熊福银
- 作品数:38 被引量:37H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>
- Nanog在肿瘤发生与维持中的功能研究
- 近年来,随着干细胞生物学的发展以及对肿瘤研究的深入,越来越多的证据表明干细胞与肿瘤细胞在生物学特性、信号通路等方面具有惊人的相似性,提示二者可能存在密切的关系.
转录因子Nanog在干细胞的自我更新和多能性维持...
- 林艳丽熊福银吴晓洁周艳荣吕月蒙陈红星
- 关键词:干细胞肿瘤发生
- 造血干/祖细胞体外的三维培养
- 造血干/祖细胞的体外培养对于造血干/祖细胞的生物学性质,造血调控,基因治疗的研究及其临床应用具有重要意义。由于造血干/祖细胞的生存环境是一个复杂而精细的调控系统,造血干/祖细胞的增殖有赖于造血生长因子,细胞因子的调控及不...
- 熊福银陈昭烈刘红刘兴茂
- 文献传递
- 连续3步缺口修复技术构建牛αS1酪蛋白-人溶菌酶杂合基因座
- 2013年
- 目的:构建一个牛αS1酪蛋白调控序列指导人溶菌酶(hLYZ)基因组序列的杂合基因座。方法:采用本实验室发明的连续3步缺口修复技术。将6个无痕连接的同源臂插入以pBR322为载体的骨架中,构成能进行3次连续基因抓捕的载体,利用Red同源重组系统介导的缺口修复技术,分别抓捕牛αS1酪蛋白3'端调控序列(9 kb)、hLYZ基因座序列(5 kb)、牛αS1酪蛋白5'端调控序列(20 kb),使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上,形成牛αS1酪蛋白-hLYZ杂合基因座。结果:实验经过PCR扩增、限制性内切酶酶切验证和序列测定,验证了hLYZ的基因组序列对牛αS1酪蛋白编码基因组序列的精确置换。结论:这种修复技术为乳腺生物反应器高效表达大载体的制备提供了可行的思路及方法。
- 郑芸芸周艳荣吴晓洁林艳丽熊福银李力陈红星
- 关键词:人溶菌酶
- 用悬浮搅拌培养体系体外大量扩增人脐血造血干/祖细胞被引量:1
- 2002年
- 目的 :建立一种简便、有效的脐血造血干 /祖细胞体外大量扩增培养体系。方法 :淋巴细胞分离液分离的脐血单个核细胞在SCF ,IL - 3,IL - 6三种细胞因子的作用下 ,于悬浮搅拌培养体系中培养 ,分析其总细胞数、CFU -GM、CD34+ 细胞的扩增倍数。结果 :脐血单个核细胞在悬浮搅拌培养体系中培养 12天后 ,其总细胞数、CFU -GM、CD34+ 细胞的扩增倍数分别为 6 .31± 1.5 2 ,2 0 .6 3± 1.5 4和 7.11± 1.12。结论 :悬浮搅拌培养体系是脐血造血干 /祖细胞体外大量扩增的有效培养体系。
- 熊福银陈昭烈刘红胥照平刘兴茂
- 关键词:体外大量扩增
- HEK293F细胞的无载体固定化培养及重组腺病毒的高效扩增
- 本文介绍了利用HEK293F细胞在搅拌培养体系中悬浮培养具有聚集、形成细胞团的倾向,通过对HEK293F细胞团的控制,结合旋转滤器截留培养体系中HEK293F细胞团,建立了HEK293F细胞的无载体固定化培养技术.
