张晶 作品数:35 被引量:100 H指数:5 供职机构: 河南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 国家自然科学基金 河南省教育厅自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 哲学宗教 更多>>
以蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的遗传转化体系构建 被引量:2 2016年 以蝴蝶兰种子萌发的原球茎为试材,研究了蝴蝶兰遗传转化过程中不同植物生长调节剂、抗生素对蝴蝶兰原球茎增殖和转化效率的影响,并对转基因后代进行了检测。结果表明,适用于蝴蝶兰原球茎的增殖培养基,即蝴蝶兰原球茎遗传转化的共培养培养基配方为:3.0 g/L花宝1号+2.0 g/L活性炭+2.0 g/L水解酪蛋白+15 g/L蔗糖+3.0 mg/L 6-BA+0.6 mg/L 2,4-D+6.5 g/L琼脂,pH=5.5~5.6;适用于蝴蝶兰遗传转化过程中的筛选培养基配方为:增殖培养基+8.0 mg/L潮霉素+50 mg/L头孢霉素,pH值为5.5~5.6。蝴蝶兰转基因后代的PCR分子检测及GUS活性组织化学检测结果表明,外源基因成功整合到了蝴蝶兰基因组中。 张和臣 董晓宇 王利民 张晶 孟月娥 符真珠 李艳敏关键词:原球茎 乌拉尔图小麦NBS-LRR家族生物信息学分析 被引量:5 2018年 乌拉尔图小麦(Triticum urartu)为二倍体小麦,是普通小麦(Triticum aestivum,由A,B,D三个亚基因组成的异源六倍体)A基因组供体。普通小麦基因组庞大,异源六倍体性质导致其基因组研究存在困难。伴随普通小麦供体A基因组和D基因组的测序完成,为小麦A基因组供体NBS-LRR基因家族的研究提供了重要生物信息学数据。目前获得的抗病(R)基因大部分具有NBS(nucleotide-bindingsite)和LRR(leucine-rich-repeat)结构域,属于NBS-LRR基因家族。本研究采用HMMER对乌拉尔图小麦蛋白序列信息进行了NBS-LRR家族基因筛选,通过Paircoi2网站进行coil-coil结构域分析,采用Uniprot和NCBIBlast进行了验证和排除,经Bioedit、MEGA5.1、ClustalW、Jalview等软件进行了NBS-LRR基因序列分析,确定了乌拉尔图小麦的NBS-LRR基因数量、类型、结构特点和系统发育学关系。最终从乌拉尔图小麦中获得485个NBS-LRR基因,占基因组1.503%,其中331个N型,163个CNL型(其中34个CN型),60个NL型,无Tir型。随后经MEME网站筛选获得CNL亚家族中的15个相对保守的motif,N末端结构均保守性较高。此外,PLN00113出现在LRR的位置,在系统进化树的各分支中随机性分布。乌拉尔图小麦NBS-LRR基因的分类、蛋白序列的motif分析和系统进化树的研究为小麦NBS-LRR家族基因的功能研究提供重要依据。 刘小芳 袁欣 聂迎彬 张晶关键词:NBS-LRR 基因家族 生物信息学分析 芍药花药愈伤组织诱导及体细胞胚发生 被引量:11 2021年 以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性。结果表明,芍药花药愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg·L^(-1)2,4-D+1mg·L^(-1)NAA+0.1mg·L^(-1)KT+30g·L^(-1)蔗糖+6.5 g·L^(-1)琼脂,愈伤组织诱导率为14.7%。转入体细胞胚诱导培养基上,历经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,体胚诱导率为52.1%;在成苗培养基中能够长出真叶并得到完整植株,成苗率为47.1%。经根尖染色体法鉴定出单倍体和二倍体植株。该研究初步建立了通过体细胞胚间接发生途径实现植株再生的培养体系,可为芍药属其它品种的花药培养提供借鉴,获得的再生植株是芍药遗传学研究和育种工作的重要材料。 李艳敏 蒋卉 符真珠 张晶 袁欣 王慧娟 高杰 董晓宇 王利民 张和臣关键词:芍药 花药培养 愈伤组织 体细胞胚 再生植株 蝴蝶兰R3-MYBx1基因及其在花色调节中的应用 本申请属于植物品种培育技术领域,具体涉及一个蝴蝶兰R3‑MYBx1基因及其在花色调节中的应用专利申请。该基因的开放阅读框含有162bp碱基,其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。MYBx1基因参与花瓣的呈色过程,但是无... 张和臣 王利民 符真珠 董晓宇 张晶 郑谊 李艳敏 王慧娟 蒋卉 高杰文献传递 矮牵牛RCW基因的克隆及功能分析 2019年 花色是植物的重要性状,其形成受多种因素影响。为了进一步解析矮牵牛花瓣呈色的分子机制,我们以生物信息分析、基因克隆、基因表达分析、基因沉默等技术,在矮牵牛中克隆和鉴定了一个影响花瓣呈色的基因RCW。