李毅
- 作品数：30 被引量：200H指数：9
- 供职机构：浙江中医药大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省中医药管理局科研基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组的研究被引量：12
- 2011年
- 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究不同中医证型乳腺增生组织蛋白质组。方法:提取不同证型乳腺增生组织总蛋白,分别用Cy3或Cy5标记,每对Cy3和Cy5标记样品都与1个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱经DeCyder 6.5软件进行分析,筛选表达量有显著差异的蛋白质进行质谱鉴定。结果:12个蛋白质在不同乳腺增生组织中有显著差异。其中,α-B crystallin,Cyclophilin A,Cypa在冲任失调型中表达量最高,肝郁气滞型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。转甲状腺素蛋白变体,Pkci底物类似物、血红蛋白、脱氧血红蛋白和血红蛋白α链在肝郁气滞型中表达量最高,冲任失调型次之,在痰瘀互结型中表达量最低。而Cu,Zn-超氧(化)物歧化酶和转甲状腺素蛋白在肝郁气滞型、痰瘀互结型和冲任失调3型乳腺增生组织中表达依次降低。结论:这12个蛋白质可能与乳腺增生病不同证型相关,可以作为乳腺增生病临床中医辨证论治的候选客观指标。
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- 关键词：乳腺增生蛋白质组证型
- 白藜芦醇对HeLa细胞蛋白质组影响的研究被引量：4
- 2013年
- [目的]应用双向电泳及质谱技术研究白藜芦醇(Resveratrol,Res)对宫颈癌HeLa细胞蛋白质组的影响。[方法]经磺基罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)法筛选对宫颈癌HeLa细胞有效的白藜芦醇浓度,流式细胞仪检测有效白藜芦醇浓度对HeLa细胞周期和凋亡的影响。HeLa细胞经白藜芦醇处理后,提取细胞总蛋白,应用双向电泳技术建立蛋白质组图谱,筛选白藜芦醇处理前后差异在2倍以上的蛋白质作为差异蛋白,进行质谱鉴定和生物信息学分析。[结果]50μmol/L以上浓度白藜芦醇24小时对HeLa细胞的活性产生影响,将细胞阻滞在S期,诱导HeLa细胞的早期凋亡,并呈剂量依赖性。通过差异蛋白质组分析筛选出12个差异蛋白质,包括原肌球蛋白、细胞核糖核蛋白C、锌指蛋白、钙连接蛋白、微管蛋白β、热休克蛋白70、α烯醇化酶、丙酮酸激酶、雌激素受体β、氨基甲酰磷酸合成酶,HeLa细胞经白藜芦醇处理后这些蛋白表达量均增加。[结论]白藜芦醇可能通过参与调节细胞的转移分化、凋亡、能量代谢等过程而起到抗肿瘤作用。
- 李毅卢德赵金丽丽岳静许健
- 关键词：白藜芦醇HELA细胞蛋白质组流式细胞仪
- 温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响
- 目的:中医的肾在五脏中居主要地位,被喻为先天之本,生命之源,人体各脏器的调节中心。肾阳虚证是指由于肾阳虚衰,温煦失职,气化失权所表现的一类虚寒证候。许多学者认为肾阳虚与神经-内分泌紊乱有关,肾阳虚病人垂体-肾上腺皮质功能...