- 陈昭烈刘红吴本传熊福银黄培堂
- 关键词:重组腺病毒人胚肾细胞基因治疗固定化培养
- 文献传递
- 在多孔胶原支架上构建三维工程的心肌组织(英文)被引量:2
- 2004年
- 背景:目前已有转化的SV40细胞系、C2C12成肌细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞以及胚胎干细胞用于修复哺乳动物心脏的细胞移植治疗,然而细胞移植治疗对严重缺失或损伤心肌结构的治疗的作用却不大。组织工程技术为此类心肌疾病的研究及治疗提供了新的可能性,目前已有可替代和改善骨、软骨、肾、肝、神经及皮肤等组织和器官的生物合成结构物。目的:探索多孔胶原作为构建三维工程心肌组织支架材料的可行性。设计:非随机、对照的实验研究。地点和对象:实验地点:军事医学科学院生物工程研究所。动物:清洁级1日龄Wistar大鼠400~500只,雌雄不限,体质量8~10g;成年Wistar大鼠五六只,雌雄不限,体质量250g,由军事医学科学院实验动物中心提供,饲养温度22~26℃,湿度40%~60%。干预:在无菌条件下,将经胰蛋白酶消化获得的新生鼠心肌细胞分别接种于三维多孔胶原支架和培养板上,比较心肌细胞在两种培养模式的代谢差异。主要观察指标:检测葡萄糖比消耗率、乳酸比产率、乳酸转化率、肌酸激酶及乳酸脱氢酶活力变化。结果:培养于多孔胶原支架上的心肌细胞的代谢特性近似于心肌细胞在培养板上培养的二维生长模式。结论:心肌细胞与多孔胶原支架形成了具有自律性同步收缩的三维工程心肌组织。
- 刘兴茂陈昭烈刘红吴本传熊福银胥照平
- 关键词:生物医学工程心肌胶原
- NMDA型谷氨酸受体在骨祖细胞和成骨细胞表达并介导力学信号转导被引量:1
- 2007年
- 目的:鉴定骨髓间充质干细胞D1和成骨细胞MC3T3-E1、MC3T3-E1亚克隆14是否表达NMDA型谷氨酸受体(NMDAR),并初步探讨NMDAR是否参与力学信号转导。方法:采用RT-PCR技术、免疫荧光染色技术、蛋白免疫杂交技术和体外细胞循环拉伸装置,鉴定了上述3个细胞系中NMDAR的表达情况,并初步探讨了在MC3T3-E1亚克隆14细胞系中,NMDAR在力学信号转导中的可能作用。结果:3个细胞系均表达NMDA受体亚基1(NR1)和不同的亚基2(NR2A-NR2D)。细胞微丝骨架的破坏并没有阻断力学应变诱导的c-jun、c-fos的表达上调;而阻断NMDAR后,却抑制了力学应变诱导的c-jun、c-fos和成骨细胞特异的转录因子Cbfa1/Runx2的表达上调。结论:NMDAR在骨中表达并发挥功能,参与了骨的力学信号转导过程。
- 曾强成张西正邢建新田利源熊福银温叶飞陈红星邓继先
- 关键词:成骨细胞力学信号转导
- 人脐血造血干祖细胞的体外三维培养和大量扩增
- 造血干祖细胞的体外培养和扩增在造血调控、干细胞生物学和临床移植中具有重要的意义.该论文通过研究SCF、IL-3、IL-6三咱细胞因子的不同组合、细胞接种密度、换兴方案和培养方式对脐血造血细胞扩增的影响,建立了脐血造血干祖...
- 熊福银
- 关键词:脐带血造血干祖细胞细胞因子体外培养
- 文献传递
- 连续3步基因抓捕构建牛αS1酪蛋白-人tPA杂合基因座
- 2011年
- 目的:构建一个利用牛αS1酪蛋白基因座完整的上下游调控序列指导人组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因组序列在乳腺特异性高效表达的牛αS1酪蛋白-人tPA杂合基因座。方法:采用连续3步基因抓捕的方法。首先,以pBR322载体作为骨架,插入预先无痕连接在一起的6个同源臂,构成能连续进行3次基因抓捕的抓捕载体;然后,在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的缺口修复技术,第一步从含牛αS1酪蛋白基因座的细菌人工染色体(BAC)上亚克隆9 kb的牛αS1酪蛋白基因3'端侧翼序列到抓捕载体上,第二步从人tPA BAC上亚克隆17 kb的从起始密码子(ATG)到终止密码子(TGA)的人tPA基因组序列,第三步从牛αS1酪蛋白BAC上亚克隆20 kb的牛αS1酪蛋白基因5'端完整侧翼序列,并使这3个基因片段在抓捕载体上自动无痕地连接在一起,形成一个长约46kb的牛αS1酪蛋白-人tPA杂合基因座。结果:经过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,构建的杂合基因座中,原牛αS1酪蛋白基因组编码序列从起始密码子到终止密码子被人tPA基因组序列精确置换。结论:连续三步基因抓捕构建杂合基因座乳腺表达载体的技术,为乳腺生物反应器高效表达大载体的制备提供了探索性研究。
- 吕月蒙吴晓洁周艳荣熊福银林艳丽陈红星
- 关键词:细菌人工染色体组织型纤溶酶原激活剂
- 采用细胞悬浮培养技术扩殖脐血干/祖细胞
- 自1989年Gluckman成功地将脐血移植用于治疗恶性贫血患儿以来,脐血造血干/祖细胞研究受到了极为广泛的关注。由于脐血中造血干/祖细胞的相对含量较骨髓更为丰富,且来源方便,采集容易,所以人们希望以脐血造血干细胞的移植...
- 熊福银陈昭烈刘红刘兴茂
- 文献传递