合序列的DTA载体对报告基因表达的抑制作用。方法　构建含有EWS FLI1结合序列和白喉毒素A链基因的表达载体 pS2 DTA。共同转染不同剂量梯度的 pS2 DTA和pS2到尤文肉瘤细胞和对照细胞 ,检测荧光强度。结果　每增加一个 pS2 DTA剂量梯度 ,在尤文肉瘤细胞中都可以检测到虫荧光素酶的表达显著降低 ,而在对照细胞中这种作用却不明显 ;在同一个pS2 DTA剂量梯度下 ,虫荧光素酶在尤文肉瘤细胞的表达都显著高于非尤文肉瘤细胞。结论　pS2 DTA转染可以抑制尤文肉瘤细胞内其它基因表达。; 冯岗赵忠全王东林; 关键词：融合基因虫荧光素酶

伴有血性或非血性腹水肝癌患者的腹腔化疗研究: 2009年; 目的观察腹腔化疗对伴有血性或非血性腹水肝癌患者的疗效及安全性是否相同。方法将伴有腹水的43例肝癌患者按腹水性质及治疗方法分为4组：A组13例，为非血性腹水进行腹腔化疗组；B组15例，为非血性腹水对症治疗组；C组8例，为血性腹水进行腹腔化疗组；D组7例，为血性腹水对症治疗组。腹腔化疗均采用羟基喜树碱（HCPT）16mg／m^2、氟尿嘧啶（5-Fu）1000mg／m^2、地塞米松10mg，1周后重复，共2～4次。结果A组中位生存时间（MST）为4．3个月（1．8～9．3个月），腹水完全缓解（CR）1例（7．7％），部分缓解（PR）5例（38．5％），有效率46．2％，治疗期间常见副反应为白细胞、血小板下降；B组MST为2．5个月（1．7—8．3个月），腹水控制有效率0；C组MST为1．3个月（0．5—1．4个月），腹水控制有效率0，治疗期间常见副反应为恶心、呕吐以及白细胞、血小板下降；D组MST为1．8个月（0．8—2．9个月），腹水控制有效率0。结论腹腔化疗对非血性腹水的肝癌患者有一定疗效，但对血性腹水的肝癌患者疗效不佳。; 潘德键周锡建王东林李相勇范晓强周仁贵唐新宇; 关键词：肝肿瘤腹水血性腹腔化疗

EWS-FLI 1介导DTA基因在尤文肉瘤移植瘤裸鼠模型体内特异表达研究: 2006年; 尤文肉瘤是一种好发于青少年的恶性肿瘤，易在患病早期出现转移。尽管常规治疗方案可改善患者五年生存率。但在出现复发或转移的情况下，这部分患者的治疗仍较为困难。肿瘤基因治疗是目前比较活跃的领域，倍受人们的关注。恶性肿瘤基因治疗的研究为患者带来了新的希望。经研究证实，95％以上的尤文肉瘸家族中有染色体易位现象。即t（11；22）（q24；q12），形成EWS—FLI1融合基因。此融合基因只存在于肿瘤组织中，并且具有很强的转录。激活作用，可促进其下游特定基因的高表达。该融合基因的存在为尤文肉瘤基因治疗提供了一个重要线索。; 赵忠全冯岗王东林; 关键词：尤文肉瘤裸鼠模型移植瘤肿瘤基因治疗常规治疗方案

尤文肉瘤EWS—FLI 1与特异序列结合并调节表达的研究: 2006年; 95％的尤文肉瘤家族（Ewing family of tumor，EFT）具有特异的EWS—FLI1融合基因。EWS—FLI1是一个比正常的FLI1强多许多倍的转录因子，并且可以与特异ACCGGAAGT基因序列结合。把该特异性结合序列插入到荧光素酶报告基因载体（pGL3-Promoter，promega公司）中，构建了新表达载体pS2。我们用脂质体法转染pS2到尤文肉瘤细胞系（RD—ES、SK—ES）及对照细胞系（NIH3T3、Hela），然后进行荧光定量检测，检测各组细胞系相对荧光强度。结果证实尤文肉瘤的EWS—FLI1确实能够与该特异序列结合并促进下游虫荧光素酶基因的高表达。; 赵忠全冯岗王东林; 关键词：基因序列荧光定量检测荧光素酶基因融合基因

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王东林

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