方航荣
- 作品数:20 被引量:41H指数:3
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- 人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共修饰树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究被引量:5
- 2011年
- 目的联合人凋亡相关因子配体(hFasL)及人转化生长因子-β1(hTGF-β1)基因共修饰大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDC),提高imDC诱导大鼠同种异体原位肝移植免疫耐受的能力,以延长受鼠生存期。方法行以DA大鼠为供体、近交系Lewis大鼠为受体的同种异体原位肝移植140例,随机均分为7组:未给移植受鼠注射DC组(对照组)、mDC组、imDC组、空载体组、FasL组、TGF组及共转染组;分别于移植前5d每天给Lewis大鼠腹腔注射mDC、imDC、空载体转染的imDC、hFasL修饰的imDC、hTGF-β1修饰的imDC、hFasL和hTGF-β1共修饰的imDC各2×10^6个,于肝移植术后3、7、10d各处死4只,观察外周血肝功能变化[丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)],肝脏病理改变,肝脏凋亡,外周血清细胞因子,并进行生存分析。结果肝脏病理示术后7d,7组差异有统计学意义(P〈0.01),共转染组排斥反应均轻于TGF组和FasL组;10d时,7组差异有统计学意义(P〈0.01),共转染组排斥反应轻于TGF组和FasL组,TGF组轻于FasL组。肝功能示共转染组于7d时就已基本恢复正常,FasL组于7d时有所降低,但10d时反而升高,ALT及TBIL的浓度均高于共转染组(P〈0.01,P〈0.05);TGF组到10d时,肝功能已恢复正常,ALT及TBIL的浓度均低于FasL组(P〈0.01,P〈0.05),但与共转染组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测示,术后7d共转染组和TGF组的血清白细胞介素(IL)-1、IL-10及IL-12与FasL组比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);但共转染组和TGF组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。TUNEL显示FasL组的肝、脾及腹腔淋巴结中淋巴细胞凋亡指数与共转染组比较,差异均无统计学意义(P〉0.05),但多于TGF组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。FasL组中位生存期20d与imDC组(23d)�
- 曾金华邱明链陈丽红吴燕斌方航荣刘景丰
- 关键词:树突状细胞免疫耐受FASL转化生长因子-Β1肝移植
- 人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共转染大鼠未成熟树突状细胞对其生物学活性的影响被引量:3
- 2011年
- 目的观察人凋亡相关因子配体(hFasL)及人转化生长因子-β1(hTGF-β1)基因共转染的大鼠未成熟树突状细胞(imDC)对其生物学活性影响。方法实验分6组:mDC组、imDC组、空载体组、hFasL基因转染组、hTGF-β1基斟转染组及hFasL—hTGF-β1基因共同转染组(即共转染组)。用hFasL或(和)hTGF-β1真核表达载体(pIRES2-EGFP—hFasL、pIRES2-EGFP-hTGF-β1)转染培养6d后大鼠骨髓来源的imDC,转染24~48h后应用荧光显微镜、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Westernblot、流式细胞术及混合淋巴细胞反应(MLR)检测不同基因修饰的imDC的生物学活性。结果荧光显微镜观察显示pIRES2-EGFP—hFasL及pIRES2-EGFP-hTGF-β1质粒转染imDC后可见绿色荧光;ELISA检测共转染组和转化生长因子(TGF)组TGF-β1基因表达均高于mDC组、imDC组、空载体组及FasL组(P值均〈0.01),imDC组、空载体组及FasL组的TGF-β1基因表达均高于mDC组(P〈0.05)。hFasL基凶表达各组间的差异均无统计学意义(P值均〉0.05);经Westenblot检测hFasL及hTGF-β1基因转染组有均有相应蛋白表达(相对分子质量分别为31×10^3和43×10^3);流式细胞术显示表面分子CD86、CD80在mDC表达高于imDC及各基因转染组和空载体组;转染后混合淋巴细胞反应(MLR)显示,共染组T细胞的增殖反应均明显弱于TGF组和FasL组(P〈0.05)。结论联合FasL和TGF-β1基因转染的imDC存体外诱导同种异体免疫耐受的能力强于FasL或TGF-β1单基因转染。
- 邱明链吴燕斌陈丽红方航荣曾金华刘景丰
- 关键词:树突状细胞FASL转化生长因子-Β1基因修饰
- DNA修复基因XRCC1、MGMT在胃癌中表达的研究被引量:2
- 2013年
- 目的:探讨胃癌及正常胃组织中DNA修复基因XRCC1和MGMT的表达及其意义。方法:免疫组化法检测胃癌组织及正常胃组织中XRCC1和MGMT的蛋白表达情况。结果:胃癌组XRCC1蛋白的阳性表达率为86.25%明显高于正常胃组织的13.75%(P<0.05)。胃癌组MGMT蛋白的阳性表达率为33.75%,明显低于正常胃组织的66.25%(P<0.05)。二者在胃癌中的表达无明显相关关系。结论:XRCC1与MGMT基因在胃癌发生过程中可能起重要作用,两者在胃癌中表达无明显相关性,提示两者修复损伤途径相互独立。
- 方航荣郑建云刘冰李艳东王美妮
- 关键词:胃癌XRCC1MGMT
- 成人颈部胎儿型横纹肌瘤1例
- 2012年
- 患者男性,29岁。偶然发现左颈部包块,无压痛,未在意,后逐渐长大,肉眼可观察左颈部局部膨隆。西京医院颈部血管CT示左侧颈后部斜方肌深部可见一软组织包块,大小7.8 cm×6.4 cm×5.2 cm,肿块于颈2层面部分突入椎管内,颈椎反曲并左弯右突(图1)。颈椎MRI示左侧颈后部肌肉下见一不规则异常包块信号,大小6.9 cm×4.0 cm×8.1cm,边界清楚,T1增强呈明显高信号,