- 沃兴德卢德赵李毅唐利华沃立科施孟如杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 文献传递
- 姜黄素的微生物转化产物体外抗低密度脂蛋白氧化作用
- 2009年
- 目的利用红曲霉菌对姜黄素进行微生物转化，研究姜黄素微生物转化总产物对低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用，为进一步筛选新型高效的姜黄素类抗动脉硬化新药奠定基础。方法利用红曲霉菌固体发酵法对姜黄素进行微生物转化，设立只加姜黄素不接种菌体的底物对照和只接种菌体不加入姜黄素的菌体对照，乙酸乙酯提取转化产物。从血浆中分离低密度脂蛋白，建立低密度脂蛋白在Cu^2＋诱导下的无细胞氧化体系和巨噬细胞氧化体系，姜黄素转化产物进行氧化干预，以低密度脂蛋白在琼脂糖凝胶电泳的迁移距离及硫代巴比妥酸反应物含量作为低密度脂蛋白氧化的指标。结果姜黄素转化总产物在4—500mg／L浓度范围内（相当于含姜黄素0．04—5mg／L），能显著抑制Cu^2＋诱导下的低密度脂蛋白氧化，与菌体对照组相比差异有显著性（P〈0．001）；与底物对照比较在20mg／L和4mg／L浓度作用下差异有显著性（P〈0．001）。转化总产物作用小鼠巨噬细胞24h能显著抑制低密度脂蛋白的氧化，其迁移距离比氧化对照组明显缩短（P〈0．001）；姜黄素对照组在5mg／L时有明显的抑制作用；底物对照组和菌体对照组迁移距离与氧化对照组差异无显著性（P〉0．05），基本无抑制作用。转化总产物在4～500mg／L浓度范围内，能显著抑制小鼠巨噬细胞TBARS的产生，其抑制作用随着剂量的增大而增强。而底物对照组只在浓度为500mg／L和100mg／L（相当于含姜黄素5mg／L和1mg／L）、姜黄素对照组在浓度为5mg／L和1mg／L时有一定的抑制，菌体对照组则无抑制作用。转化总产物对巨噬细胞氧化体系低密度脂蛋白氧化的抑制作用。与底物对照组、菌体对照组相比差异有显著性（P〈0．001）。结论姜黄素经红曲霉菌转化后，对低密度脂蛋白的抗氧化作用显著增强，有望获得�
- 程东庆蔡琴李毅周芳美沃兴德
- 关键词：姜黄素微生物转化低密度脂蛋白氧化CU^2+巨噬细胞
- 温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：29
- 2007年
- 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出16个差异蛋白质。经质谱测定及数据库比对,其中10个蛋白质得到鉴定。结果:肾阳虚时氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、异戊酰辅酶A脱氢酶、热休克蛋白60、琥珀酰CoA合成酶、羟氨基辅酶A脱氢酶/酮脂酰辅酶乙酰辅酶A脱氢酶α亚基、鸟氨酸转氨甲酰酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达量均增加,而鸟氨酸氨基转移酶表达量降低。应用温补肾阳药治疗后,上述蛋白质的表达量均有不同程度的纠正。结论:喂饲温补肾阳药的肾阳虚模型大鼠糖、脂类和蛋白质代谢均得以改善,可能与温补肾阳药维护线粒体膜稳定性有关。
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- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 丹参酮ⅡA对RAW264.7细胞蛋白质组的影响
- 李晓娟沃兴德卢德赵李毅唐利华杨贞
- 薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响被引量：33
- 2012年
- 目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。
- 许健沈雯孙金权吴晓莉牟一平李毅
- 关键词：薏苡仁油
- 中药对中医不同证型动物血和肝线粒体蛋白质组影响的研究
- 卢德赵唐利华李毅杨贞柴惠沃兴德沃立科
- 祖国医学是一个伟大的宝库，在数千年中华民族繁衍和保健中起到了重要作用。祖国医学的精华在于视人体为一个整体，由此建立了阴阳五行、辩证施治的学术思想。为了能推进中医基本理论的研究，证明中医不同证型的物质基础和中药作用的分子机...
- 关键词：
- 关键词：中医基本理论蛋白质组学中药治疗
- 不同年龄组女性外周血单核细胞蛋白质组的比较分析被引量：1
- 2008年
- 目的研究衰老在免疫细胞中的发生机制。方法分离来源于3个家族三代女性(外婆,妈妈,女儿)外周血单核细胞,提取细胞内全部蛋白质。用3种荧光染料标记后进行等量混合,加到同一胶中进行双向电泳,经不同激光扫描获得蛋白质组图谱。经分析后得到差异蛋白质,挖取差异蛋白点经酶解后进行质谱测定及分析。结果与青年组相比,老年组葡萄糖调节蛋白、肌动蛋白、踝蛋白-1、丝蛋白、丝状肌动蛋白成帽蛋白、微管蛋白、丙酮酸激酶、磷酸丙糖异构酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶均明显降低。而中年组除细胞质肌动蛋白外其他蛋白未见明显差异。结论衰老时淋巴细胞自我保护功能衰退,免疫细胞的结构发生退行性改变,糖酵解功能降低促使免疫细胞运动能力减弱,导致吞噬功能减弱,机体的整体免疫能力受到影响,最终导致综合免疫衰老效应。
- 唐利华沃兴德卢德赵杨贞李毅胡菁荫
- 关键词：蛋白质组学免疫衰老单核细胞
- 温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：11
- 2009年
- 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。
- 卢德赵沃兴德沃立科李毅唐利华杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
