朱书
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业大学更多>>
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- 一种构建脑心肌炎病毒感染性克隆的方法
- 本发明涉及一种构建脑心肌炎病毒的感染性克隆的方法，该方法包括以下步骤：提取脑心肌炎病毒总RNA；RT－PCR方法分段扩增其全长cDNA，并分别建立亚克隆；用双酶切的方法将各段cDNA依次定向克隆至低拷贝质粒载体中，即得脑...
- 杨汉春盖新娜郭鑫张国庆朱书
- 文献传递
- 脑心肌炎病毒VP1蛋白100位氨基酸的突变导致其对小鼠致病性的改变被引量：5
- 2011年
- 作为脑心肌炎病毒(EMCV)的天然宿主,感染小鼠能引发多种疾病,其中包括脑炎、心肌炎及糖尿病.本研究利用之前构建完成的EMCV分离毒株BJC3的野生型感染性克隆,采用定点突变方法构建了4个VP1第100位氨基酸突变的突变株感染性克隆(VP1第100位氨基酸分别突变为丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸和脯氨酸)并获得了拯救病毒.虽然各突变病毒及野生型亲本拯救病毒在BHK-21细胞上形成的噬斑大小有所不同,但各病毒在BHK-21细胞上的复制水平未见差异.通过对突变病毒致病性进行系统分析,探究了VP1第100位氨基酸在病毒致病性及感染后疾病表型中所起的重要作用.结果表明,异亮氨酸和脯氨酸突变病毒对小鼠的致死率降低,脑中病毒载量减少且脑组织损伤轻微,而丝氨酸和丙氨酸突变病毒表现了与野生型亲本病毒相似的高致病性.结果证实,EMCVVP1第100位苏氨酸在病毒的体内复制中起重要作用,其突变会导致病毒对小鼠致病性的改变.
- 朱书盖新娜宫晓文郭鑫陈艳红杨汉春
- 关键词：VP1突变
- 脑心肌炎病毒致病性相关的衣壳蛋白氨基酸位点分析
- 朱书
- 关键词：脑心肌炎病毒衣壳蛋白重组病毒
- 一种构建脑心肌炎病毒感染性克隆的方法
- 本发明涉及一种构建脑心肌炎病毒的感染性克隆的方法，该方法包括以下步骤：提取脑心肌炎病毒总RNA；RT-PCR方法分段扩增其全长cDNA，并分别建立亚克隆；用双酶切的方法将各段cDNA依次定向克隆至低拷贝质粒载体中，即得脑...
- 杨汉春盖新娜郭鑫张国庆朱书
- 文献传递
- 猪脑心肌炎病毒分离株BJC3全长感染性克隆的构建与拯救病毒鉴定被引量：2
- 2009年
- 本研究旨在建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)的感染性克隆技术。利用RT-PCR分3段扩增出脑心肌炎病毒BJC3株的全基因组cDNA,依次克隆至低拷贝质粒pWSK29,构建出全长质粒pWSKBJC3/w,经体外转录和转染BHK-21细胞拯救病毒。结果表明,构建的全长cDNA克隆具有感染性,在BHK-21细胞上可拯救出病毒。拯救病毒(命名为rVBJC3W)在BHK-21细胞上的生长特性与其亲本病毒BJC3一致,并保持了对小鼠的致病性。本研究成功构建了中国第1株猪脑心肌炎病毒的感染性克隆,为深入研究其分子致病机制提供了必要的工具。
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- 关键词：脑心肌炎病毒感染性克隆病毒拯救
