张敬法
- 作品数：15 被引量：34H指数：3
- 供职机构：同济大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中华医学会医学教育分会医学教育研究立项课题上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学核科学技术更多>>
- EPO修饰增强Müller细胞对RCS大鼠视网膜变性的干预效果被引量：2
- 2014年
- 目的研究人源促红细胞生成素(hEPO)修饰的Müller(hEPO-Müller)细胞对视网膜退行性病变大鼠的干预作用。方法通过质粒转染法构建hEPO和GFP的Müller细胞稳转株(hEPO-Müller和GFP-Müller);以体外共培养和体内细胞移植为研究体系,利用RT-PCR和冰冻切片及免疫荧光染色的方法检测hEPO-Müller对RCS大鼠视网膜退行性病变的干预作用。内核层与外核层厚度比较采用t检验。结果本实验成功构建了hEPO-Müller和GFP-Müller细胞系。将RCS大鼠的视网膜组织剥离并在体外不同条件下培养两周后测定视网膜各核层厚度发现,与对照细胞裂解液共培养组的内核层(15.94±1.77)μm和外核层(24.81±3.03)μm的厚度相比较,两核层的厚度分别在hEPO组为(23.03±3.29)μm,(33.92±7.59)μm(P<0.05);Müller组为(24.81±2.02)μm,(32.15±3.03)μm(P<0.05);hEPO-Müller组为(32.40±8.35)μm,(40.25±3.29)μm(n=3,P<0.01);以hEPO-Müller组厚度增加最为显著(P<0.05)。提示EPO和Müller细胞对视网膜变性都有干预作用且两者可以叠加。将hEPO-Müller和GFP-Müller分别移植到RCS大鼠的视网膜下腔,四周后取视网膜进行冰冻切片检测,染色结果显示,细胞移植后有更多的外核层细胞存活,且同样也是hEPO-Müller组的外核层细胞更多。此外,Müller移植并不会促进视网膜的胶质化。结论移植Müller细胞可以减缓RCS大鼠视网膜变性,而经hEPO修饰的Müller细胞对视网膜变性有更好的干预作用。因此,Müller细胞可以作为一种供体细胞兼携带hEPO等营养因子的载体用于视网膜变性的治疗。
- 李宗义李鹏高芙蓉范氏雪幸张敬法王方吕立夏徐国彤
- 关键词：细胞移植视网膜变性红细胞生成素MÜLLER细胞
- 混合教学模式在医学基础实验课程中的应用被引量：23
- 2018年
- 将包括微信公众平台、微课、问卷星在内的多种方式应用于医学生"生命科学综合实验"的教学中,使学生在课前通过微信公众平台推送的课件和视频进行预习;课后通过教师制作发送的微课视频进一步学习实验结果的整理、统计和分析;同时在实际操作中,让学生充当"教"与"学"的双重角色,加强学生对于操作的记忆和注意事项的理解;通过"问卷星"对学生进行在线测试,巩固复习所实践的内容和进行期末测试,力图通过多种教学方式提高实践课程的教学效果。
- 李姣徐磊高芙蓉王娟邵志华张敬法吕立夏
- 关键词：混合式教学
- 食蟹猴脂肪干细胞亚群分离及其对大鼠视网膜退行性疾病的治疗作用食蟹猴脂肪干细胞亚群分离及其对大鼠视网膜退行性疾病的治疗作用
- 目的 脂肪干细胞(Adipose-derivedstem cells,ADSCs)作为间充质干细胞的一种,具有多向分化潜能及强大的旁分泌作用。然而MSCs 通常并非均一的细胞,培养的细胞具有异质性,对于同一疾病的治疗功能...
- 吴靓婧高翔金彩霞高芙蓉张敬法徐晶莹王娟吕立夏田海滨徐国彤
- 关键词：脂肪间充质干细胞细胞亚群视网膜变性疾病
- EPO通过调节ZnT8及稳定细胞内锌离子参与糖网病时的细胞保护作用
- 徐国旭康道欢吕立夏张敬法王方徐国彤
- 促红细胞生成素对糖尿病视网膜病变致病通路的调节分析被引量：1
- 2010年
- 目的采用基因芯片分析技术探讨玻璃体腔内注射促红细胞生成素对糖尿病大鼠视网膜游在的保护作用机制及作用靶点。方法采用SD大鼠45只，并分为3组：正常组（15只）、糖尿病组（15只）及糖尿病玻璃体腔内注射促红细胞生成素组（15只）。运用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立糖尿病模型（60mg／kg BW）。玻璃体腔内注射促红细胞生成素在糖尿病发病后的第0，30d及120d进行，并于注射后4d将大鼠处死，提取视网膜RNA进行基因芯片分析。结果糖尿病组与眼内注射促红细胞生成素组相比在三个时间点有超过1000个基因发生了变化，正常对照组与耱尿病组相比发生变化的基因也超过了1000个。通过进一步分析得出在糖尿病发病的第4，34d及124d，糖尿病组与正常大鼠组相比均下调的通路分别为Pyruvate metabolism丙酮酸盐代谢通路，Galactose metabolism半乳糖代谢通路，Calcium signaling pathway钙离子信号通路，MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路。三个时间点同样对照组均下调的通路分别为Starch and sucrose metabolism淀粉蔗糖代谢通路，Neuroactive ligand—receptor interaction刺激神经组织的配体受体相互作用通路，Focal adhesion表面黏附通路。而在给予EPO治疗组中，与同期糖尿病大鼠组相比，原本下调的MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路被上调了，而原本上调的Focal adhesion表面黏附通路被下调了。结论糖尿病的发生增加了体内基因信号通路的变化，而给予眼内注射促红细胞生成素后使得原先有变化的信号通路发生了逆转。
- 楚青张敬法吴亚兰徐国彤李维业
- 关键词：糖尿病视网膜病变促红细胞生成素信号通路基因芯片芯片分析
- MicroRNA‑7在制备抗胶质化药物中的应用
- 本发明涉及一种MicroRNA‑7对神经系统胶质化抑制的应用；其中在以神经系统胶质化为主要病理过程的疾病中，MicroRNA‑7通过直接结合胶质成熟因子beta mRNA的3‑UTR端，负性调控GMFB蛋白的表达，通过抑...
