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张现臣: 作品数：16 被引量：17H指数：2; 供职机构：北京民海生物科技有限公司更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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乙肝疫苗新型佐剂CpG-BW006对小鼠脾NK细胞表面分子CD69的表达及γ干扰素分泌的影响被引量：1: 2013年; 目的:研究重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)佐剂BW006对小鼠脾自然杀伤(NK)细胞表面分子CD69的表达和γ干扰素(IFN-γ)分泌水平的影响。方法:BW006、HBsAg单用或联用体外刺激小鼠脾NK细胞,流式细胞仪检测NK细胞膜表面分子CD69的表达水平,ELISA检测IFN-γ的分泌水平。结果:5μg BW006体外刺激小鼠脾NK细胞24 h后,NK细胞表面分子CD69的表达达峰值(阳性率45.18%),显著高于40μg HBsAg组(21.44%)(P<0.05),与5μg BW006和40μg HBsAg联用组(58.49%)相比无显著差异;24 h时,5μg BW006组的IFN-γ分泌水平达56.95ng/mL,显著高于40μg HBsAg组(8.74 ng/mL)(P<0.05),与联用组(57.70 ng/mL)相比无显著差异。结论:BW006具有上调NK细胞表面分子CD69表达和诱导IFN-γ分泌的早期活化NK细胞的功能,作为疫苗的新型佐剂前景较好。; 舒凯黄秋香张现臣; 关键词：CPG-ODN

BW006细胞免疫活性及其乙肝疫苗佐剂作用的研究: 乙型肝炎(以下简称乙肝)是严重危害人类健康的疾病之一,目前尚无有效治疗慢性乙肝的药物,接种乙肝疫苗是控制乙肝流行的唯一有效措施。基因工程乙肝表面抗原(HBsAg)单独免疫免疫原性较低,需要与相应佐剂联合应用才能诱导机体产...; 张现臣; 关键词：乙型肝炎疫苗佐剂 CPG-ODN 细胞免疫体液免疫; 文献传递

肠道病毒71型病毒样颗粒在汉逊酵母中的表达被引量：1: 2013年; 目的应用汉逊酵母表达系统进行肠道病毒71型（EV71）病毒样颗粒（VLP）的表达。方法将经过汉逊酵母密码子优化的人EV71的P1和3CD基因片段克隆到汉逊酵母表达载体PMV上，获得重组表达质粒PMV．P1-3CD，转化汉逊酵母宿主菌AU0501，PCR方法及稳定传代培养筛选整合P1和3CD基因的重组菌株。重组菌种接种在含有1％甲醇的培养基中进行诱导表达，对表达产物进行SDS．PAGE、Western blot检测。挑选优胜表达菌株进行30L发酵罐发酵培养，发酵产物经过粗略纯化后进行电镜分析。结果筛选获得EV71重组表达菌株；SDS-PAGE检测结果显示在相对分子质量（M，）为26×10^3、33×10^3、35×10^3处有明显的VP3、VP1、VP0蛋白条带，M大小与预期的目的蛋白大小一致；Western blot检测结果显示表达产物与EV71-VP1单克隆抗体在犯为33×10^3处有较为明显的VPl反应条带，表达产物具有良好的免疫反应性；表达菌株发酵表达量可达200mg／L，电镜分析可见24～30nin的VLP，且颗粒结构完好。结论应用汉逊酵母表达系统成功表达了EV71VLP，为今后研制EV71VLP疫苗奠定基础。; 顾美荣宋琳琳许珊珊付作申林福玉张现臣魏文进贾士儒; 关键词：肠道病毒71型汉逊酵母病毒样颗粒

一种流感病毒裂解疫苗及其制备方法: 本发明提供一种流感裂解疫苗及其制备方法，该流感裂解疫苗中每剂含H1N1、H3N2和B型三种流感血凝素、CpG ODN佐剂、铝佐剂。本...; 张现臣魏文进黄秋香钟汉斌孟红彦王春雨; 文献传递

