曾喜多
- 作品数：16 被引量：5H指数：2
- 供职机构：华农温氏畜牧股份有限公司更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目广东省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 猪IL-6基因在毕赤酵母中的表达及生物活性鉴定
- 2014年
- 为了快捷、大量地表达猪白细胞介素-6(IL-6)蛋白,试验采用PCR的方法,以含猪IL-6全基因的重组质粒p MD19-T-IL-6为模板扩增猪IL-6成熟蛋白基因,构建真核重组表达载体p PICZαΑ-IL-6,转化毕赤酵母野生株X-33进行分泌表达,并进行表达蛋白的初步处理和活性鉴定。结果表明:SDS-PAGE可检测到预期的蛋白条带,诱导表达24,48,72,96 h后,分泌IL-6蛋白分别占总蛋白的76.1%、83.4%、84.6%、89.6%。第96小时时,猪IL-6表达产物浓度约为0.94 g/L。Western-blot试验证实,重组猪IL-6蛋白与兔抗猪IL-6多克隆抗体发生特异性反应。猪IL-6表达产物浓度为10.5 mg/L时对猪外周血淋巴细胞具有促进增殖作用,浓度为105.0 mg/L时则具有抑制作用。
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- 关键词：真核表达毕赤酵母
- 壳聚糖包被的口服猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的免疫效果
- 引言感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)是导致猪病毒性腹泻(PED)的主要原因之一,特征为严重的肠炎、呕吐、水样腹泻和体重减轻等。严重的仔猪死亡率使得PEDV感染成为中国养猪业损失的一大因素。壳聚糖(Chitosan,CS)...
- 磨健悦孙宝丽曾喜多谢青梅毕英佐马静云
- 一种可口服的猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的制备方法
- 本发明属于动物生物医药工程领域，具体公开了一种可口服的猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的制备方法。本发明制备出的亚单位疫苗直接作为口服疫苗免疫小鼠，能够刺激小鼠产生较强的体液免疫应答和细胞免疫应答。该疫苗在胃肠部不易降解，免疫...
- 马静云磨健悦曾喜多孙宝丽毕英佐
- 文献传递
- 猪IL-2和IFNγ基因重组乳酸菌的构建、表达及其口服免疫佐剂应用
- 引言细胞因子（cytokine,CK）对机体的免疫调节和健康具有重要作用,随着研究的深入,其被认为是具有光明前景的新型免疫佐剂。乳酸菌作为重要的益生菌,对其研究目前也己不仅局限于益生作用和作为外源表达系统使用,其活载体功...
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- 一种表面展示PEDV核心抗原COE蛋白重组毕赤酵母菌的制备方法
- 本发明涉及动物生物医药工程领域，具体公开了一种表面展示猪流行性腹泻病毒核心抗原COE蛋白重组毕赤酵母菌的制备方法。本发明采用酵母α凝集素表面展示系统来表达PEDV的抗原核心基因COE基因，使COE蛋白锚定在酵母的细胞壁上...
- 马静云袁尧胡文锋李智丽曾喜多孙宝丽毕英佐
- 文献传递
- 2011-2015年间我国华南地区PEDV流行毒株的S基因遗传变异分析
- 引言猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种以腹泻、呕吐和脱水为主要临床特征的高...
- 赵晓亚曾喜多李智丽张冠群牛建强孙宝丽马静云
- 文献传递
- 一种可口服的猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的制备方法
- 本发明属于动物生物医药工程领域，具体公开了一种可口服的猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的制备方法。本发明制备出的亚单位疫苗直接作为口服疫苗免疫小鼠，能够刺激小鼠产生较强的体液免疫应答和细胞免疫应答。该疫苗在胃肠部不易降解，免疫...
- 马静云磨健悦曾喜多孙宝丽毕英佐
- 猪流行性腹泻病毒COE基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析被引量：2
- 2015年
- 为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE基因在原核表达载体pET-32a(+)中的表达产物,并检测表达产物的生物活性,根据猪流行性腹泻病毒COE基因的全序列设计引物,以pCMV-PEDVCOE质粒作为模板,通过PCR扩增得到COE基因编码区的序列,将其克隆至含有6×His tag的原核表达载体pET-32a(+)中进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化,以此纯化产物为包被抗原建立了ELISA检测方法,并用该方法对39份感染PEDV猪血清进行了检测。结果显示,COE基因在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,获得与预期分子质量相符的融合蛋白条带。经Western-blot检测,该蛋白能与Anti-PEDV单克隆抗体发生特异性反应。该融合蛋白纯化、复性后的质量浓度为0.7mg/mL。采用以融合COE蛋白为包被抗原建立的ELISA对39份PEDV感染猪血清的检测结果都为阳性,说明该融合蛋白具备作为包被抗原建立ELISA抗体检测方法的潜力。
- 磨健悦孙宝丽魏钟艳曾喜多曾志良谢青梅毕英佐马静云
- 关键词：猪流行性腹泻病毒原核表达生物活性
- 高致病性猪蓝耳病综合防控体会被引量：3
- 2011年
- 2007年农业部证实高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合症病毒变异株引起、多种病原混合感染的一种急性高致病性疫病,又称"猪高热病"。本文从发病原因、流行病学分析、临床症状、剖检变化和综合防控措施等方面进行了综述。
- 李智丽马静云曾喜多丁改法
- 关键词：高致病性猪蓝耳病
- 一种分泌表达PEDV核心抗原COE蛋白重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用
- 本发明属于动物生物医药工程领域，具体公开了一种分泌表达PEDV核心抗原COE蛋白重组乳酸乳球菌及其制备方法和应用。本发明通过设计多条引物，采用重叠延伸PCR的方法将信号肽等序列连接到PEDV核心抗原COE的基因上，并将其...
- 马静云李智丽曾喜多魏钟艳孙宝丽谢青梅毕英佐
- 文献传递
