张锦瑜
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：大连大学附属中山医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 端粒酶逆转录酶基因启动子调控的肿瘤细胞特异表达载体的构建和鉴定被引量：7
- 2003年
- 目的 利用端粒酶逆转录酶基因启动子 ,构建能在人肿瘤细胞中特异表达目的基因的表达载体。方法 通过PCR方法从 pEGFP N1质粒中扩增出绿色荧光蛋白基因并克隆到逆转录病毒载体pLNCX的多克隆位点上 ,命名为 pLNCX EGFP。设计含有特定酶切位点的引物 ,从人基因组中扩增出端粒酶逆转录酶基因启动子序列 ,将该序列片段定向克隆到已用限制性内切酶切除巨细胞病毒启动子的 pLNCX EGFP载体上 ,构建成端粒酶逆转录酶基因启动子调控的含有绿色荧光蛋白报告基因的表达载体 pLNT EGFP。将该表达载体pLNT EGFP瞬时转染高表达端粒酶活性的HLF细胞株和不表达端粒酶活性的WI38细胞株 ,以检测端粒酶逆转录酶基因启动子的转录活性。结果 表达载体pLNT EGFP经酶切、测序分析证实与设计的完全一致。细胞瞬时转染结果表明 ,pLNT EGFP能特异地在端粒酶阳性细胞中高效表达绿色荧光蛋白报告基因 ,而在端粒酶阴性细胞中不表达报告基因。结论 成功构建了由端粒酶逆转录酶基因启动子调控的肿瘤细胞靶向表达载体。
- 尹家俊胡祥傅攀峰袁晓东张锦瑜
- 关键词：端粒酶逆转录酶基因基因治疗
- 乳腺癌患者术后腋窝引流液中C-metmRNA检测的意义
- 2005年
- 背景与目的:研究原癌基因C-met在乳腺癌患者术后腋窝引流液中表达的临床意义。材料与方法:用RT-PCR法检测32例乳腺癌患者行乳腺癌简化根治术后腋窝引流液中C-metmRNA表达,并以三磷酸甘油醛脱氢酶基因(humanglyceraldehydes-3-phosphatedehydrogenase,hGAPDH)为内参照。分析C-met阳性表达与肿瘤大小、腋窝淋巴结转移个数以及肿瘤雌激素受体(Estrogenreceptor,ER)和孕激素受体(Progesteronereceptor,PR)的相关性。结果:①腋窝引流液中C-met的阳性表达率为84.38%,高于常规病理检查腋窝淋巴结转移癌的阳性率,C-met的阳性表达率与腋窝淋巴结转移的个数呈正相关;②腋窝引流液中C-met的阳性表达率与肿瘤的大小呈正相关;③ER和PR的阴性与C-met表达呈负相关趋势。结论:应用RT-PCR检测乳腺癌患者常规术后腋窝引流液中的C-metmRNA表达阳性提示病人患侧胸壁淋巴管内存在肿瘤细胞微转移,预示肿瘤有复发和远处转移可能以及病人的总生存期的缩短。其阳性表达率与肿瘤的大小及分期、淋巴结转移的个数呈正相关。与常规病理检查腋窝淋巴结肿瘤转移相比,能更早地检测出肿瘤细胞在胸壁淋巴管中的转移,而且具有更高的准确性。
- 杨卫军曹铭谦尹家俊严晓寒张锦瑜张殿龙王亚东张维祥
- 关键词：RT-PCR
- 急性肠系膜血管栓塞的诊治体会被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨急性肠系膜血管栓塞的诊断及治疗方法。方法 对 1995年 5月 - 2 0 0 2年 8月收治的18例病人的诊断及治疗情况进行分析。结果 死亡 6人 ,其中 1998年以前收治的 8例病人死亡 4例 ,死亡率为5 0 %。 1998年以后收治的 10例病人 ,由于采用血管造影、CT等检查方法及采用溶栓治疗或Fogarty导管取栓等治疗方法 ,死亡 2人 ,死亡率为 2 0 %。结论 早期诊断早期治疗是治疗的关键。
- 邱树升张锦瑜王承正
- 关键词：肠系膜血管栓塞
- 野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶mRNA转录的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 研究野生型 p5 3基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶 (hTERT )mRNA转录及端粒酶活性的影响。方法 将含人野生型 p5 3基因的pcDNA3 p5 3转染人胃癌细胞系BGC 82 3 ,通过半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测转染后细胞hTERT基因mRNA的转录 ,聚合酶链式反应结合酶联免疫吸附 (PCRELISA)方法检测端粒酶活性。结果 转染野生型 p5 3基因后 48、72hBGC 82 3细胞的hTERT基因mRNA转录量由对照组的 ( )下降为 ( )和 (+ ) ;转染前BGC 82 3细胞表达高水平的端粒酶活性 (3 .0 49) ,而转染 48、72h后的端粒酶活性分别为 1.678和0 .75 7。结论 野生型 p5 3基因能够显著抑制人胃癌细胞hTERT基因mRNA的转录 。
- 尹家俊胡祥张锦瑜宗成国邱树升王承正邢壮杰
- 关键词：野生型P53基因胃癌端粒酶逆转录酶MRNA转录RT-PCR
- C-erbB-2与ER、PS-2在乳腺癌中的表达及其临床相关性被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨C erbB 2与ER、PS 2在乳腺癌中的表达及临床意义。方法 用免疫组织化学的方法检测 110例乳腺癌中的C erbB 2、ER、PS 2的表达情况 ,进行对照比较。结果 C erbB 2的阳性率达 49.0 9% ;ER的阳性率达5 8.18% ;PS 2的阳性率达 63 .64 %。C erbB 2的表达与乳腺癌病理类型、腋淋巴结转移及数目、多中心癌灶有相关性(P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 5 ) ,与ER及PS 2呈负相关 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 5 )。结论 乳腺癌中C erbB 2、ER、PS 2的检测对于指导临床治疗 。
- 王承正张锦瑜邱树升曹铭谦
- 关键词：乳腺癌C-ERBB-2ER免疫组织化学
- p16基因逆转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞生长的抑制作用被引量：2
- 2002年
- 张锦瑜尹家俊胡祥宗成国邢状杰
- 关键词：基因构建胃癌细胞生长
- 早期胃癌活体组织中血管内皮生长因子、p53蛋白和增殖细胞核抗原表达与预后的关系被引量：1
- 2001年
- 目的 研究早期胃癌患者术前胃镜活检组织中血管内皮生长因子 (VEGF)、p5 3蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达与胃癌预后的关系。方法 对 1980～ 1991年 6 8例早期胃癌患者的术前胃镜活检标本做VEGF、p5 3蛋白和PCNA免疫组化染色。结果 胃癌复发组的VEGF阳性率 (5 / 5 )显著高于无复发组 (14/ 6 3) ,P <0 0 1;VEGF阳性胃癌患者的 8年生存率 (14/ 19)显著低于VEGF阴性胃癌患者的生存率 (4 9/ 49) ,P <0 0 1;p5 3蛋白和PCNA表达在 2组中差异无显著意义 ,P >0 0 5。结论 胃镜活检组织中VEGF的表达对于早期胃癌患者是重要的预后因素 ,可指导术前术式的选择。
- 张锦瑜曲文志尹家俊宋燕
- 关键词：内皮生长因子蛋白质P53早期胃癌
