李继东
- 作品数：60 被引量：109H指数：5
- 供职机构：宁夏大学更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 超高效液相色谱-串联质谱法测定鹅可食用组织中维吉尼亚霉素M_(1)的残留量被引量：1
- 2021年
- 本研究建立了超高效液相-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测鹅肌肉、肝脏、肾脏、皮脂组织中维吉尼亚霉素M_(1)的残留检测方法。组织样品使用乙腈提取、正己烷脱脂,经过滤后直接运用超高效液相色谱-串联质谱检测,外标法定量,采用电喷雾离子源(ESI^(+)),选择多反应监测(MRM)模式进行分析。结果表明:鹅各组织的定量限分别为肌肉10.0μg/kg、肝脏50.0μg/kg、肾脏50.0μg/kg、皮脂50.0μg/kg,平均回收率分别为肌肉93.09%~98.62%、肝脏98.41%~103.8%、肾脏101.5%~113.3%、皮脂100.9%~114.3%。批内、批间的RSDs均符合相关要求。该方法简化了样品前处理过程,具有较好的灵敏度、准确性,可用于检测鹅可食用组织中维吉尼亚霉素M1的残留量。
- 高蕊王霄旸李继东薛飞群张可煜王春梅周文
- 关键词：超高效液相色谱-串联质谱法
- 山羊痘病毒G9和A16基因的克隆及生物信息学分析被引量：2
- 2020年
- 为研究山羊痘病毒(goatpox virus,GTPV)G9、A16蛋白的功能,用PCR方法从山羊痘病毒弱毒疫苗毒株GTPV AV41中扩增出编码G9、A16蛋白的基因进行测序,通过生物信息学方法对目的基因序列进行分析。结果显示:G9蛋白有34个磷酸化位点,17个抗原表位位点;二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占36.61%和42.86%,有9个保守结构域,蛋白序列末尾有跨膜区域,包含15个半胱氨酸残基位点;三级结构中具有细胞凋亡和跨膜功能的结构。A16蛋白有36个磷酸化位点,19个抗原表位位点;二级结构中α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占25.46%和48.28%,有10个保守结构域,蛋白序列末尾有跨膜区域,包含21个半胱氨酸残基位点;三级结构预测结果显示可以形成膜蛋白。上述研究结果为进一步探究GTPV的G9、A16蛋白功能提供了参考。
- 赵宏吉张金花司朵朵张珠明李继东
- 关键词：山羊痘病毒生物信息学分析
- 4株滑液囊支原体分离株的分子鉴定及vlhA基因的序列分析被引量：8
- 2020年
- 为了从分子水平对4株滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)分离株进行鉴定,同时分析其膜蛋白vlhA的基因序列以及蛋白的功能结构域。通过PCR扩增其16S rRNA和vlhA基因序列,以16S rRNA序列构建分子进化树并分析4株MS分离株和其他支原体参考株的同源性;利用生物信息学工具对vlhA基因的核酸序列和蛋白序列进行分析,查找其保守结构域,预测其可能具有的功能。结果表明,4株MS分离株在16S rRNA基因序列上与MS不同菌株具有同源性,可以确定为滑液囊支原体;其vlhA基因序列分为保守区和高变区,保守区和部分高变区组成主要膜抗原基因MSPB;vlhA蛋白共含有10个保守的结构域,7个保守域位于保守区,8个保守域位于MSPB区,其中的75 Asp^425 Asn之间的氨基酸残基预测与细胞黏附有关;75 Asp^126 Val与129 Val^206 Val之间的氨基酸残基为免疫球蛋白超家族结构,与受体/配体功能相关,可能都参与MS感染宿主的过程。
- 司朵朵郭亚男郭磊何生虎李继东
- 关键词：滑液囊支原体系统进化树
- 产气荚膜梭菌主要毒素生物学活性研究进展被引量：2
- 2023年
- 梳理和总结了产气荚膜梭菌的主要毒素种类、生物学活性、致病机制等,为后续的毒素分型、快速检测方法建立以及相关致病机制研究提供参考。
- 王建东王景松王健霖李继东郭亚男
- 关键词：产气荚膜梭菌毒素生物学活性
- 牛支原体病流行病学及其诊断技术研究进展被引量：9
- 2021年
- 牛支原体是一种能引起牛发生肺炎、乳房炎和关节炎等疾病的高度传染性病原体,在全球范围内分布和流行,具有高变异性,能在不同的地理环境独立进化,在地理起源方面表现出高度的多样性。牛支原体在遗传变异、致病力、传播扩散等方面都存在极大的不确定性。本文就牛支原体病的病原学、流行病学、传播途径和诊断方法等方面的研究进展进行综述,以期为牛支原体病的防控以及相关研究提供参考。
