张晶
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌isdb基因的克隆表达及其小鼠免疫试验被引量：5
- 2011年
- 为了研究金黄色葡萄球菌表面Isdb蛋白的免疫原性,应用PCR方法扩增出金黄色葡萄球菌Wood46株的isdb基因并进行序列分析,再将isdb基因插入到pET32-a(+)载体上,构建了pET32-a(+)-isdb重组质粒,将重组质粒转化到宿主菌大肠杆菌BL21中并诱导表达和纯化Isdb蛋白。用纯化的Isdb蛋白免疫小鼠,检测小鼠血清中抗体水平;在二次免疫之后的第2周,用金黄色葡萄球菌Wood46、HLJ23-1株对小鼠攻毒,每组8只小鼠。研究结果发现:isdb基因在不同菌株中高度保守;Isdb蛋白在宿主菌中获得成功表达;在免疫后血清抗体效价与对照组相比,均显著升高(P<0.05);攻毒结果表明Isdb蛋白对Wood46和HLJ23-1两种菌株攻毒保护率分别为62.5%和75%。以上结果表明Isdb蛋白具有较好的免疫原性和免疫保护作用。
- 马金柱崔玉东张晶朱战波朴范泽
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫原性
- 金黄色葡萄球菌GapC基因的克隆和表达被引量：4
- 2008年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)GapC蛋白,应用PCR方法扩增出S.aureus菌株BMSA/855/23-1的gapC基因,随后将其克隆到pMD18-T载体上。重组克隆pMD-T/gapC经测序后,与GenBank上已发表的序列进行对比分析。然后,将gapC基因插入到pQE-30质粒,构建重组质粒pQE30/gapC。重组质粒转化大肠杆菌E.coli M15(pREP4),IPTG诱导后,SDS-PAGE鉴定GapC融合蛋白的表达。结果表明成功扩增并克隆了S.aureus gapC,该菌株的gapC基因与GenBank上S.aureus BM10株的核苷酸序列一致性为99.3%,推导氨基酸序列一致性为99.4%。SDS-PAGE结果表明,GapC蛋白在E.coli M15(pREP4)中获得表达。
- 张晶朱洪伟崔玉东
- 关键词：金黄色葡萄球菌克隆
- 金黄色葡萄球菌IsdB、TRAP、RAP 蛋白免疫保护作用比较研究
- 张晶
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- S．aureus IsdB基因克隆和蛋白表达及免疫原性研究
- 金金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种重要的致病菌,可以引起人和动物的多种疾病,尤其它是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,给奶牛业造成了巨大的经济损失。目前,抗生素和金黄色葡萄球菌菌苗和类毒素等传...
- 马金柱张晶朱战波崔玉东朴范泽
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌重组GapC蛋白的GAPDH活性及免疫原性分析被引量：9
- 2008年
- 为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)表面GapC蛋白的GAPDH活性、免疫原性及免疫保护作用,应用PCR方法扩增出S.aureus的gapC基因,插入到pQE-30载体相应位点,构建重组质粒pQE/gapC。将其导入宿主菌E.coliM15(pREP4)后,IPTG诱导表达。重组蛋白纯化后进行GAPDH活性检测,并与灭活全菌体分别免疫健康家兔。然后,应用ELISA方法检测血清中IgG抗体水平及IFN-γ、IL-4细胞因子浓度,并用1.0×108CFU/mLS.aureus菌株Wood46对免疫家兔攻毒。SDS-PAGE结果显示,GapC蛋白在E.coliM15(pREP4)中获得表达;经GAPDH活性检测及WesternBlot检测,重组蛋白具有较高的GAPDH活性和抗原特异性;经ELISA检测,GapC蛋白及全菌体组兔血清中IgG抗体水平迅速升高,并在加强免疫后第28天达到最高(1:64000),加强免疫后第14d,血清中细胞因子IFN-γ和IL-4浓度与对照组相比,显著升高(P<0.05),而全菌体免疫组升高不明显(P>0.05);攻毒结果为蛋白免疫组家兔获得一定的免疫保护(4/5)。以上结果表明,表达的重组GapC蛋白具有GAPDH活性、较好的免疫原性及免疫保护力,可作为深入研究S.aureus基因工程疫苗的良好靶向。
- 朱洪伟朱战波崔玉东张晶刘乐锋朴范泽
- 关键词：金黄色葡萄球菌免疫原性免疫保护
