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猪流行性腹泻病毒N基因的原核表达与鉴定被引量：1: 2013年; 为了克隆和表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因,根据GenBank中登录的PEDV(CV777株)的N基因序列设计1对特异引物,提取阳性临床样品的总RNA,通过RT-PCR方法获得PEDV的N基因。将N基因定向克隆至表达载体pET-28a-His-Sumo中,酶切和测序鉴定表明获得了阳性重组表达质粒pET-28a-His-Sumo-N。将阳性质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,并进行IPTG诱导表达,用SDSPAGE和Western-blot对表达的目的蛋白进行分析。SDS-PAGE检测结果表明获得了60.0ku的表达产物,与目的蛋白大小符合;Western-blot结果显示,纯化后的目的蛋白能与PEDV阳性血清发生特异反应。表明成功对PEDV-N蛋白进行了原核表达,且纯化后的蛋白质具有良好的反应原性。; 刘华南曹伟军杨帆张艳杨华王松豪郑海学; 关键词：猪流行性腹泻病毒 N基因原核表达纯化

Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 2015年; 为了获得Asia1型口蹄疫病毒非结构蛋白3B的单克隆抗体,以含Asia1型FMDV/JS/05毒株3B基因的pCAGGS-3B质粒为模板,扩增3B蛋白基因,并克隆至pET-30a（＋）载体,进行原核表达及纯化。分别以Asia1型口蹄疫病毒、纯化的3B蛋白为抗原,免疫4~6周龄的雌性BALB/c小鼠,经过4次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按5∶1~10∶1进行细胞融合,用本实验室建立的间接ELISA对融合后的细胞进行筛选,并进行4次有限稀释筛选出的阳性细胞扩大培养后,注射小鼠腹腔,制备腹水。对制备的腹水进行类别鉴定、反应原性和效价鉴定。结果表明,获得1株能稳定分泌抗Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白的细胞株,其抗体类别为IgM,腹水效价为1∶12 800,通过Western-blot和间接免疫荧光试验,确定其能识别口蹄疫病毒3B蛋白。; 刘华南杨帆杨华吕律曹伟军石正旺岳城郑海学才学鹏; 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

抗口蹄疫病毒3D蛋白单克隆抗体的制备及抗原新位点的鉴定: 为了鉴定口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）3D蛋白的抗原位点，本研究通过制备抗口蹄疫病毒单克隆抗体，利用FMDV和3D蛋白进行筛选，获得了1株能够持续稳定分泌抗3D蛋白单克隆...; 杨华; 关键词：口蹄疫病毒原核表达单克隆抗体抗原位点; 文献传递

抗口蹄疫病毒非结构蛋白3D单克隆抗体的制备和鉴定: 2013年; 以重组A型口蹄疫病毒(FMDV)为抗原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA、有限稀释法及Western-blotting等试验进行筛选及鉴定。结果显示,获得了1株能够持续稳定分泌抗FMDV 3D蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为5G2);经鉴定染色体数介于102～106条之间,与预期结果相符;单克隆抗体的稳定性检测表明其细胞培养上清抗体效价为1∶1 280,腹水抗体效价为1∶25 600,说明该株单克隆抗体的性质比较稳定;单克隆抗体特异性试验结果显示,获得的腹水单抗与3D蛋白、重组A型FMDV、A型FMDV、Asia1型FMDV及O型FMDV均可发生特异性反应,而与猪水疱病病毒及水疱性口炎病毒不发生反应。该非结构蛋白3D单克隆抗体的成功制备为进一步利用该单抗开发诊断试剂和研究病毒基因功能提供了技术手段。; 杨华杨帆闫银银曹伟军吕律张荣刘华南杨波杨孝朴郑海学; 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体

一种农产品烘干尾气处理装置: 本实用新型公开了一种农产品烘干尾气处理装置，包括烘干设备主体、抽风机和过滤装置，所述烘干设备主体的顶部开设有检修口，所述检修口通过烘干设备主体顶部卡装有检修端盖，所述抽风机固定安装在检修端盖上，抽风机的输入端通过抽取管穿...; 杨华富豪靳文武盛恒民赵景栋张炜马军民; 文献传递

一种农产品加工用浸烫装置: 本实用新型公开了一种农产品加工用浸烫装置，包括底座和浸烫槽，所述底座上设置有浸烫槽，所述浸烫槽内设置有浸烫箱，所述浸烫箱内安装有转动推料板，所述转动推料板上固定有转轴，所述转轴的一端固定有皮带轮，所述皮带轮与主动轮通过皮...; 富豪杨华靳文武盛恒民赵景栋马军民张炜; 文献传递

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杨华