- 王天宇李继东张志诚郭亚男
- 关键词：牛支原体流行病学
- 核输出蛋白抑制剂的抗病毒作用研究进展
- 2022年
- 核输出蛋白(CRM1)是一种相对分子质量为120 kDa的蛋白质,参与大分子蛋白的核输出过程。本文从CRM1的结构及功能出发介绍了该蛋白在货物蛋白或核酸的核输出过程中的作用,以及在多种病毒感染宿主、病毒复制与成熟过程中扮演重要的角色。同时,还介绍了核输出蛋白抑制剂对CRM1功能的抑制作用中所展现出的抗病毒复制与组装、阻止病毒成熟、降低病毒对宿主的感染的作用与机制。提出了CRM1具有作为抗病毒复制的细胞靶标开发潜力,为新型抗病毒药物的开发提供了参考价值。
- 姜彦飞周文王霄旸王春梅李继东张可煜
- 关键词：抗病毒抑制剂
- 产气荚膜梭菌检测方法研究进展被引量：1
- 2023年
- 产气荚膜梭菌是革兰氏阳性厌氧菌,广泛存在于环境中,包括污染的水、食物和土壤中,当机体胃肠道菌群紊乱或受到气温骤降等应激反应时,产气荚膜梭菌可大量繁殖并产生毒素,引起人和动物气性坏疽、食物中毒、肠炎、肠毒血症等多种疾病,严重危害人和动物的健康,不仅给养殖户造成严重的经济损失,影响畜牧业的发展,而且对公共卫生安全造成威胁。产气荚膜梭菌分型比较复杂,特异性诊断是防治该病的重要环节,因此需要快捷、高效和准确的鉴定和分型。目前,关于产气荚膜梭菌的主要检测方法有微生物学检测法、免疫学检测法以及分子生物学检测法。本文主要对产气荚膜梭菌的检测法进行总结,为产气荚膜梭菌检测方法的研究方向提供科学依据。
- 王建东王景松王健霖李继东郭亚男
- 关键词：产气荚膜梭菌毒素
- 鸡毒支原体和滑液囊支原体双重基础RPA检测方法的建立
- 2024年
- 鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)是对家禽危害最大的两种支原体,本研究拟建立基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的MG、MS双重检测方法。以MG的mgc2基因、MS的vlhA基因为检测靶标设计数对引物,通过筛选得到最佳引物,优化反应时间和反应温度以确定最佳反应条件,通过优化MG、MS最佳引物配比确定双重基础RPA的反应体系,并进行灵敏度、特异性、重复性试验,用所建方法对120份临床样品进行检测。结果显示,建立的MG、MS双重基础RPA检测方法在37℃下反应20 min即可完成扩增,其最佳引物配比为0.6∶1.4。以重组质粒为模板时,MG、MS的最低检出限分别为3.75 copies/μL、3.46copies/μL;以基因组DNA为模板时,MG、MS的最低检出限分别为1.23×10^(-3)ng/μL、5.68×10^(-3)ng/μL。该方法具有良好的特异性和稳定性。分别用该方法与OIE推荐的单重PCR方法检测120份临床样品,结果表明,该方法的检出率高于OIE的PCR方法,与OIE的PCR方法一致性较强。上述结果表明,建立的MG、MS双重基础RPA检测方法具有操作简单、反应快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点,可实现临床MG、MS感染的鉴别诊断。
- 田兴苗王健霖戴莎莎郭磊司朵朵龚振兴李继东
- 关键词：鸡毒支原体滑液囊支原体
- 串联型黄色荧光蛋白表达载体的构建及其在柔嫩艾美球虫中的瞬时表达被引量：1
- 2010年
- 为了探索黄色荧光蛋白(YFP)在柔嫩艾美球虫子孢子中的瞬时表达情况,以柔嫩艾美球虫的组蛋白4(Histone4,H4)上游启动序列和肌动蛋白(Actin)下游调控序列为元件构建了串联型YFP重组转染载体pH4-YFP-YFP-ACT。将构建的载体经电穿孔法转染柔嫩艾美球虫子孢子,并在MDBK细胞中进行培养。结果显示,在荧光显微镜下可以观察到黄色荧光。提示,串联型YFP可以在柔嫩艾美球虫中瞬时表达。
- 李继东郝力力刘贤勇周晓艳索勋
- 关键词：柔嫩艾美球虫黄色荧光蛋白瞬时转染
- 猪繁殖与呼吸综合征诊断方法与防治技术研究进展被引量：12
- 2004年
- 猪繁殖与呼吸综合征是一种新发现的威胁世界养猪业的传染病 .本文介绍了该病的诊断方法及防治措施等方面的研究进展 ,为该病的诊断与防治提供了有益的指导 .
- 李继东许立华王玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征