乙型肝炎病毒“a”决定簇突变对乙型肝炎疫苗保护效果的影响被引量：9: 2007年; 目的研究乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）“a”决定簇热点突变对乙肝疫苗保护效果的影响。方法根据HBV基因保守序列设计PCR扩增引物,针对“a”决定簇突变设计简并探针,制备检测HBV“a”决定簇16种热点突变的基因芯片,并用克隆测序对芯片检测结果进行验证。基因芯片法检测47对乙肝疫苗阻断失败的母婴配对样本和323例阻断成功的母亲样本。结果克隆测序证明,基因芯片法具有特异性。应用该法检测发现,野生株（阳性率为78．66%）仍为主要流行株,依次为126A（11．27%）、145R（5．76%）、126S-1（5．28%）、126S-2（4．56%）、129H（1．20%）、144A（0．72%）、129R（0．24%）,但126A阳性率显著高于其他突变（P值均＜0．01）。阻断失败组母婴均感染的样本与阻断成功组的126A、126S-1、126S-2和145R检出率的差异无统计学意义。结论现有乙肝疫苗可阻断126A、126S和145R突变株的母婴传播,目前毋需研制针对126和145位点突变的新型乙肝疫苗,但需加强对突变株的流行病学监测。; 张瑞李荣成朱凤才李艳萍刘社兰张现臣王升启梁争论李河民庄辉; 关键词：乙型肝炎病毒基因芯片突变

新型乙肝疫苗CpG-BW006佐剂对鼠脾B细胞表型和功能的影响: 2011年; 乙型肝炎病毒（HBV）感染是慢性肝炎、肝硬化和原发性肝癌的重要原因，目前尚无治疗HBV感染的特效方法。乙肝疫苗是预防HBV感染最安全、最有效的手段。然而，接种乙肝疫苗后的免疫应答受多种因素的影响，约有10％的人群对该疫苗反应低下或无反应[1]。CpG为近年来佐剂研究的热点。; 张现臣何鹏胡忠玉邱少辉方鑫梁争论; 关键词：乙肝疫苗细胞表型佐剂 HBV感染

乙型肝炎疫苗新型佐剂BW006对小鼠脾树突细胞表型和功能的影响被引量：1: 2011年; 目的研究新型佐剂BW006(含CpG基质的寡核苷酸)与重组乙型肝炎表面抗原(HBsAg)对小鼠脾树突细胞(Dendritic cell,DC)表型和功能的影响。方法应用BW006和/或HBsAg体外刺激小鼠脾DC,流式细胞仪检测DC膜表面分子CD80和CD86的表达水平,分支DNA(bDNA)法检测IL-12p35和IL-12p40 mRNA的表达水平,ELISA检测IL-12p70的分泌水平。结果 5μg BW006体外刺激DC 3和6 h,IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达水平分别达峰值,刺激6 h时较刺激前分别增加了约1.2和26倍;刺激12和24 h,CD86和CD80的表达分别达峰值(74.53%和36.10%);刺激24 h,DC分泌IL-12p70的水平达高峰(3 311.20 pg/ml);5μg BW006联合40μg HBsAg体外刺激DC 24 h,DC表面分子CD80和CD86的表达阳性率分别为25.17%和51.65%,IL-12p70分泌水平达2 699.70 pg/ml,与BW006单独刺激组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 BW006具有早期活化DC,上调DC表面协同刺激分子CD80和CD86表达及诱导IL-12分泌的功能,作为乙肝疫苗的新型佐剂,具有较好的应用前景。; 张现臣何鹏胡忠玉邱少辉方鑫梁争论; 关键词：CPG-ODN 白细胞介素12

