杜小刚
- 作品数：32 被引量：132H指数：7
- 供职机构：四川农业大学生命科学与理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅重点项目四川省国际科技合作与交流研究计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 小分子金枪鱼多肽对小鼠记忆力、皮肤弹性及睡眠的影响被引量：3
- 2019年
- 探究不同剂量的小分子金枪鱼多肽对小鼠记忆力、皮肤弹性和睡眠质量的影响。将6周龄的昆明小鼠随机分成4组(n=12),剂量组分别灌胃0.25 g/kg bw、0.5 g/kg bw和1.0 g/kg bw的小分子金枪鱼多肽,对照组灌胃PBS,连续6周。采用分光光度法分别测定小鼠脑组织SOD、GSH-Px和MDA含量,采用HE染色法制作小鼠皮肤石蜡切片,采用实时荧光定量PCR检测与记忆力、皮肤弹性和睡眠相关的基因表达。研究结果显示,小分子金枪鱼多肽能通过增加小鼠脑组织SOD和GSH-Px的含量,降低MDA的含量,上调记忆力相关基因的表达量来增强小鼠的记忆力;通过改善小鼠皮肤胶原纤维形态数目,改变皮肤弹性相关基因表达量来增加小鼠皮肤弹性;通过改变睡眠相关基因表达量来改善小鼠睡眠质量,且主要作用于GABAA通路和Hypocretin通路来发挥促眠作用。
- 陈悦李路李云坤李冬冯群力冯志江李云杜小刚
- 关键词：金枪鱼小分子多肽记忆力皮肤弹性睡眠质量
- 共刺激分子4-1BBL基因免疫对HBsAg核酸疫苗诱导小鼠特异性免疫应答的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究共刺激分子4-1BBL基因免疫对HBsAg核酸疫苗诱导小鼠特异性体液和细胞免疫应答的影响。方法将HBV表面抗原核酸疫苗pcDS2单独或联合共刺激分子4-1BBL质粒肌肉注射免疫C57BL/6小鼠;ELISA法检测小鼠血清抗-HBsIgG及亚型IgG1和IgG2a;迟发型超敏反应(DTH)反应检测体内细胞反应;流式细胞仪检测CD4+T淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ及CD8+T淋巴细胞分泌IFN-γ水平;流式细胞仪检测小鼠脾细胞HBsAg特异性体外细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用(CTL)。结果与单纯免疫核酸疫苗pcDS2组比较,pcDS2和4-1BBL联合免疫组小鼠的抗-HBs水平显著提高,抗-HBsIgG亚类以IgG2a占优;免疫小鼠经HBsAg脚掌皮下刺激后,联合免疫组小鼠脚掌的厚度显著高于pcDS2组;联合免疫组CD4+T淋巴细胞的IL-4和IFN-γ表达水平及CD8+T淋巴细胞的IFN-γ表达水平显著升高;DNA疫苗免疫的各组小鼠,HBsAg特异性体外CTL杀伤作用高于对照组,其中联合免疫组小鼠的体外CTL杀伤作用最强。结论共刺激分子4-1BBL不仅能增强HBV DNA疫苗诱导特异性体液免疫应答,还能增强特异性型细胞免疫反应,尤其增强体内CTL的杀伤活性。
- 杜小刚康有敏王军朋王肖赵干王宾
- 关键词：共刺激分子4-1BBL表面抗原
- GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究被引量：2
- 2016年
- 旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。
- 曹晓涵韩兴发杜小刚陈志渝孟风艳储明星曾宪垠
- 关键词：GNRH主动免疫雌性大鼠
- 一种鱼类实验用重复装置
- 本实用新型公开了一种鱼类实验用重复装置，包括沉淀区，沉淀区上方依次设置有准备区和实验区，沉淀区中部设置有过滤装置，沉淀区右侧设置有变频水泵，变频水泵通过水管一与准备区连接，准备区右侧设置有待用区，待用区与准备区之间设置筛...
