施志敏
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：教育部长江学者奖励计划国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 成年大鼠海马神经前体细胞表达功能性的L-型钙通道被引量：3
- 2005年
- 为了建立一种能够获得高纯度成年大鼠海马神经前体细胞(HPCs)的体外贴壁培养方法,并鉴定HPCs上是否存在功能性L-型钙通道,分离Wistar成年大鼠海马组织,制成单细胞悬液,利用无血清培养技术,在添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、N2和B27supplement的DMEM/F12培养液中进行培养.连续传代,采用细胞免疫荧光法对第六代细胞进行鉴定,呈巢蛋白(nestin)阳性的细胞可达99.9%.把培养高纯度的细胞在分化培养基中诱导分化14天后,表现为神经元和星形胶质细胞的形态,且分别呈Ⅲ型β-微管蛋白(Tuj1)阳性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性.细胞免疫荧光和免疫印迹结果显示,HPCs表达L-型钙通道的Cav1.2α1C和Cav1.3α1D亚单位,共聚焦钙成像证明了功能性L-型钙通道的存在,并且利用全细胞膜片钳技术记录到了L-型钙电流.以上结果表明成年Wistar大鼠的海马HPCs可表达功能性的L-型钙通道.
- 冯锦丽胡德辉陈明田映红施志敏杨建明朱心红李晓文高天明
- 关键词：成年大鼠海马神经前体细胞L-型钙通道