新型CpG佐剂——BW006协同乙型肝炎病毒表面抗原活化小鼠B、T淋巴细胞的作用被引量：1: 2011年; 目的探讨新型CpG佐剂BW006协同乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)对小鼠B、T淋巴细胞活化的影响。方法以BW006和(或)HBsAg体外刺激小鼠脾单个核细胞,检测B细胞膜表面分子CD80、CD86和T细胞早期活化分子CD69的表达水平。小鼠免疫BW006和(或)HBsAg后24h取脾,无菌分离单个核细胞,检测CD80、CD86和CD69的表达水平。结果 40μgHBsAg+5μg BW006体外刺激24h时,B细胞CD80、CD86阳性率显著高于对照组(27.36%±1.77%vs 10.41%±0.72%;98.92%±0.09%vs 74.85%±5.13%,P均<0.01),T细胞CD69阳性率显著高于对照组(12.47%±3.31%vs 7.15%±1.37%,P<0.01)。4μg HBsAg+20μg BW006联合免疫后,小鼠脾B细胞CD80的阳性率显著高于BW006免疫组(12.26%±2.33%vs 9.80%±1.17%P<0.05)和生理盐水免疫组(12.26%±2.33%vs 8.50%±1.34%,P<0.05),CD86阳性率显著高于生理盐水免疫组(63.84%±1.48%vs 56.69%±1.33%,P<0.05),T细胞CD69表达阳性率显著高于BW006组(33.97%±2.17%vs 31.32%±2.78%,P<0.05)和生理盐水组(33.97%±2.17%vs 27.77%±2.51%,P<0.05)。结论 BW006佐剂能有效辅助HBsAg活化B和T细胞,上调B细胞表面协同刺激分子CD80、CD86及T细胞早期活化分子CD69的表达。; 何鹏张现臣胡忠玉方鑫邱少辉梁争论; 关键词：CPG 淋巴细胞

甲型肝炎灭活疫苗（SH株）接种食蟹猴的免疫原性研究: 2013年; 目的研究甲型肝炎灭活疫苗（SH株）食蟹猴的免疫原性。方法甲型肝炎病毒SH株接种人胚肺二倍体细胞（MRC-5），培养、收获的病毒液，经纯化、灭活后铝佐剂吸附制成甲型肝炎灭活疫苗。采用食蟹猴进行疫苗的免疫原性研究。结果接种疫苗后的食蟹猴，体内产生抗HAV抗体和中和抗体，抗核抗体结果为阴性。结论该疫苗具有良好的免疫原性。; 黄秋香魏文进郑海发王三龙刘雨王春雨钟汉斌孟红彦黎武军张现臣; 关键词：甲型肝炎灭活疫苗食蟹猴免疫原性

新型冠状病毒灭活疫苗对Beta和Delta变异株的交叉中和活性: 2022年; 目的评估新型冠状病毒灭活疫苗免疫人群和小鼠血清对变异株(Delta株和Beta株)的交叉中和活性。方法各取20份人群常规两剂基础免疫血清、三剂加强免疫血清和两剂小鼠免疫血清作为实验材料,采用新型冠状病毒原型株、Delta和Beta变异株3株病毒,在生物安全三级实验室中采用微量中和试验检测中和抗体。通过分析不同稀释度血清对固定剂量病毒的中和活性,计算血清阳性率和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT),评估免疫血清的交叉中和水平。结果人免疫血清对不同变异株的阳性率均大于95%;基础免疫后,接种者血清对原型株、Delta和Beta变异株的中和抗体GMT分别为109、41和15,与原型株比较,针对Delta和Beta变异株的中和抗体GMT分别下降2.7倍和7.3倍;加强免疫后,接种者血清对原型株、Delta和Beta株的中和抗体GMT分别为446、190和86,与原型株比较,针对Delta和Beta变异株的中和抗体GMT分别下降2.3倍和5.2倍。小鼠免疫血清对不同变异株的阳性率均为100%;对原型株、Delta和Beta变异株的中和抗体GMT分别为2037、862和408,与原型株比较,针对Delta和Beta变异株的中和抗体GMT分别下降2.4倍和5.0倍。结论新型冠状病毒灭活疫苗免疫后的人群和小鼠血清均可对Delta和Beta变异株产生一定水平的中和保护,且人群加强免疫后可产生更高水平的中和抗体和交叉中和抗体,为该疫苗的临床应用和保护效果评估提供了重要参考。; 郑学学黄保英蒋聪利张现臣王国蒨陈玉娟李娜谭文杰刘建凯; 关键词：基础免疫加强免疫变异株

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