梁家幸
- 作品数：190 被引量：512H指数：13
- 供职机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 一种快速区分PCV2和Mhp的二重PCR检测引物组及试剂盒
- 本发明公开一种快速区分PCV2和Mhp的二重PCR检测引物组及试剂盒，属于动物病学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1‑4所示的引物序列，还包括10×Multi HoeStart Buffer、Super P...
- 秦毅斌卢冰霞周英宁何颖赵武刘磊李斌段群棚张宁陈忠伟梁家幸苏乾莲蓝常力冯建远蒋冬福卢敬专郭旋
- 文献传递
- 一种鸽子养殖消毒处理装置
- 一种鸽子养殖消毒处理装置，可以及时对粪便进行清理消毒，无需人工操作消毒，从而在节约人力的同时给鸽子提供良好的生长环境，其包括：固定架、鸽笼、消毒清扫装置，鸽笼一侧设有饲喂槽，其下方设有一防护板，消毒清扫装置包括：与储液瓶...
- 何颖卢冰霞陈忠伟赵武梁家幸周英宁段群棚蒋冬福卢敬专杨思仪秦毅斌刘伟李斌许心婷全琛宇
- 文献传递
- 鹅副黏病毒广西分离株生物学特性的研究被引量：2
- 2004年
- 采用鸡胚接种和细胞培养的方法 ,从广西武鸣县某鹅场患病鹅脑、肝、脾中分离获得了 2株病毒 ;经RT PCR、HA和HI试验等研究 ,证实其为鹅副黏病毒。经测定 ,分离毒 2 3 7 F3株的ELD50 为 10 - 7.2 5/0 .1mL ,TCID50 为 10 - 6 /0 .1mL ,MDT为 38.8h ,ICPI为 2。将该分离毒 10倍稀释 ,接种鸡胚成纤维细胞 ,4 0h后出现细胞病变 ,证实该分离毒为强毒株。病毒能凝集鸡、番鸭、鸽、猪、山羊、兔、豚鼠、黄鳝及人O型红细胞。 5 6℃ 10min、6 0℃ 10min、pH 4溶液处理 1h均不能使该病毒灭活 ,而 5 0mL/L氯仿处理 10min、6 0℃水浴 30min能灭活该病毒。人工感染的 11日龄雏鸡全部发病和死亡 ;感染的 10日龄雏鹅 6 0 %发病 ,发病鹅全部死亡 ;感染的 30日龄肉鸽发病率达 83.3%(5 /6 ) ,死亡率 10 0 %。对
- 蒋玉雯黄安国白安斌陈西宁梁家幸梁保忠杜坚姚瑞英
- 关键词：副黏病毒分离株生物学特性
- 猪细小病毒自然弱毒N株的免疫原性研究
- 用PPV-N株接种PPV HI抗体阴性后备母猪,5天产生PPV HI抗体,7天产生保护性抗体（HI＞256）,14天达高峰.用该毒株对四月龄小猪、后备母猪和怀孕母猪进行免疫原性试验,结果攻毒后5、7、9天未检测到病毒血症...
- 杜坚白安斌梁保忠梁家幸赵武李斌黄安国郑儒标冯军姚瑞英陈西宁蒋玉雯
- 关键词：猪细小病毒免疫原性
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒CH/GX/2015/750A株的分离及全基因序列分析
- 猪流行性腹泻病毒是猪流行性腹泻的病原体,是危害世界养猪业的重要病原.获得可以在细胞培养中稳定有效生长和增殖的分离毒株,是研究其致病性、开展病毒学和血清学研究以及开发疫苗的基础.本研究应用Vero细胞从广西腹泻仔猪肠道内容...
