杨剑峰
- 作品数：2 被引量：16H指数：1
- 供职机构：复旦大学医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人卵巢癌相关候选基因HE4(WFDC2)的转录调控主要由Sp1与位于-71和-48的Egr-1位点结合所介导被引量：16
- 2004年
- 目的 阐明HE4基因转录调控机制的细节。方法 1.用半定量RT PCR的方法评估HE4基因在肿瘤细胞株中的表达情况 ;2 .以荧光素酶报告基因载体为基础 ,对HE4基因的上游顺序构建了 3′、5′缺失突变和一系列连接体扫描突变 ;3.通过瞬时转染 /体外双荧光素酶报告系统对这些重组质粒中插入片段进行启动子活性的分析 ;4 .针对蛋白和关键顺式区域的结合的特异性和能力 ,开展泳动滞后和抗体介导的超迁移分析。结果 通过对 ( 186 0 /+ 2 9)的HE4基因上游片段及其剪切体的分析 ,将HE4基因最小启动子确定为 10 7/+ 15的DNA片段。通过对连接体扫描突变体的分析 ,将关键的顺式作用元件确定在W4 5 ( 71/ 4 8)片段 ,生物信息学提示该区存在两个Egr 1位点。通过用已知的反式作用因子与报告基因质粒分别进行共转染 ,提示Sp1是最为有效的反式作用因子 ,而不是Egr 1。通过泳动滞后和抗体介导的超迁移实验 ,证实Sp1确实是参与作用的转录因子。结论 HE4基因的转录活性主要是由转录因子Sp1与位于 ( 71/ 4 8)区域的两个Egr 1位点结合所介导的。
- 赵莹珺杨剑峰朱景德
- 关键词：转录调控顺式作用元件转录因子SP1卵巢癌
- 人卵巢癌候选相关基因HE4（WFDC2）转录调控机制的研究
- HE4(human epididymis gene product 4,又名WFDC2,WAP four-disulfide core protein2)基因在卵巢癌组织中高表达,但是在正常组织包括卵巢组织中不表达或低表...
- 杨剑峰
- 关键词：转录调控瞬时转染荧光素酶报告基因SP1
- 文献传递
