梅俊杰
- 作品数：10 被引量：13H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
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- 稀有密码子对大肠埃希菌表达外源蛋白的影响被引量：4
- 1999年
- 外源基因中的稀有密码子是影响大肠埃希菌(大肠杆菌)表达的重要因素。稀有密码子尤其是串联稀有密码子能降低甚至耗竭胞内同源tRNA,降低蛋白表达水平,并具有显著的位置效应。另外,稀有密码子可以引起外源mRNA翻译过程中的移码翻译、核糖体跳跃和氨基酸错配等异常事件。本文就稀有密码子影响大肠杆菌蛋白表达的机制研究作一系统综述。
- 梅俊杰
- 关键词：稀有密码子大肠杆菌外源基因
- 白细胞介素-5及其受体的分子生物学进展
- 1998年
- 由于IL-5受体拮抗剂对哮喘等慢性过敏性疾病具有潜在的应用前景,近年对IL-5及其受体的分子生物学进行了细致深入的研究。本文就IL-5及其受体的基因结构和分子特性、二者作用的分子机制及其信号转导方面的研究作一综述。
- 梅俊杰
- 关键词：白细胞介素5受体分子生物学
- 全文增补中
- 人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达
- 2000年
- 目的克隆并原核表达 α4亚基片段。方法从 IL- 6 0细胞系中提取总 RNA,以 RT- PCR方法分两段扩增人整合素分子 α4亚基片段 2 .0 kb c DNA,将两片段连接 ,并将其中的 1.7kb基因片段亚克隆至表达载体 PGEX- KG中 ,IPTG诱导表达。结果 RT- PCR扩增并克隆了α4的两段 c DNA,序列分析表明 :与文献报道的α4c DNA序列基本一致。两片段成功连接后 ,将其中的 1.7kb亚克隆至表达载体 PGEX- KG中 ,经诱导在大肠杆菌中得到高效表达。结论获得了α4亚基 2 .0 kbc DNA片段 ,及其中 1.
- 刘永全高杰英彭虹罗振革梅俊杰
- 关键词：整合素RT-PCRCDNA克隆
- 小鼠白细胞介素─5的cDNA克隆及鉴定
- 1996年
- 小鼠白细胞介素┐５的ｃＤＮＡ克隆及鉴定梅俊杰１高杰英１丁广治２孔祥英１白细胞介素－５是一种同源双体的多效性淋巴因子，对Ｂ细胞、Ｔ细胞和嗜酸性／嗜碱性粒细胞具有多种生物学功能，在体内能够提高粘膜部位ＩｇＡ的分泌，诱导嗜酸性粒细胞增多和体内细胞的抗肿瘤活...
- 梅俊杰高杰英丁广治孔祥英
- 关键词：白细胞介素2CDNA克隆
- 人整合素α4亚基cDNA片段的克隆表达和纯化
- 1997年
- 整合素(integrins)分子是一类由不同的α和β亚基组成的异二聚体。α4整合素有α4β1和α4β7两种,二者都是表达于细胞表面的粘附分子,其相应的最佳配体分别为VCAM-1(vascu-lar cell adhesion molecule-1)和MAdCAM-1(mucosal addressin cell adhesion molecule-1)。人α4亚基由999个氨基酸残基组成,其cDNA长3 kb,糖基化后分子量为150 ku,N端有7个重复序列。在分子的偏中位置有一个蛋白酶作用位点,该位点可将α4分为30和70
- 刘永全高杰英丁广治罗振革孔祥英彭虹梅俊杰
- 关键词：整合素克隆表达CDNA片段流行病研究粘附分子骨髓基质细胞
- hIL-5的E13Q突变体在大肠杆菌中的高效表达
- 1997年
- 白细胞介素5(IL-5)主要由Th2细胞产生,对B细胞、T细胞和嗜酸性粒细胞具有多种生物学作用。人IL 5(hIL-5)cDNA编码134个氨基酸,其成熟多肽由115个氨基酸组成。目前hIL 5 cDNA在大肠杆菌表达尚未见报道。
- 梅俊杰高杰英丁广治刘育红孔祥英
- 关键词：突变体肠杆菌白细胞介素5流行病研究TH2细胞
- 稀有密码子对hIL-5 cDNA在大肠杆菌中表达及细菌生长影响的研究
- 1997年
- 我们通过重组PCR技术将hIL-5 cDNA中部及3′端的稀有密码子改为大肠杆菌偏性密码子,包括编码88位Gly的GGA、91～93位3个Arg的AGACGGAGA和113～114位2个Ile的(ATA)。将测序后的hIL-5片段插入pBV220,转化大肠杆菌DH5α获得重组菌株pBVhIL5-H/DH5α。经热诱导在大肠杆菌获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的16.5％,达到国外全合成基因在大肠杆菌表达的高限水平。
- 梅俊杰高杰英丁广治彭虹刘育红孔祥英
- 关键词：稀有密码子大肠杆菌中表达细菌生长流行病研究CDNA
- 人整合素分子α4亚基片段的克隆和表达被引量：2
- 2001年
- 目的克隆并表达人整合素分子α４亚基１．２ｋｂｃＤ－ＮＡ片段。方法从 ＨＬ－６０细胞系中提取总 ＲＮＡ，以 ＲＴ－ ＰＣＲ法扩增人整合素分子 α４亚基片段 １． ２ ｋｂ ｃＤＮＡ（１７５３－ ２ ９３４ｂｐ），并将该片段亚克隆至表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ，用ＩＰＴＧ（诱导表达。结果克隆了 α４亚基 １．２ ｋｂ ｃＤＮＡ片段。序列分析表明，其所编码的氨基酸序列与文献相比较只有一处错义突变（Ａｒｇ→Ｇｌｎ），经分析该突变对抗原性影响不大。将该片段亚克隆至表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ，经ＩＰＴＧ诱导在大肠杆菌中获得高效表达。结论获得了α４亚基１．２ｋｂｃＤＮＡ片段及其原核表达产物，对研究α４整合素的功能具有重要的意义。
- 刘永全高杰英罗振革孔祥英梅俊杰彭虹
- 关键词：RT-PCRCDNA克隆
- 小鼠白细胞介素5融合蛋白在大肠杆菌的表达被引量：5
- 1997年
- 将质粒ｐＢＶ－ｍＩＬ－５的小鼠白细胞介素５（ｍＩＬ－５）的ｃＤＮＡ插入表达载体ｐＥＸ３１ｂ，转化大肠杆菌ＲＲＩ，经热诱导获得高效表达，表达的重组蛋白占菌体总蛋白的４０％。该融合蛋白由大肠杆菌ＭＳ２聚合酶的９９个氨基酸和ｍＩＬ－５的１１３个氨基酸组成，在菌体中以包涵体的形式存在，用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、尿素洗涤包涵体，初步纯化的重组蛋白纯度达９０％，已用于制备抗ｍＩＬ－５的单克隆抗体。Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ证实ｍＩＬ－５重组蛋白能与抗ｍＩＬ－５多克隆ＩｇＧ特异结合。
- 梅俊杰高杰英丁广治孔祥英彭虹彭虹
- 关键词：白细胞介素5蛋白纯化大肠杆菌
