成俊
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
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- 实时定量聚合酶链反应在肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用研究
- 2003年
- 目的:建立血浆、外周血白细胞HCMV DNA实时定量聚合酶链反应检测方法,评价其监测肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用价值。方法:用重组质粒PQHY-1制作标准曲线;分别用实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法,对28例肾移植术后病人采血标本动态检测,并将结果进行比较。结果:实时定量PCR最低可检测出20拷贝/孔的HCMV DNA,且可重复性强(批内及批间误差均<5％),在102～107拷贝/孔的浓度范围时与Q值有很好的线性关系(r=-0.978)。与PP65抗原血症检测结果比较,血浆及外周血白细胞定时定量检测的灵敏度分别为88.5％,94.2％;特异度分别为97.8％,95.4％。HCMV活动性感染时血浆和外周血白细胞HCMV DNA平均含量分别为102.4拷ml和103.2拷贝/106PBL。血浆和外周血白细胞中HCMV DNA阳性检出时间较PP65抗原血症阳性检出时间平均要早1.6和3.8天。结论:实时定量聚合酶链反应检测方法是一种灵敏度高,特异度好的定量检测方法,可用于监测早期HCMV活动性感染。
- 成俊谢森许贤林史晓峰夏穗生
- 关键词：人巨细胞病毒实时定量聚合酶链反应肾移植外周血白细胞
- HTK液和UW液对大鼠原代心肌细胞冷保存的保护作用(英文)
- 2005年
- 目的研究HTK液和UW液对体外培养的大鼠原代心肌细胞冷保存中的保护作用。方法体外培养大鼠原代心肌细胞,分别用生理盐水,UW液和HTK液在0℃∽4℃保存心肌细胞6h、8h、10h、12h。检测保存液的AST和LDH-L,台盼蓝染色法计算心肌细胞的生存率。结果UW液组和HTK液组的AST和LDH-L均比生理盐水组极显著低下,心肌细胞的生存率则极显著的高于生理盐水组。而在12h时,HTK液组的AST和LDH-L显著低于UW液组,心肌细胞的生存率在8h和10h也明显高于UW液组。结论HTK液和UW液均对体外培养的大鼠原代心肌细胞的冷保存有明显的保护作用。而HTK液相对于UW液更能延长对心肌细胞的冷保存时间。
- 史晓峰成俊夏穗生
- 关键词：UW液HTK液心肌细胞
- 犬肾移植致敏模型的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立犬致敏后的肾移植动物模型。方法雄性家犬各6条配对作为淋巴细胞供受体,采用小剂量（0.4×10^7-1.2×10^7个/kg）淋巴细胞多部位多次输注的方法诱导致敏。用补体依赖的淋巴细胞毒（complement deendent cytotoxicity,CDC）和混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture,MLC）试验进行检测。当CDC转为阳性和MLC显示反应淋巴细胞增殖明显活跃后,淋巴细胞供受体犬间进行交叉肾移植,术后定期ECT动态显像观察移植肾功能变化;分批摘取移植肾行病理检查,观察排斥反应发生情况。结果实验犬均在输注淋巴细胞3-4次后CDC转为阳性,MLC显示反应淋巴细胞增殖明显活跃。肾移植术后4天ECT检查有4条致敏犬移植肾血流灌注下降,肾功能出现损害,摘取的3只移植肾病理检查表现为抗体介导的排斥（延缓）或急性排斥反应;对照组未见异常。术后7天,致敏犬移植肾均因急性排斥失功;对照组3条犬有2条出现肾功能损害,病理检查示急性排斥反应。结论小剂量淋巴细胞多部位多次输注可以诱导出家犬的免疫致敏状态。致敏犬肾移植术后移植肾排斥反应出现较早,肾功能损害更严重。