- 刘钊苗懿赵仲孟徐垚峰瞿炼石刘博黄小丽杨世勇朱凌威杜小刚武佳韵
- 文献传递
- GnRH主动免疫对雄性藏绵羊血液中甲状腺激素含量的影响被引量：5
- 2017年
- 为探讨GnRH并列体二聚物(GnRH-TDK)对雄性藏绵羊甲状腺功能的影响,采用GnRH-TDK主动免疫雄性藏绵羊,并将雄性藏绵羊随机分为免疫去势、手术去势及对照3个组,其中免疫去势组于25周龄时初免,8周后加免;手术去势组在试验开始前1周进行外科手术去势;对照组不做任何处理。以初免当天为0周,每4周采集血样1次,加免后8周屠宰所有试验羊并分离两侧睾丸,应用酶联免疫法(ELISA)测定血清抗体滴度及LH、FSH、T、TSH、T3和T4含量变化。结果表明,免疫去势组绵羊产生了良好的抗体反应,初免及加免后体内抗GnRH抗体滴度均快速升高,且血清T含量显著下降(P<0.05),至屠宰时仍维持在较低水平(4.27 ng·m L^(-1)),同时睾丸严重萎缩。与对照组相比,免疫去势组血清TSH、T3及T4未显著下降。由此可见,GnRH主动免疫对血清中TSH、T3及T4浓度无明显影响,即GnRH主动免疫对雄性藏绵羊甲状腺功能无影响。本研究结果为GnRH主动免疫去势的分子机制以及对机体的影响奠定了理论基础。
- 周玉芹宋天增韩兴发谭遥刘亚成曹晓涵杜小刚孟风艳储明星曾宪垠
- 关键词：主动免疫GNRH甲状腺激素
- 一种用于DNA和RNA的取样离心管
- 本实用新型公开了一种用于DNA和RNA的取样离心管，属于实验取样离心设备技术领域。其包括：管身、与管身连接的管盖以及设置在管身内的离心管，管身的管口内侧设置有固定台，固定台为中空状，在固定台内放置有离心管，且固定台的内径...
- 杨世勇瞿炼石刘博刘钊苗懿赵仲孟黄小丽杜小刚武佳韵
- 文献传递
- 滇重楼茎叶总皂苷抗肝癌HepG2细胞活性被引量：9
- 2016年
- 探究滇重楼茎叶总皂苷对肝癌HepG2细胞增殖的抑制、细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡作用。从滇重楼地上茎叶提取总皂苷,配制成浓度为10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L、80μg/m L和160μg/m L的总皂苷提取物处理HepG2细胞。总皂苷提取物对细胞增殖的抑制作用采用MTT法检测;对细胞周期阻滞作用采用流式细胞术检测;诱导细胞凋亡的作用采用细胞核荧光染色、流式细胞术和caspase-3活性试剂盒检测。结果表明,滇重楼茎叶总皂苷提取物能显著抑制细胞增殖,且具有时间、剂量依赖效应,能阻滞细胞周期于S期,并能诱导细胞凋亡。但其诱导凋亡作用仅高剂量组(≥80μg/m L)效果显著,低剂量组(<80μg/m L)不显著。
- 许新恒康梦瑶匡坤燕杜琳颖韦蒙李云坤淦永鉴曾宪垠曹晓涵孟风艳杜小刚
- 关键词：滇重楼细胞周期细胞凋亡CASPASE-3
- 土贝母皂苷甲逆转A549/DDP细胞系耐药性的分子效应被引量：1
- 2020年
- 为了探究土贝母皂苷甲(TBMSⅠ)对A549/DDP细胞系耐药性及其对凋亡相关基因表达的影响,本研究使用了CCK-8法检测顺铂和土贝母皂苷甲单独处理A549/DDP细胞的IC50,并计算土贝母皂苷甲作用于A549/DDP细胞的无毒浓度。结果显示,土贝母皂苷甲无毒浓度与顺铂联用后得耐药逆转倍数约为2倍;流式细胞术结果表明,细胞凋亡集中于晚期凋亡,且随着联用药物浓度提高,晚期凋亡细胞数量增多;q-PCR结果表明,药物联用组的凋亡相关基因Bax、Bcl-2、p53和Caspase-3的mRNA相对表达量均高于药物单独作用组。土贝母皂苷甲对A549/DDP细胞系具有逆转其耐药性的作用,其机制可能与p53及其相关通路的凋亡基因有关。本研究为临床抗癌药物的联合使用提供了更多理论和试验依据。
