彭海滨
- 作品数：25 被引量：157H指数：8
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- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 沙门氏菌快速检测试纸条的研制与应用被引量：10
- 2006年
- 应用提纯的兔抗沙门氏菌IgG-2包被硝酸纤维素膜检测线，羊抗兔IgG包被对照线，然后用胶体金标记纯化的兔抗沙门氏菌IgG-1建立了检测沙门氏菌的快速检测试纸条。该法通过胶体金标记兔抗沙门氏菌抗体直接显色，阳性者检测线出现红色线，整个试验过程仅需10～15min即可判断结果．与大肠杆菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌、阴沟肠杆菌等常见肠道菌不发生交叉反应．与沙门氏菌的最低检测量为2．3×105cfu／ml。试纸条4℃或37℃存放9个月，检测结果稳定．
- 陈琼孔繁德张长弓彭海滨徐淑菲
- 关键词：免疫层析胶体金沙门氏菌
- 沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒的研制与应用被引量：8
- 2006年
- 根据沙门菌保守的fimY基因序列设计合成了引物和TaqMan探针,建立了快速检测沙门茵的实时荧光定量方法,并对反应条件进行了优化,组装成快速检测试剂盒。通过对临床样品的检测,该试剂盒的检测灵敏度达4．5 CFU(25μL反应体系),比常规PCR高100倍,而且稳定性良好,至少可以冷冻保存9个月。结果表明,所建立的沙门菌实时荧光定量PCR检测试剂盒具有操作简便、快速、特异性强、灵敏度高、重复性好、稳定性强等优点,适于大量样品的检测。
- 孔繁德彭海滨徐淑菲陈琼陆承平
- 关键词：沙门菌TAQMAN探针实时荧光定量PCR
- 厦门地区饲料中沙门氏菌污染情况调查被引量：4
- 2006年
- 通过用常规方法、PCR方法和金标试纸条方法,同时对厦门地区饲料厂生产和养殖场使用的饲料和添加剂(200份),展开沙门氏菌污染情况的调查。结果从一份乌龟配合饲料中检出一株沙门氏菌。经血清学鉴定为纳米比亚沙门氏菌(S．Namibia,血清型为6,7:c,enx),同时 PCR检出与预计相符合的产物,电泳条带大小为529bp,金标快速检测试纸检测显示阳性结果。该菌国内至今未见报道。说明厦门地区饲料总体状况良好,沙门氏菌污染轻微,但应不断加强管理。
- 陈琼孔繁德彭海滨连玉华陈永锋徐淑菲
- 关键词：饲料沙门氏菌污染
- 斑点免疫金渗滤法检测沙门菌的研究与应用被引量：9
- 2006年
- 〔目的〕研究一种特异性强,灵敏度高,且操作简便,快速的沙门菌检测方法,以用于临床样品中沙门菌的快速检测,并能在基层推广应用。〔方法〕应用胶体金标记纯化的兔抗沙门菌抗体-1,SPA(金黄色葡萄球菌A蛋白)包被硝酸纤维素膜作对照点,建立直接检测沙门菌的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)检测试纸盒。〔结果〕通过胶体金标记兔抗沙门菌抗体直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需10￣15min即可判断结果,操作简单,与大肠埃希菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌等不发生交叉反应。沙门菌的最低检测量为4.5×106cfu/ml。同时将该法与国标法检测效果比较,符合率达100%。将胶体金标记的兔抗沙门菌抗体冻干粉4℃存放12个月,检测结果无差异。〔结论〕研究结果表明该法具有微量、特异、敏感、快速可靠,效果直观,判断容易,无需特殊仪器设备,非常适用于沙门菌的快速检测,值得推广应用。
- 孔繁德陈琼彭海滨陆承平
- 关键词：斑点免疫金渗滤法沙门菌
- 2010年-2011年广东地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析
- 2012年
- 为了解2010年-2011年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,采用RT-PCR方法扩增所分离的16株PRRSV的Nsp2和ORF5的基因,应用DNA Star、ClustalX2和MEGA5等对所得序列进行比对及遗传变异分析。16株PRRSV的Nsp2和ORF5基因的推导氨基酸序列同源性分别为75.3%～100%和87.5%～100%,与国内高致病性PRRSV代表毒株JXA1的氨基酸同源性分别为74.2%～98.2%和87.5%～99%。Nsp2遗传进化分析显示,这16株PRRSV均属于美洲型毒株,其中15株病毒与以JXA1为代表的国内流行毒株处于同一分支,属美洲亚群Ⅰ;另外1株病毒与VR-2332和疫苗株MLV处在同一分支,属美洲亚群Ⅱ。2010年-2011年广东地区流行毒株仍为高致病性PRRSV,且存在经典疫苗毒株MLV。
- 彭海滨苏润环潘永飞宋延华李玉谷
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP2基因ORF5基因
- 多重PCR技术检测沙门氏菌两种四环素耐药基因
- 本研究应用二对特异性引物同时检测四环素耐药基因TetB和TetC。通过对35株沙门氏菌分离株的四环素耐药性检测,表明所有沙门氏菌分离株均含TetC基因,与药敏试验结果阳性符合率65.7%(23/35),8株含有TetB基...