- 谢森唐礼功刘幼英成俊夏穗生
- 关键词：肾移植动物模型
- 供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的免疫保护作用
- 2010年
- 目的探讨供体脾灌注对高度致敏患者移植肾的保护作用及机理。方法对16例高度致敏患者进行配对分组,实验组肾移植术中先予供体脾灌注。前瞻性观察脾灌注对受者群体反应性抗体(penel reactive antibody,PRA)、补体依赖细胞毒性(complement dependent cytotoxicity,CDC)试验、血清补体溶血活性(CH50)、可溶性人类白细胞抗原Ⅰ(soluble human leucocyte antigen-Ⅰ,sHLA-Ⅰ)以及术后早期移植肾排斥反应和移植肾功能的影响。结果供体脾灌注40min后,患者的PRA、CDC和CH50较灌注前显著降低,血清sHLA-Ⅰ浓度显著增加。对照组肾移植术后发生超急性排斥1例,加速性排斥反应3例,急性排斥反应3例。对照组排斥反应严重程度明显较灌注组高(u=2.54,P<0.05);对照组排斥反应发生时间为(3.3±2.6)d(中位数3.0d),脾灌注组为(10.5±6.2)d(中位数8.5d),组间比较差异具有统计学意义(t=10.46,P<0.01);术后近期血肌酐(serumc reatinine,Scr)值显著高于脾灌注组。结论供体脾灌注可以延缓高度致敏患者术后近期移植肾排斥反应的发生,减轻排斥反应强度,改善移植肾功能;其机制可能与供体脾脏特异性吸附受者毒性抗体,消耗血清补体和分泌s HLA-Ⅰ类抗原有关。
- 谢森唐礼功刘幼英李志雄成俊
- 关键词：脾脏群体反应性抗体
- 供犬脾灌注对特异性致敏犬移植肾功能的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨供犬脾灌注对特异性致敏犬移植肾的免疫保护作用。方法雄性家犬作为肾移植的供、受者。首先采用供者淋巴细胞多次输注诱导18只受者致敏后,随机平均将致敏受者分为3组。特异性脾灌注组:用加工过的人用血液透析穿刺管将同一供者的离体脾动、静脉与受者的腹主动脉及下腔静脉连通后开放血流(血流量约18～25 ml/min),充盈后轻揉脾脏,灌注40min,然后用同一供肾行肾移植术;非特异性脾灌注组:离体脾灌注以及肾移植的方法与特异性脾灌注组相同,不同的是供脾和供肾均来自于无关供者;对照组:开腹旷置40min后,同法行肾移植。监测脾灌注前、后各组受者微量淋巴细胞毒(CDC)试验和混合淋巴细胞培养(MLC)的变化;观察供者脾灌注对受者移植肾排斥反应发生和肾功能的影响。结果各组受者均在输注淋巴细胞3～4次后诱导致敏成功。特异性脾灌注可以显著降低受者CDC配型水平和MLC淋巴细胞增殖水平,使受者外周血白细胞计数一过性减少,总补体溶血活性(CH_(50))下降。肾移植术后特异性脾灌注组移植肾肾小球滤过率下降较非特异性脾灌注组和对照组缓慢;病理检查提示术后特异性脾灌注组移植肾排斥反应较非特异性脾灌注组和对照组为轻。结论供者脾灌注可以特异性吸附毒性抗体,使外周血激活淋巴细胞归巢,耗竭血小板,从而延缓特异性致敏受者肾移植后排斥反应的发生,改善移植肾功能。
- 谢森唐礼功刘幼英成俊夏穗生
- 关键词：肾移植灌注
- 术前预处理及组织配型对高度致敏患者移植肾功能的影响
- 2005年
