潘军航
- 作品数：50 被引量：247H指数：8
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 浙江省209株沙门菌PFGE指纹图谱研究被引量：13
- 2009年
- 目的：建立浙江省沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为查明沙门菌食源性疾病污染源,确定各病例之间的病原学关系,及时处理大范围内呈散发特征的沙门菌事件提供科学依据。方法：收集、提取全省历年来在各类食品和腹泻病人中分离的209株沙门菌的DNA,用限制性内切酶Xbal切割,脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术建立PFGE指纹图谱,用BioNu-merics V5.1软件UPGMA方法进行聚类分析。结果：209株沙门菌分成10个基因型别160种PFGE基因指纹图谱。其中67株德尔卑沙门菌可分为6个型别35种PFGE指纹图谱,主要集中在1个PFGE指纹图谱型别中。14株肠炎沙门菌分属3个型别8种PFGE指纹图谱,相似系数在0.800-1.000之间。鼠伤寒沙门菌间的PFGE指纹图谱差异较大。结论：PFGE指纹图谱与血清学型别无相关性,该方法在研究沙门菌分子流行病学、确定各病例之间的病原学关系效果良好。
- 梅玲玲罗芸叶菊莲朱敏张俊彦潘军航龚璞杨婷婷
- 关键词：沙门菌脉冲凝胶电泳
- PCR/LAMP快速筛检NDM-1超级耐药菌的方法建立被引量：2
- 2011年
- 目的:针对NDM-1超级耐药菌建立PCR/LAMP快速筛检方法。方法:根据GENBANK登录的NDM-1基因序列分别设计PCR/LAMP引物。分别优化PCR/LAMP反应条件和反应体系,并对已知特性的41株标准株、1株NDM-1阳参克隆株以及275株不同地区上送的地方株进行检测,验证两方法的特异性、敏感性。结果:两方法特异性均好,除阳参克隆株能扩增出阳性对应条带,其它标准株及地方上送株则检测不出相应条带;两方法检测限稍有差异,其中LAMP检测限为31 cfu/反应,PCR检测限为123 cfu/反应;LAMP法从菌株核酸提取至检测完成仅需1.5 h^2 h左右,实现反应及产物检测一步完成;PCR法因扩增产物需凝胶电泳再经紫外观察,故时间相对较长,共需3 h^4 h。结论:本研究针对超级耐药菌NDM-1基因建立的PCR/LAMP方法其特异性、灵敏度均相对较好,可用于今后应对NDM-1超级细菌应急检测技术储备以及目前针对超级细菌的监控防控。
- 朱水荣王志刚潘军航魏兰芬张政梅玲玲
- 关键词：筛检
- 发热伴血小板减少综合征病毒蛋白Gc原核表达及免疫原性研究被引量：2
- 2019年
- 目的对原核表达发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)蛋白Gc免疫原性进行初步研究。方法参照SFTSV HB29病毒株包膜蛋白Gc编码基因,通过大肠埃希菌密码子偏好性优化后化学合成方法得到Gc目的基因。将目的基因导入到载体pET-His中,得到表达载体pET-His-Gc。经测序确认后转化到BL21(DE3)感受态细胞中表达,纯化后进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot验证。蛋白免疫新西兰大白兔后收集兔血清进行抗体效价测定。结果成功构建了pET-His-Gc融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌中得到可溶性表达,且得到的Gc蛋白具有良好的免疫原性。动物实验结果表明,3次免疫后兔血清的抗体效价可达到1∶512 000。结论实现了SFTSV包膜蛋白Gc的原核表达,为后续SFTSV包膜蛋白的研究奠定了基础。
- 姚文武颜浩楼秀玉潘军航孙逸茅海燕张严峻
- 关键词：原核表达免疫原性
- 一株新MLST型创伤弧菌的分离鉴定被引量：4
- 2014年
- 目的对从住院病人脓液标本中分离的创伤弧菌(2012-DY VV1)进行病原学分析与研究。方法采用全自动微生物分析仪进行生化鉴定和耐药性分析;采用PCR方法检测溶细胞素vvhA基因,及vcg和16S rRNA基因分型;应用多位点序列分析(MLST)进行分子生物学分型。结果该菌株经生化鉴定为创伤弧菌(概率为90%);对大多数常用抗生素都敏感,但对头孢唑啉、头孢替坦中度敏感;PCR检测vvhA阳性,为vcgC-16S rRNA B基因型;菌株的序列型为glp6,gyrB 6,mdh 2,metG 12,purM 7,dtdS 15,lysA 12,pntA 7,pyrC 9,tnaA 15。结论该菌株的vcg和16S rRNA PCR分型为CB型,提示具有较强的致病能力;MLST分型为新发现的ST菌株,被命名为ST136,注册号为id-218。
- 韦俊超潘军航李月华
- 关键词：创伤弧菌基因分型多位点序列分型
- LAMP技术应用于新发传染病病原菌鉴定研究
- 朱水荣王志刚张政梅玲玲陈寅卢亦愚杨婷婷潘军航余昭金大智徐宝祥
- 项目采用2008年Tomita等报道的最新改良LAMP技术，针对新发传染病病原菌O139霍乱弧菌、出血性大肠杆菌0157：H7、嗜肺军团菌、香港海鸥形菌、猪链球菌、钩端螺旋体、超级耐药菌等建立了十余种快速诊断技术，这些方...