- 徐国彤吕立夏张介平田海滨张敬法王娟
- 文献传递
- 多环芳烃类物质对细胞色素P450 1A1的诱导表达被引量：3
- 2013年
- 目的探讨多环芳香烃类化合物(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)对细胞色素P450 1A1(CYP 1A1)的诱导表达情况。方法以人肺癌细胞系A549为研究对象,选取16种含量较多的典型的PAHs暴露给药。MTT方法检测不同药物浓度下细胞的存活率以选择合适的给药浓度;在该浓度药物处理24 h后,收集各组细胞的总RNA及蛋白,用实时荧光定量(Real-Time)PCR及Western印迹法检测CYP1A mRNA和蛋白的表达。结果 MTT结果显示,PAHs浓度在0.2 mol/L时,细胞存活率为50%～60%,选用此浓度作为后续实验的给药浓度。与正常对照组相比,fluorene、2,3-benzanthracene、perylene、acenaphthylene和benzo[a]pyrene能显著诱导CYP1A1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 fluorene、2,3-benzanthracene、perylene、acenaphthylene和benzo[a]pyrene等烟草烟气内存在的化合物对细胞色素酶CYP1A1具有诱导表达作用。
- 谢丹君徐晶莹诸葛淳淳吕立夏张敬法徐国彤
- 关键词：细胞色素P450肺肿瘤
- 大鼠放射性白内障氧化损伤机制的探讨被引量：3
- 2010年
- 随着X射线在疾病诊断和治疗中的日益广泛应用，其生物学效应已引起人们的高度重视。研究表明，一定剂量的X射线照射对晶状体可产生辐射损伤效应，甚至形成放射性白内障。放射性白内障的发病机制涉及射线的直接作用、晶体蛋白的氧化损伤、机体微循环改变、微量元素变化等方面，其中晶体蛋白的氧化损伤被认为是放射性白内障形成的主要机制。
- 徐国旭刘东伟张敬法刘玉龙牟丽莎杨焕龚铠
- 关键词：放射性白内障X射线照射晶体蛋白生物学效应微循环改变
- 人源促红细胞生成素在Mller细胞中拮抗谷氨酸毒性作用的研究
- 2013年
- 目的观察高浓度谷氨酸刺激条件下Muller细胞的变化以及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的保护作用是否与维持Muller细胞的谷氨酸转运功能相关。方法用MTT法检测不同浓度谷氨酸处理大鼠原代视网膜Muller细胞和大鼠视网膜Muller细胞系rMC-1所引起的细胞活力变化。选择能显著降低细胞活力的最低谷氨酸剂量建立细胞损伤模型,并研究不同浓度EPO干预后细胞活力的变化。TUNEL(terminal deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick-end labeling)法检测各组细胞凋亡情况,Western印迹法检测谷氨酸转运体GLSAT在蛋白水平的变化。结果无论是在原代大鼠Muller细胞还是rMC-1细胞系中,谷氨酸的细胞毒性作用均呈剂量依赖趋势。原代Muller细胞中,12 mmol/L谷氨酸使细胞活力降低15.5%,10 mmol/L谷氨酸使rMC-1细胞活力降低15.6%;此时细胞凋亡明显增加,GLAST表达降低。0.2 U/ml和0.5 U/ml EPO分别对原代Muller细胞和rMC-1细胞的保护作用最佳,细胞凋亡数量显著减少,并防止了GLAST蛋白水平的降低。结论体外高浓度谷氨酸可损伤Muller细胞,EPO可以通过维持谷氨酸转运体GLAST水平等机制维持Muller对谷氨酸的正常摄取、抑制凋亡发生。
- 雇利敏张敬法徐华吕立夏李维业徐国彤
- 关键词：促红细胞生成素谷氨酸谷氨酸转运体
- 玻璃体视网膜增生性疾病的转化医学研究
- 徐国彤王方张敬法于靖
- 严重视力障碍不仅让很多患者感觉"生不如死"，而且对其家庭乃至社会都是沉重负担。医学的进步已经使沙眼、白内障等曾经的严重致盲疾病能得到有效治疗，但玻璃体视网膜的增生性疾病则是人类进入21世纪却仍未能解决的医学难题。这类进行...
- 关键词：
- 关键词：玻璃体视网膜病变