- 目的:探讨术前预处理及组织配型对高度致敏患者移植肾功能的影响。方法:对38 例高度致敏患者(高敏组)肾移植术前进行预处理及组织配型,观察患者术后移植肾功能延迟(DGF)、排斥反应的发生和血肌酐(SCr)水平的变化。结果:高敏组术后发生超急性排斥反应(HAR)2 例;其加速性排斥反应(ACR)、急性排斥反应(AR)以及DGF发生率均高于非高敏组受者,1 年移植肾存活率则较低。高敏组中组织配型良好的受者较配型欠佳者AR发生率及术后1年SCr水平较低;术前预防性使用赛尼哌可降低术后的AR发生率。结论:预处理降低高度致敏患者群体反应性抗体(PRA),使患者易于配型成功,良好的组织配型和使用赛尼哌可降低术后AR的发生,均有助于移植肾功能的恢复。
- 谢森夏穗生陈知水成俊
- 关键词：肾移植群体反应性抗体组织配型
- 大鼠颈部异位心脏移植模型的建立被引量：5
- 2005年
- 目的建立一种简单实用的同种大鼠心脏移植模型,以利于研究移植免疫的机制。方法SD鼠供心之无名动脉及肺动脉分别与Wistar受鼠右颈总动脉及颈外静脉端端吻合。结果正式心脏移植100例,手术成功率为83%。手术时间为(70±15)min,平均冷缺血时间为(45±15)min。手术主要并发症是麻醉意外、动脉吻合口出血和血栓形成、静脉吻合口狭窄、失血性休克。未作任何处理的移植心脏平均存活时间为(7.0±3.7)天,停跳移植心脏病理表现为急性排斥反应改变。结论同种大鼠颈部异位心脏移植模型是研究免疫移植机制的良好模型。
- 谢森成俊唐礼功李志雄朱彤夏稳生
- 关键词：心脏移植大鼠颈部
- 供体脾灌注对高度致敏肾移植受者嵌合体形成的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨供体脾灌注对高度致敏肾移植受者稳定期嵌合体形成及移植肾功能的影响。方法对16例高度致敏患者进行配对分组,实验组肾移植术中先予供体脾灌注40min,前瞻性观察脾灌注对患者术后6个月内嵌合体形成、移植肾排斥反应发生及移植肾功能的变化。结果脾灌注后受者外周血中供者来源的有核细胞数量显著增加,受者形成稳定嵌合体的时间较早,例数比对照组更多;肾移植术后脾灌注组排斥反应发生时间较对照组延迟,排斥反应严重程度明显较对照组轻微;术后6个月时,脾灌注组患者血肌酐值低于对照组。结论供体脾灌注可以显著提高高敏肾移植受者外周血中供者来源的有核细胞数量,减轻排斥反应强度,从而促进受者嵌合体的形成,有利于改善稳定期移植肾功能。
- 吴建军谢森郑山根唐礼功刘幼英成俊夏穗生
- 关键词：肾移植脾脏嵌合体
- 携带绿色荧光蛋白人转化生长因子基因真核表达载体的构建被引量：9
- 2005年
- 目的 :构建携带绿色荧光蛋白 (GFP)人转化生长因子基因真核表达载体。 方法 :应用RT PCR方法扩增人转化生长因子基因 ,与GFP真核表达载体连接 ,构建带有标记基因和人转化生长因子基因的真核表达载体 ,并用限制性内切酶酶切鉴定。 结果 :构建的新质粒经酶切鉴定和DNA测序 ,证实新质粒的构建成功。 结论 :应用RT PCR方法扩增目的DNA片段 ,简单快捷 ;双酶切定向克隆可以保证构建一步到位 ,免去正反向重组体筛选的问题。
- 成俊史晓峰谢森唐礼功夏穗生
- 关键词：转化生长因子绿色荧光蛋白真核表达
- 输注TGF-β1基因修饰的供体脾细胞诱导同种大鼠移植心脏耐受的实验研究被引量：4
- 2005年
- 目的:研究TGF-β1修饰的供者脾细胞特异性输注对同种大鼠移植心脏耐受的诱导及效果。方法:建立同种大鼠异位心脏移植模型,用脂质体转染TGF-β1基因修饰供者脾细胞;观察TGF-β1修饰的脾细胞输注组,单纯脾细胞输注组和假处理组移植心脏存活天数和病理改变。结果:建立了稳定转染TGF-β1基因的脾细胞;TGF-β1修饰的脾细胞特异性输注可明显延长移植心脏存活时间(17.0±3.3)d,与单纯脾细胞输注组(7.0±1.1)d和假处理组(6.3±1.0)d比较,差异有显著性(P<0.05);而且可明显减轻同种移植心脏的病理损伤。结论:输注TGF-β1基因修饰的供体脾细胞可诱导同种大鼠移植心脏的耐受产生。
- 成俊夏穗生史晓峰谢森唐礼功
- 关键词：移植心脏基因修饰脾细胞诱导耐受脾细胞输注供体脾细胞