- 方航荣杨守京
- 关键词:软组织肿瘤横纹肌瘤胎儿型
- pIRES2-EGFP-hIL-10真核表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的构建带有报告基因EGFP的hIL-10真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出IL-10基因,构建IL-10基因和报告基因EGFP基因真核表达载体pIRES2-EGFP-hIL-10,经PCR、酶切、测序等方法进行鉴定,紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度。结果酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP-hIL-10载体序列正确。结论成功构建真核表达载体pIRES2-EGFP-hIL-10,可为后续器官移植免疫耐受的研究奠定基础。
- 陈丽红刘景丰方航荣邱明链
- 关键词:基因IL-10基因真核表达载体
- 水通道蛋白1与乳腺癌组织微血管生成的关系被引量:4
- 2011年
- 目的研究水通道蛋白1(AQP1)在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤微血管生成的关系,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法,对106例乳腺癌组织及作为对照的20例癌旁正常组织中AQP1表达情况进行检测;用CD105标记肿瘤新生血管,计数微血管密度(MVD)。结果 AQP1在乳腺癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为(307.48±31.07)‰和(32.50±12.73)‰,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织平均MVD值明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);AQP1的表达和MVD值与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期等因素无关(P>0.05),但与是否伴有淋巴结转移关系密切(P<0.05);乳腺癌组织中AQP1的表达与MVD呈正相关(r=0.647,P<0.05)。结论 AQP1在乳腺癌组织中高表达,可能促进乳腺癌组织微血管生成,在肿瘤的生长、浸润和转移中具有重要作用。
- 李卓康炜刘凯歌徐锐方航荣
- 关键词:乳腺癌水通道蛋白1微血管密度
- 真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL的构建及鉴定被引量:1
- 2011年
- 背景:FasL通过与靶细胞上Fas结合诱导程序性细胞死亡,可维持机体内稳态,诱导同种异基因移植免疫耐受,促进肿瘤细胞凋亡。目的:构建带有增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP及目的基因hFasL的真核表达载体pIRES2-EGFP-hFasL。方法:通过实时聚合酶链反应RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞中扩增出hFasL基因,与真核空载体plRES2-EGFP一起,经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,T4DNA连接酶连接,从而构建pIRES2-EGFP-hFasL。用紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度,经酶切、PCR技术、基因测序等方法进行鉴定。结果与结论:扩增出的hFasL条带大小约846bp,构建的plRES2-EGFP-hFasL经酶切后在846bp和2000bp处有特异性条带,DNA测序证实hFasL与Genebank上的序列完全一致。提示成功构建了含有hFasL及EGFP的真核表达载体plRES2-EGFP-hFasL。
- 邱明链方航荣陈丽红刘景丰
- 关键词:基因FASL增强型绿色荧光蛋白基因重组
- hIL-10基因修饰树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究
- 目的:
建立体外培养、诱导和扩增DA(DarkAgouti)大鼠骨髓来源的树突状细胞的方法;建立改良的大鼠原位肝移植模型和急性排斥反应模型,用hLK-10基因修饰大鼠骨髓来源的不成熟树突状细胞(imDC);探讨...
- 方航荣
- 关键词:树突状细胞基因修饰肝移植免疫耐受
- 文献传递
- 宫颈腺样基底细胞癌16例报告被引量:1
- 2015年
- 目的:探讨宫颈腺样基底细胞癌(ABC)的临床、病理特点及鉴别诊断。方法:采用组织学及免疫组织化学方法对16例ABC进行观察、分析。结果:ABC临床症状不明显,妇科检查宫颈无明显异常或轻度糜烂;活检组织学检查常合并宫颈高级别鳞状上皮内瘤变(CIN3)或宫颈管黏膜原位腺癌(AIS)。行宫颈锥切或单纯子宫切除术。镜下:瘤细胞体积较小,形态一致,排列紧密,细胞质少,胞核深染,核分裂不活跃;呈小巢状、条索状在宫颈间质内浸润性生长,巢周围细胞呈栅栏状排列,部分细胞巢中央见腺腔样结构及鳞状分化,无明显间质反应。浸润深度2-7mm,宽度3-7mm。随访1-8年无异常发现。病理诊断:宫颈腺样基底细胞癌。结论:ABC常伴有CIN3和AIS,诊断应与腺样囊性癌(ACC)等宫颈肿瘤相鉴别。
- 郑建云方航荣孙斌斌刘冰
- 人类表皮生长因子受体2(HER2)在食管癌中的表达及意义
- 2015年
- 目的探讨人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)在食管癌中的表达及意义。方法用免疫组化方法检测食管癌组织、远癌组织中HER2的蛋白表达。结果 HER2在食管癌组织中未见强阳性表达。结论 HER2在食管癌组织中有表达,但其表达强度未达到赫赛汀靶向治疗的标准。
- 方航荣刘冰徐锐寻萌温玉婷石国英
- 关键词:食管癌靶向治疗