- 秦毅斌卢冰霞何颖段群棚李斌陈忠伟梁家幸周英宁苏乾莲蒋冬福赵武
- 关键词：猪流行性腹泻病毒毒株分离全基因序列分析亲缘关系
- 猪乙型脑炎病毒广西分离株FC792的囊膜糖蛋白E基因克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2013年
- 为了研究开发快速、敏感、特异的猪乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)诊断试剂和免疫效果良好的猪JE基因工程疫苗,对2011年分离到的广西猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)FC792株的E基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果测序获得1500bp的完整FC792株E基因序列,经同源性比对及遗传进化树分析表明,FC792株为基因Ⅲ型JEV毒株,且属于弱毒株。应用在线软件SignalP 4.1对FC792株E蛋白进行信号肽的预测,结果预测到FC792株E蛋白不存在信号肽。应用在线软件NetNGlyc 1.0预测到FC792株E蛋白存在1个N-糖基化位点:154-NYSA,线软件NetPhos 2.0预测到其存在如下磷酸化位点:丝氨酸(Ser)有10个位点;苏氨酸(Thr)有6个位点;酪氨酸(Tyr)有5个位点。应用在线免疫信息学软件预测到FC792株E蛋白有16个B细胞抗原优势表位(分值(score)≥0.85),5个CTL抗原表位,10个Th抗原表位。应用在线软件GOR4预测FC792株E蛋白的二级结构,发现α-螺旋区域占21.20%,延伸链区域占30.40%;无规则卷曲区域占48.40%。应用在线软件SWISS-MODEL对FC792株E蛋白进行三维结构预测的同源模建,结果可见FC792株E蛋白存在大量的无规则卷曲和延伸链区域,并有多个α-螺旋区域,它们螺旋扭转卷曲形成近似左右对称的2个亚基的二聚体空间立体结构。研究结果为今后研制猪JE诊断抗原和猪JE基因工程疫苗提供参考借鉴。
- 李斌卢冰霞秦毅斌赵武梁家幸韦超文何颖苏乾莲陈忠伟闭炳芬段群棚李莹莹姜佳佳梁保忠黄伟坚
- 关键词：乙型脑炎病毒E基因克隆生物信息学
- 一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒
- 本发明公开一种快速区分PCV2、PCV3和Mhp的多重PCR检测引物组及试剂盒，属于动物病学和分子生物学技术领域。该试剂盒包括SEQ ID1‑6所示的引物序列，还包括10×Multi HoeStart Buffer、Su...
- 刘磊段群棚周英宁赵武李斌何颖秦毅斌卢冰霞陈忠伟张宁梁家幸苏乾莲蓝常力冯建远蒋冬福卢敬专郭旋
- 文献传递
- 猪丁型冠状病毒N基因原核表达及多克隆抗体制备被引量：3
- 2023年
- 旨在研究猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)N蛋白的抗原性,为下一步诊断试剂盒的研发提供依据。试验通过RT-PCR的方法扩增PDCoV CH/GX/1468B/2017株完整的N基因并构建原核表达质粒pET32a-N,将pET32a-N转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经诱导表达获得重组N蛋白,纯化后经Western blot方法检测其反应原性,免疫昆明小鼠制备重组N蛋白多克隆抗体并进行效价测定(间接ELISA法)和特异性验证(间接免疫荧光法)。结果显示:重组N蛋白在IPTG终浓度为1.0 mmol/L,37℃诱导表达6 h的条件下可获得最高表达量,该重组蛋白主要以可溶性蛋白的形式表达;Western blot结果显示,纯化后的重组N蛋白可以和PDCoV阳性猪血清发生特异性结合,具有良好的反应原性。制备的多克隆抗体的效价可达1∶64000,间接免疫荧光法结果表明其能特异性识别和结合PDCoV,说明重组N蛋白具有较好免疫原性。提示:PDCoV N蛋白抗原性好,可作为诊断试剂盒的候选抗原。
- 刘磊何颖何颖陈忠伟赵武段群棚梁家幸梁家幸周英宁许心婷陈婷婷许艺兰李斌李斌蒋冬福秦毅斌秦毅斌
- 关键词：N基因原核表达多克隆抗体抗原性分析
- 猪丁型冠状病毒重组N蛋白及其多克隆抗体的制备方法
- 本发明公开了一种猪丁型冠状病毒(PDCoV)重组N蛋白的制备方法，该法对PDCoV的N基因片段进行扩增后经过原核表达、纯化后获得重组N蛋白。据此，发明人还建立了重组N蛋白多克隆抗体的制备方法，即应用PDCoV重组N蛋白与...
- 秦毅斌刘磊卢冰霞李斌周英宁段群棚何颖赵武梁家幸蒋冬福卢敬专
- 文献传递
- 猪细小病毒主要非结构蛋白与结构蛋白的密码子偏爱性分析
- 通过分析猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)主要非结构蛋白(non-structural protein,NSI)及结构蛋白(VP1、VP2)的密码子偏爱性,为三种蛋白基因表达中宿主系统的选择提供参...
- 赵武李斌梁家幸梁保忠姚瑞英黄安国何颖蒋玉雯
- 关键词：猪细小病毒非结构蛋白密码子偏爱性
- 文献传递
