张京钟
- 作品数：24 被引量：84H指数：5
- 供职机构：首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达Nurrl基因神经前体细胞诱导分化为多巴胺能神经元
- 为探索在体外获得人多巴胺能神经元的有效途径,以过表达Nurrl基因神经前体细胞为模型,研究SHH和FGF8对神经前体细胞向多巴胺能神经元分化的影响。实验采用RT-PCR方法从人胎儿脑中获取Nurrl cDNA,测序鉴定后...
- 张京钟
- 关键词：神经前体细胞多巴胺能神经元免疫荧光法诱导分化
- 文献传递
- 诱导人胚胎神经前体细胞分化为多巴胺能神经元的实验研究
- 本研究旨在寻找一条能高效诱导人胚神经前体细胞分化为DA能神经元的途径,并通过移植到帕金森病大鼠脑内检验其转归.本研究以bFGF,LIF,GDNF,B27和维生素C为基础分化培养基成分,以人胚星形胶质细胞为滋养层,建立了人...
- 张京钟
- 关键词：神经前体细胞诱导分化神经干细胞移植帕金森病多巴胺能神经元
- 文献传递
- GDNF转基因成纤维细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠模型被引量：9
- 2002年
- 为了观察表达胶质细胞系源性神经营养因子 (GDNF)的基因工程细胞在脑内移植后对帕金森病大鼠的治疗作用 ,将 6-羟基多巴胺脑内定位单侧 (损伤侧 )注射制备大鼠帕金森病模型。随机将动物分为实验组 (2 0只 )和对照组 (15只 ) ,分别植入GDNF和 Lac Z转基因的原代培养大鼠成纤维细胞于损伤侧纹状体内 ,动态观察动物单侧旋转行为以及多巴胺及其代谢产物 3 ,4-二羟苯乙酸和高香草酸含量的变化。结果表明 :实验组帕金森病大鼠单侧旋转行为明显减少 ,为移植前旋转圈数的 (64 .8± 5 .8) % (P<0 .0 5 ) ;其纹状体内多巴胺含量显著提高 ,恢复至移植前水平的 (14 .5± 2 .2 ) % (P<0 .0 5 ) ,而对照组仅为 (1.92± 0 .15 ) % ;转基因细胞在脑内可存活 1年以上。本研究结果提示 GDNF基因治疗对大鼠帕金森病具有潜在的临床应用价值。
- 段德义杨慧张京钟赵春礼段春礼孙晓红赵焕英张进禄徐群渊
- 关键词：脑内移植大鼠模型胶质细胞系源性神经营养因子帕金森病
- 电针对大鼠局灶性脑缺血后脑内Bax,Bcl-2表达的影响被引量：31
- 2001年
- 为了探讨 bcl- 2基因家族成员 bax,bcl- 2的表达产物 Bax、 Bcl- 2与电针抗缺血脑损伤的关系。本实验采用改良线拴法制备大鼠大脑中动脉 (MCA )阻塞 -再灌注模型 ,并用 TTC及 HE染色观察缺血及电针后梗塞灶的变化 ,用免疫组织化学方法对大鼠局灶性脑缺血组织内 Bax,Bcl- 2免疫阳性细胞的分布及电针对该分布的影响进行观察。发现 :1.行为生理学观察 :电针组大鼠神经缺损 Bederson综合评分明显低于缺血组综合评分 (P<0 .0 5 ) ;2 .TTC染色表明梗塞灶中心位于尾壳核 ,累及大脑皮层 ;HE染色计算缺血组梗塞灶体积为 74.72± 3.6 7m m3,电针组为 5 2 .6 6± 1.81mm3,两组间有显著性差异 (P<0 .0 1) ;3.大鼠 MCA阻塞 30 m in再灌注 48小时后 ,缺血组及电针组梗塞灶中心 (尾壳核 )偶见 Bax及 Bcl- 2免疫阳性细胞 ;缺血组半影区 Bax阳性细胞数量显著增加 (P<0 .0 1)。 Bcl- 2免疫阳性细胞数反应性上调 (P<0 .0 5 ) ;电针组半影区 Bax的表达与缺血组相比下调 (P<0 .0 5 ) ,但仍高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;Bcl- 2的表达与缺血组之间无差异显著性。海马 CA1区神经元 Bax,Bcl- 2的表达在各组间均无显著性差异。结果表明电针有抗缺血脑损伤的效应 ,其分子机制之一可能是通过下调半影区 Bax的表达而相对降低 Bax/Bcl-
- 张京钟施静刘晓春张静关新民王才源
- 关键词：电针局灶性脑缺血BCL-2
- 电针对大鼠局灶性脑缺血脑内Calbindin-D_(28k)表达的影响被引量：10
- 2002年
