彭建萍
- 作品数：2 被引量：31H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人HMGB1基因的克隆、融合表达与生物学活性被引量：7
- 2006年
- 采用RT-PCR,从重症肝炎病人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cellsPBMCs)的mRNA中扩增高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1protein,HMGB1)基因,构建重组表达质粒pGEX4T-1-HMGB1,转化入大肠杆菌,测序证实其序列与基因数据库中HMGB1基因(NM_002128)一致。诱导表达的融合蛋白GST-HMGB1,用Glutathione Sepharose4B亲和层析纯化,经Thrombin酶切得到HMGB1。结果显示:经Western-blotting检测,GST-HMGB1和HMGB1均具有免疫活性;ELISA和MTT检测发现,两者均能刺激RAW264.7细胞产生大量TNF-α,明显刺激HeLa细胞增殖。GST-HMGB1具有良好的生物学活性,为今后的研究打下了基础。
- 刘洪波范学工Haichao Wang彭建萍黄建军李宁
- 关键词：克隆HMGB1原核表达纯化免疫活性生物学活性
- 乙型肝炎患者血清高迁移率族蛋白-1含量的检测及临床意义被引量：26
- 2007年
- 目的观察不同病情的乙型肝炎患者血清中晚期炎症介质高迁移率族蛋白-1（HMGB1）的含量，通过与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对，初步阐明晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭发生中可能发挥的作用。方法收集慢性重型乙型肝炎患者23例，CHB患者31例，健康对照者10名，抽取外周血10ml，按常规方法检测肝炎病情指标TBil和PTA。超滤管去除血清中的大分子蛋白质，再浓缩血清小分子蛋白，然后用Western blot的方法检测样品中HMGB1。利用纯化出的GST-HMGB1融合蛋白进行相对定量，计算出不同患者血清中HMGB1的水平，最后与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对。结果23例慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1检出率为100％（23／23），平均含量为（83．4±21．3）μg／L；10例重度CHB患者血清中HMGB1检出率为90％（9／10），平均含量为（78．1±19．5）μg／L；11例中度CHB患者的血清中HMGB1检出率为55％（6／11），平均含量为（60．6±14．3）μg／L；10例轻度CHB患者及12例恢复患者中均仅1例检出HMGB1，检出率分别为10％和8％，含量分别为28．9μg／L和39．7μg／L；健康对照者血清中未能检出HMGB1。血清中HMGB1的含量与TBil呈正相关，与PTA呈负相关。结论慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1的含量与疾病的严重程度密切相关，晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭的发生中可能起重要的作用。
- 刘洪波范学工黄建军李宁彭建萍李沙陵Haichao Wang
- 关键词：肝炎乙型高迁移率族蛋白-1肝功能衰竭