- 王欣悦朱雪婷刘天赋李娟李云坤吴家宇李冬刘启军唐仁勇杜小刚
- 关键词：耐药性
- 汉源花椒总黄酮提取物的抗氧化及抗Hela肿瘤细胞增殖活性研究被引量：8
- 2020年
- 本研究采用超声波辅助溶剂提取、大孔树脂纯化法制备了汉源花椒总黄酮提取物,研究其抗氧化活性及对人宫颈癌Hela细胞的抗增殖活性。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法、水杨酸法、磷钼络合物法和三价铁还原法研究提取物的体外抗氧化活性,采用CCK8法、PI染色法和EGFP-Annexin V/PI染色法研究提取物对Hela细胞的抗增殖活性影响。结果表明:总黄酮提取得率为2.19%;当提取物质量浓度为125、500μg/mL时,对DPPH自由基和羟自由基(·OH)的清除率分别为84.70%和83.61%,IC50值分别为65.61、194.40μg/mL;当提取物质量浓度为400和300μg/mL时还原力与总抗氧化能力最强,吸光度分别为0.70和0.48。在细胞实验中,用800μg/mL的提取物处理12、24、48 h后的Hela细胞生存率分别为27.15%、10.43%和30.63%,与相同处理时间的对照组相比,生存率极显著下降(P<0.001),这可能与该浓度提取物处理24 h的细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡率升高有关。因此,汉源花椒总黄酮提取物具有一定抗氧化和对Hela细胞的抗增殖活性,该研究结果可为进一步开发利用花椒资源提供理论支持。
- 徐一鸣郭秀兰李秋霞李俊锋唐仁勇邹强杜小刚
- 关键词：总黄酮抗氧化HELA细胞抗增殖
- 重组质粒与重组蛋白共免疫诱导HBsAg特异性T细胞免疫抑制被引量：1
- 2009年
- 【目的】为了探索治疗急性乙型肝炎和爆发性乙型肝的新策略,本研究将HBV DNA疫苗和相应抗原的蛋白质分子联合免疫小鼠,旨在探讨联合免疫对小鼠抗原特异性T细胞增殖反应的影响。【方法】我们将HBV DNA疫苗(pcDS2)和相应抗原蛋白质分子(HBsAg)联合免疫BALB/c小鼠;分别在第0、2和4周进行免疫,在第6周用ELISA方法检测抗-HBs IgG效价,MTT和流式细胞仪检测T细胞增殖反应及流式细胞仪检测细胞因子表达水平。【结果】pcDS2和HBsAg联合免疫组小鼠的抗-HBs水平显著提高;免疫小鼠的T细胞体外经HBsAg刺激后,联合免疫组刺激指数(SI)明显降低;经流式细胞仪检测进一步证实联合免疫组T细胞增殖反应被显著抑制;联合免疫组T细胞表达IL-10和Foxp3水平显著升高。【结论】pcDS2和HBsAg联合免疫能诱导产生特异性体液免疫应答,但不能诱导产生抗原特异性T细胞增殖反应;T细胞增殖反应被显著抑制可能与T细胞表达IL-10和Foxp3上调有关;本研究为急性乙型肝炎和爆发性乙型肝炎治疗及HBV疫苗的研究奠定了基础。
- 杜小刚王军朋康有敏王肖赵干王宾
- 关键词：免疫抑制T细胞增殖表面抗原DNA疫苗