- 孔繁德陆承平彭海滨徐淑菲陈琼
- 关键词：多重PCR沙门氏菌四环素耐药基因
- 文献传递
- 猪场常用消毒剂对沙门氏菌等细菌的作用效果试验被引量：2
- 2006年
- 为了解目前猪场常用消毒剂对猪场常见肠道致病菌的杀菌作用，开展了5种猪场常用消毒剂（特碘、复合醛、消特灵、氢氧化纳和高锰酸钾）杀灭5种猪场常见肠道致病菌（沙门氏菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、弗氏枸橼酸杆菌和绿脓杆菌）最低浓度（MBC）的试验，依次为1：600～1：800，1：10001：2500，1：30000-1：40000，0．01％～0．03％，0．0008％～0．004％。观察温度对各种消毒剂作用沙门氏菌MBC的影响，结果表明，温度越高，特碘的MBC也越高，复合醛则越低，而其他3种影响不大；固定各种消毒剂浓度所能杀灭的最高沙门氏菌浓度，均能达到10^6个·ml^-1以上，两种消毒剂配合使用效果不一。同时还检测了终止和不终止消毒剂作用对杀菌效果的影响不大，并对猪场用药提出几点建议。
- 彭海滨吴德峰孔繁德陈琼徐淑菲
- 关键词：消毒剂沙门氏菌
- 兽医针灸研究发展及其前景
- 本文对兽医针灸研究发展及其前景进行了探讨。文章围绕中国近现代兽医针灸曲折发展、兽医针灸在国外的传播和发展、兽医针灸疗法的改进、兽医针灸的复兴等进行了论述。
- 彭海滨吴德峰孔繁德林永利
- 关键词：中兽医药兽医针灸
- 文献传递
- 沙门氏菌实时荧光定PCR检测试剂盒的研制与应用
- 沙门氏菌是一种重要的人畜共患致病菌,在细菌性食物中毒中以沙门氏菌引起的食物中毒最常见。为此,建立一种快速、灵敏、准确的检测方法对预防沙门氏菌食物中毒具有重要的意义。本文根据沙门氏菌保守基因序列fimY基因设计合成了引物和...
- 孔繁德彭海滨徐淑菲陈琼陆承平
- 文献传递
- 多重PCR技术检测沙门菌两种四环素耐药基因被引量：3
- 2006年
- 应用两对特异性引物同时检测四环素耐药基因tetB和tetC。通过对35株沙门菌分离株的四环素耐药性检测,表明所有沙门菌分离株均含tetC基因,与药敏试验结果阳性符合率65.7%,8株同时含有tetB基因,与药敏试验结果阳性符合率100%,tetB基因和tetC基因双阳性的菌株与药敏试验结果阳性符合率也为100%。取其中部分菌株扩增出tetB和tetC基因片段进行序列分析,5株菌的tetB基因扩增产物序列完全相同,与质粒pRT11相应序列同源性达99.7%;14株菌的tetC基因扩增产物与质粒pBR322中的相应序列同源性为100%。证实沙门菌耐药基因普遍存在,且同时含有tetB和tetC基因的菌株表现耐药。多重PCR技术同时检测两种四环素耐药基因,适合大量样本的检测,对开展沙门菌四环素多种耐药基因的分子流行病学监测提供了有效途径。
- 孔繁德陆承平彭海滨徐淑菲陈琼
- 关键词：沙门菌四环素耐药基因多重PCR