- 关键词：
- 关键词：传染病诊断病原菌检测
- 浙江省舟山市售贝类中创伤弧菌的定量检测及毒力基因分析被引量：1
- 2012年
- 目的了解2010-2012年浙江省舟山市售贝类中创伤弧菌(Vibrio vulnificus,VV)的污染状况与季节性变化规律,及其毒力相关基因分型。方法采用3%氯化钠碱性蛋白胨水增菌,纤维二糖一多粘茵素E(cc)琼脂分离贝类海产品中的创伤弧菌,可疑菌落的鉴定采用API20E,采用最近似值法(most probable number,MPN)进行创伤弧菌的定量检测,应用PCR技术进行生物Ⅰ型、Ⅱ型和血清E型鉴定,及vcg、16S rRNA毒力基因分型。结果 179份样品检出64株创伤弧菌,检出阳性率为35.75%。不同季节检出率差异有统计学意义(χ2=35.23,P<0.05),夏季检出率最高为68%。39株VV菌株为溶血素A基因(hemolysin gene A,vvhA)核酸阳性,1株BT2型,1株血清E型,其余37株均为BT1型。vcgC/E和16S rRNA A/B毒力基因分型结果显示:CB型31株,CAB型4株,EA型3株,EAB型1株。结论舟山市售贝类中创伤弧菌的污染状况严重,尤其是夏秋季,毒力基因型呈多样性,以CB型为主。应对贝类的食品安全进行风险评估,预防食源性疾病的暴发。
- 吴漆波石亚素虞艳潘军航
- 关键词：贝类创伤弧菌基因分型
- 创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法的验证与应用
- ：建立与验证创伤弧菌脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gelelectrophoresis,PFGE)分子分型方法. 方法：以分子分型监测网络PulseNet中霍乱弧菌的PFGE标准方法为基础,选用限制性内...
- 潘军航陈建才张俊彦龚璞占利梅玲玲
- 关键词：创伤弧菌脉冲场凝胶电泳分子分型
- 环介导等温扩增联合横向流动试纸条可视化检测志贺氏菌被引量：7
- 2016年
- 【目的】将环介导等温扩增技术（LAMP）与横向流动试纸条（LFD）联合应用,建立一种可应用于志贺氏菌快速检测的LAMP-LFD技术。【方法】以福氏志贺氏菌的侵袭性质粒抗原H（ipa H）基因为检测靶标设计3对特异性引物（其中上游内引物Sfl-ipa H-FIP由生物素标记）,进行LAMP反应;同时设计1条异硫氰酸荧光素（FITC）标记的探针Sfl-ipa H-HP,与获得的LAMP产物进行特异性杂交,杂交产物经LFD完成检测。【结果】优化后的LAMP反应条件为63℃ 40 min,加上LFD结果判读共需50 min。LAMP-LFD方法能够特异性检测出福氏志贺氏菌,而对肠炎沙门氏菌等其它4种导致腹泻的致病菌和创伤弧菌等5种常见食物源性致病菌,以及4株不同大肠杆菌的检测结果呈阴性。该方法针对福氏志贺氏菌的检测灵敏度为1.0×10^2 CFU/m L或4 CFU/反应,针对人工污染鲤鱼肠组织的检测灵敏度是5.0×10^2 CFU/m L,是以LAMP外引物Sfl-ipa H-F3/Sfl-ipa H-B3的常规PCR方法的100倍。【结论】建立的LAMP-LFD技术具有操作简单、检测快速准确、检测成本低等优点,有望在志贺氏菌的常规监测和即时检测中被普及使用。
- 李尚阳周前进张严峻潘军航陈炯
- 关键词：志贺氏菌环介导等温扩增技术
- 香港海鸥型菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术研究
- 目的 利用TaqMan-MGB探针的实时荧光定量PCR方法,建立一种简便、快速,特异,灵敏的香港海鸥型菌检测方法.方法 根据香港海鸥型菌16S rDNA的保守区域设计特异性引物和探针.用不同浓度、不同温度对反应体系引物量...
- 梅玲玲张俊彦龚璞潘军航占利张云怡杨勇
- 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光PCR
- 食品中单增李斯特菌血清型及耐药性监测被引量：17
- 2008年
- 潘军航梅玲玲张严峻汪炜朱敏潘雪霞张俊彦
- 关键词：单增李斯特菌耐药性监测各类食品血清型散装熟肉制品病致病菌
