张坤
- 作品数：13 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中国农业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国工程院咨询项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 乌珠穆沁马保护、开发与利用研究
- 张坤
- 化学激活和季节对克隆猪出生率的影响被引量：5
- 2009年
- 为了解化学激活对克隆猪出生效率的影响,研究了体外成熟的猪卵母细胞被激活恢复减数分裂到克隆猪出生的整个过程.首先研究了电激活(Ele),Ele+CHX+CB和Ele+6-DMAP3种激活方法对猪卵母细胞孤雌激活(parthenogenetic,PA)和核移植(nucleartransfer,NT)重构胚体外发育的影响.比较了Ele或Ele+CHX+CB激活方法对克隆猪出生效率的影响.实验中单独列出了PA胚的扩张囊胚率或NT优质囊胚率来代表囊胚的质量.结果表明:化学联合激活提高了PA的囊胚率和扩张囊胚率,但对PA胚的卵裂率和囊胚细胞数没有显著影响(P>0.05).Ele+6-DMAP对PA胚的囊胚率和扩张囊胚率有显著提高(P<0.05),但对NT胚的囊胚率和优质囊胚率没有提高甚至降低了NT胚的发育.Ele+CHX+CB虽然提高了NT胚的囊胚率(P<0.05),但对优质囊胚率没有影响.Ele+CHX+CB激活方法使克隆猪出生率有所提高但不显著.本文还研究了季节对猪孤雌发育和克隆猪出生率的影响.结果表明,春季收集的猪卵母细胞使用3种激活方法卵母细胞的孤雌囊胚率均高于冬季收集的猪卵母细胞的囊胚率.春季和冬季进行移植,克隆猪出生率没有区别.综上,在PA中获得的结果与NT胚中获得的结果不一定完全匹配,说明孤雌激活和重构胚的激活机制还是有区别的.化学联合激活虽然能提高囊胚率,但它的作用相当于降低囊胚形成的门槛,却不是从本质上改变囊胚发育能力,因此不能显著提高克隆猪出生效率.春季收集的卵母细胞在体外培养中的发育能力好于冬季收集的卵母细胞,但季节对克隆猪出生率没有显著影响.
- 马育芳卫恒习李燕李秋艳方锐赵蕊张坤薛恺娄颜坤戴蕴平连林生李宁
- 关键词：孤雌激活化学激活体细胞核移植克隆猪
- 季节对猪体外成熟卵母细胞的发育能力的影响被引量：5
- 2007年
- 猪的卵母细胞对外界环境非常敏感,这造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一.文章的研究目的是描述季节的变化对体外成熟卵母细胞发育能力的影响.研究中比较了不同季节每对卵巢获得A/B级卵的数量以及卵母细胞核成熟的比例(实验1),另外统计分析了不同季节孤雌(实验2)和核移植(实验3)胚胎发育能力的差异,最后在冬春两季分别进行了克隆胚胎的移植以观测其体内发育情况(实验4).结果显示实验1,春季(3月到5月)COCs/卵巢的比例最高(7.6±3.5),夏,秋,冬季的比例依次是(6.4±3.3),(6.7±2.9),(6.7±3.4),p<0.05.然而,没有发现卵母细胞的MⅡ比例有显著性差异((75.3±3.3)%,(73.5±2.3)%,(73.0±4.2)%,(76.5±6.7)%,依次是春,夏,秋,冬季的MⅡ比例,p<0.05).实验2,观察到夏季孤雌胚胎的囊胚率显著性降低(10.1±2.6)%,春,秋,冬季的孤雌胚胎囊胚率依次是(27.2±3.4)%,(22.4±3.5)%,(22.4±3.4)%,p<0.05.实验3,猪体细胞克隆胚胎在春季囊胚率获得提高((12.2±1.3)%,秋,冬季的克隆胚胎囊胚率依次是(10.2±1.2)%,(8.1±1.4)%,p<0.05).实验4,发现冬季胚胎移植无论是妊娠率还是出生率都明显低于春季.以上结果表明季节变化影响体外成熟卵母细胞的发育能力.
- 张坤张运海潘登科马育芳张建李旭阳卫恒习王少华李燕戴蕴平李宁
- 关键词：体细胞核移植孤雌激活卵母细胞
- 体细胞克隆猪和转基因体细胞克隆猪技术平台的建立与应用
- 李宁李秋艳卫恒习戴蕴平张运海潘登科张磊汤波娄彦坤李燕马育芳李俊郭英王莉莉张坤赵蕊
- 体细胞克隆猪技术属于现代生物学高新技术领域，它是通过特定的技术手段，将猪的体细胞核导入到去核的成熟卵母细胞中形成克隆胚胎，然后在特定阶段把克隆胚胎移植到代孕母体的子宫内完成发育，得到与供体细胞在遗传上完全一致的后代。体细...