不同矮牵牛组织中进行表达分析表明,该基因在雄蕊、雌蕊、花瓣、叶片、根、茎、萼片中都表达,但是在花瓣中的表达随着花瓣发育逐渐增强;并且受到AN1、AN11、PH3等转录因子的调控。在矮牵牛品种M1×V30中进行RNAi沉默RCW基因的表达,其花瓣中的pH值与对照相比明显降低,花瓣呈现更深的紫色。对RCW编码的蛋白进行亚细胞定位发现其位于内质网、高尔基的膜系统上,表明其可能参与pH相关蛋白的转运过程。因此,RCW基因在矮牵牛花瓣细胞中的功能,主要是通过参与pH相关蛋白的转运,调控花瓣液泡中的pH环境,从而影响花瓣的呈色过程。本研究为全面揭示矮牵牛花瓣呈色的分子机制提供了重要依据,并为今后通过分子育种手段改变植物花色提供了理论基础。 袁欣 符真珠 王利民 张晶 董晓宇 张泰然 高杰 蒋卉 王慧娟 李艳敏 张和臣关键词:转录因子 基因功能 矮牵牛 呈色 打破紫荆种子休眠方法研究 被引量:4 2016年 比较4个紫荆品种(普通紫荆、白紫荆、加拿大紫荆及巨紫荆)在打破种皮休眠(机械损伤、浓硫酸、过氧化氢处理)和打破内休眠(0、100、200、400 mg/L GA3浸种)条件下处理24 h或48 h后种子萌发率的差异。结果表明:机械损伤和浓硫酸处理能在不伤及种胚的条件下快速有效地腐蚀紫荆种皮,从而促进种子萌发;过氧化氢处理对种皮有轻微腐蚀作用,但对打破紫荆种皮休眠无明显作用;在解除种皮休眠后,100 mg/L和200 mg/L GA3处理的种子发芽率较高,普通紫荆、加拿大紫荆发芽率达到100%,巨紫荆发芽率为70%。紫荆种子最佳萌发条件为:浓硫酸酸蚀45 min洗净后,转入200 mg/L GA3水溶液中浸泡24 h,置于25℃湿润滤纸上暗培养,至子叶伸展后于12 h光照/12 h黑暗条件下培养15 d后即可。此处理下,除巨紫荆发芽率和成苗率相对较低(仅为70%和40%)外,其他3个紫荆品种的发芽率和成苗率可高达100%。 米建华 孙雪霞 娄秋莲 符真珠 张晶关键词:解除休眠 一种基于蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的育种方法 本发明属于基因工程育种技术领域,具体涉及一种基于蝴蝶兰种子萌发的原球茎为受体的育种方法。该方法包括获得原球茎、增殖培养、预培养、农杆菌浸染、共培养、农杆菌洗脱、筛选培养、成芽小苗、生根等步骤。本发明以蝴蝶兰种子萌发的原球... 张和臣 王利民 孟月娥 董晓宇 符真珠 张晶 李艳敏 王慧娟 蒋卉文献传递 蝴蝶兰NBS-LRR家族基因挖掘和生物信息学分析 被引量:3 2018年 植物抗病基因(R基因)中最重要的一个家族,大部分具有NBS(nucleotide-binding site)和多个LRR(leucine-rich-repeat)结构域,称为NBS-LRR基因家族。小兰屿蝴蝶兰(Phalaenopsis equestris)全基因组测序的完成为蝴蝶兰NBS-LRR基因家族的研究提供了重要生物信息学数据。大辣椒蝴蝶兰(Phalaenopsis Big Chili)对病毒复合感染具有较强的耐受性,对筛选蝴蝶兰响应病毒相关关键基因具有重要意义。本研究依据小兰屿蝴蝶兰全基因组测序和大辣椒蝴蝶兰响应病毒胁迫转录组的测序结果,采用Pfam、HMMER、Orchid Base 3.0、Uniprot、NCBI Blast、Paircoi2网站和Bioedit、MEGA5.1、Clustal W软件,对蝴蝶兰进行了NBS-LRR基因的筛选和分类,确定了蝴蝶兰的NBS-LRR基因类型、结构和系统发育学关系,从小兰屿蝴蝶兰中筛选到21个NBS-LRR家族基因,占全基因组基因总数的0.008%,其中CNL型4个,NL型5个,CN型2个,无Tir型。从大辣椒响应病毒胁迫转录组数据中筛选到34个NBS-LRR家族基因,其中有4个基因在响应不同时期差异表达明显,与小兰屿蝴蝶兰NBS-LRR基因具有较高的同源性。随后对NBS-LRR蛋白序列的motif进行分析,具有14个相对保守的motif,部分位置稳定,部分存在缺失、移位或增加等变异。NBS-LRR基因的分类,蛋白序列的motif分析和响应病毒胁迫NBS-LRR基因的筛选为研究蝴蝶兰响应病毒关键NBS-LRR家族基因的功能研究提供重要依据。 蒋卉 张晶 符真珠 董晓宇 王慧娟 李艳敏 高杰 王利民 张和臣关键词:NBS-LRR 基因家族 病毒 一种诱导芍药花粉胚胎发生的方法 本发明涉及一种诱导芍药花粉胚胎发生的方法,具体为:1)采集芍药花蕾,低温预处理,再进行消毒处理;2)将花药接种到愈伤组织诱导培养基上,于温度23±2℃条件下先黑暗培养0~15 d,再弱光培养60~90 d,诱导出胚性愈伤... 李艳敏 符真珠 董晓宇 蒋卉 王慧娟 高杰 张晶 袁欣一种提高大叶金丝楸有效新梢分化数量的组织培养方法 本发明属于植物组织培养技术领域,具体涉及一种提高大叶金丝楸有效新梢分化数量的组织培养方法。该方法利用一组组合培养基提高大叶金丝楸新梢分化数量,该组合培养基包括诱导培养基、分化培养基和生长培养基。提高大叶金丝楸新梢分化数量... 李艳敏 王利民 董晓宇 张和臣 符真珠 师曼 蒋卉 王慧娟 高杰 王耀瑭 崔巍 袁欣 冯乃曦 张晶文献传递