- 关键词：
- 关键词：克隆猪体细胞克隆转基因
- 季节对体外成熟卵母细胞的发育能力的影响
- 猪的卵母细胞对外界环境非常敏感,造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一.猪卵脆弱的主要原因是其胞质中含有大量的脂肪滴,但目前其具体生物学功能还不清楚.众所周知,猪的繁殖表现和环境密切相关,例如,温度...
- 张坤张运海马育芳潘登科卫恒习王少华李燕戴蕴平李宁
- 关键词：卵母细胞体外成熟胚胎发育
- 文献传递
- 培育分蘖数增加的转基因禾本科植物的方法及其相关生物材料
- 本发明公开了一种培育分蘖数增加的转基因禾本科植物的方法及其相关生物材料。该方法包括向受体禾本科植物中导入名称为P<Sub>GH3</Sub>‑IPT的DNA分子，得到与所述受体禾本科植物相比，分蘖数增加和/或穗数增加和/...
- 付永彩李倩倩朱作峰谭禄宾刘凤霞张坤侯晶晶才宏伟孙传清
- 文献传递
- BOC1蛋白在调控水稻愈伤组织褐化中的应用
- 本发明公开了一种BOC1蛋白在调控水稻愈伤组织褐化中的应用。BOC1蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示。实验证明，提高籼稻中BOC1蛋白表达量，愈伤组织褐化降低，抗性愈伤组织筛选频率和抗性愈伤组织遗传转化效率提高。本发...
- 付永彩张坤苏晶晶谭禄宾朱作峰刘凤霞才宏伟孙红荧顾凭孙传清
- 季节对体外成熟卵母细胞的发育能力的影响被引量：2
- 2006年
- 猪的卵母细胞对外界环境非常敏感，造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一。猪卵脆弱的主要原因是其胞质中含有大量的脂肪滴，但目前其具体生物学功能还不清楚。众所周知，猪的繁殖表现和环境密切相关，例如，温度、湿度、光照等。本研究目的是描述季节的变化对体外成熟卵母细胞发育能力的影响。连续两年从当地屠宰场获取初情期前猪卵巢，抽取猪卯丘卵母细胞复合体，并在不含BSA的NCSU-23（添加10ng／mL： EGF，10ng／mL leptin，0．57mmol／Lcysteine，10IU／mLPMSG和101U／mLhCG）中培养44h，然后用透明质酸酶脱去卵丘。部分卵母细胞经过电击进行孤雌激活，部分卵母细胞用来进行体细胞核移植。对于猪体细胞核移植，使用长白猪胎儿成纤维细胞做为核供体，上述脱去卵丘的卵母细胞作为胞质供体。克隆胚和孤雌胚在添加4mg／mL的BSA液滴中培养，第2天和第6天分别计算卵裂和囊胚率（D0：融合或激活的当天）。其中每个实验至少重复3次，所有实验都经过SPSS（13．0）统计分析。比较了不同季节每对卵巢获得A级卵（外包3层以上致密的卵丘细胞并且卵胞质均匀的卵母细胞为A级卵）和B级卵（外包2～3层卵丘细胞并且胞质均匀的卵母细胞为B级卵）的数量以及卵母细胞核成熟的比例（实验1），统计分析了不同季节孤雌（实验2）和核移植（实验3）胚胎发育能力的差异。实验1中发现春季（3～5月）COCs／ovarypairs的比例最高[7．6±3．5（春）vs6．4±3．3（夏），6．7±2．9（秋），6．7±3．4（冬），P〈0．05]。然而，没有发现卵母细胞的MⅡ百分比有显著性差异[75．3％±3．3％（春），73．59／5±2．3％（夏），73．0％±4．2％（秋），76．5％±6．79／5（冬），P〈0．05]。实验2中观察到夏季孤雌胚胎的囊胚率显著性降低[10．2％±2
- 张坤张运海马育芳潘登科卫恒习王少华李燕戴蕴平李宁
- 关键词：体外成熟卵母细胞
- 内蒙古西乌珠穆沁旗现代民族马业发展态势研究被引量：2
- 2011年
- 本文通过对西乌珠穆沁旗养马基本情况、马匹利用方式、马文化协会功能和政策与资金支持等方面进行调研,对该地区的马业发展态势做出分析,发现当地马业发展存在存栏显著波动、利用方式原始且收益低、政策和资金支持力度不足、产业链不完善等问题。本文从保种、品系培育、赛事和旅游市场的开拓等方面提出相关建议,为实现西乌珠穆沁旗现代民族马业跨越式发展和我国现代马业可持续发展提供理论依据。
- 张坤张翔邓亮哈斯高娃韩国才
- 关键词：可持续发展
- BOC1蛋白在调控水稻愈伤组织褐化中的应用
- 本发明公开了一种BOC1蛋白在调控水稻愈伤组织褐化中的应用。BOC1蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示。实验证明，提高籼稻中BOC1蛋白表达量，愈伤组织褐化降低，抗性愈伤组织筛选频率和抗性愈伤组织遗传转化效率提高。本发...
- 付永彩张坤苏晶晶谭禄宾朱作峰刘凤霞才宏伟孙红荧顾凭孙传清
- 文献传递