- 目的 :探讨钙结合蛋白家族成员Calbindin D2 8k与电针抗缺血性脑损伤的关系。方法 :用改良线栓法制备SD大鼠大脑中动脉 (MCA)阻塞 再灌注模型 ,应用TTC及HE组织化学染色观察缺血及电针后梗塞灶的变化 ,并应用免疫组织化学方法对大鼠局灶性脑缺血组织内Calbindin D2 8k免疫阳性细胞的分布及电针对该分布的影响进行观察。结果 :电针可明显改善局灶性脑缺血所造成的神经缺损体征 ;但缺血组及电针组Calbindin D2 8k免疫阳性细胞在梗塞灶中心区几乎检测不出 ,缺血组在半影区与对照组相比表达上调 (P <0 0 5 ) ;电针组Calbindin D2 8k在半影区的表达与缺血组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论 :局灶性脑缺血对Calbindin D2 8k在半影区反应性表达增强可能用以缓冲胞内过多的游离钙 ;电针在脑缺血时对神经元具有保护效应 ,但可能并不是通过调整Calbindin D2
- 张京钟施静刘晓春关新民王才源
- 关键词：脑缺血针灸疗法代谢电针疗法
- GDNF转基因成纤维细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠模型
- 为了观察表达胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)的基因工程细胞在脑內移植后对帕金森病大鼠的治疗作用,将6-羟基多巴胺脑內定位单侧(损伤侧)注射制备大鼠帕金森病模型。随机将动物分为实验组(20只)和对照组(15只),分别...
- 段德义杨慧张京钟赵春礼段春礼孙晓红赵焕英张进禄徐群渊
- 关键词：胶质细胞系源性神经营养因子基因治疗帕金森病
- 文献传递
- 微囊化牛肾上腺嗜铬细胞多巴胺含量的检测
- 2004年
- 目的 检测体外培养微囊化牛嗜铬细胞分泌多巴胺的动态变化 ,为用微囊化肾上腺髓质细胞移植治疗帕金森病提供实验依据。 方法 常规培养牛肾上腺髓质嗜铬细胞 ,用人工APA微囊对之微囊化后再培养 2 0d ,高效液相色谱 (HPLC)动态检测多巴胺含量 ,并分别在光镜及电镜下观察微囊内牛嗜铬细胞的形态变化。 结果牛嗜铬细胞在微囊内生长良好 ,在培养液内可持续检测到多巴胺。第 8d左右多巴胺的分泌达到高峰 ,随后逐渐下降 ,14d后分泌量处于一种恒定的状态。 结论 微囊化牛嗜铬细胞分泌的多巴胺可以通透微囊 ,可以考虑用来进行异种细胞移植治疗帕金森病。
- 张进禄张京钟蔡青鲁强赵春礼段春礼刘玉军薛毅珑徐群渊
- 关键词：牛嗜铬细胞微囊多巴胺
- 基因治疗帕金森病的分子生物学研究:神经营养因子Neurturin基因克隆及其真核表达
- 2005年
- 目的:克隆中国人Neurturin基因,重组携带Neurturin基因的真核表达载体,为研究Neurturin基因治疗帕金森病提供分子生物学基础。方法:实验于2003-03/2004-05在北京市神经再生修复研究重点实验室完成。采用RT-PCR方法从人胎儿脑中获取NeurturincDNA,将其克隆至pGEM-Easy-T载体中。测序鉴定后,重组携带Neurturin基因的反转录病毒载体pLPCX-Neurturin;通过脂质体将重组载体转染PT67包装细胞系,用病毒上清感染NIH3T3细胞系以检测病毒滴度。结果:RT-PCR扩增到人NeurturincDNA片段,序列与Genebank登录的序列一致;将Neurturin基因亚克隆至反转录病毒载体得到插入方向正确的重组载体pLPCX-Neurturin,病毒上清滴度为5×104CFU/mL。结论:获得人Neurturin基因cDNA序列,检测到Neurturin基因在真核细胞中表达,并得到较高滴度的病毒上清。
- 张京钟余爽段德义赵春礼徐群渊
- 关键词：帕金森病
- GDNF转基因成纤维细胞脑内移植治疗帕金森病大鼠模型
- 为了观察表达胶质细胞系源性神经营养因子(GDNF)的基因工程细胞在脑內移植后对帕金森病大鼠的治疗作用,将6-羟基多巴胺脑內定位单侧(损伤侧)注射制备大鼠帕金森病模型。随机将动物分为实验组(20只)和对照组(15只),分别...
- 段德义杨慧张京钟赵春礼段春礼孙晓红赵焕英张进禄徐群渊
- 关键词：胶质细胞系源性神经营养因子基因治疗帕金森病
- 免疫磁珠体外纯化人胎脑中CD133阳性干细胞的实验研究被引量：13
- 2004年
- 为了探讨免疫磁珠体外纯化人胎儿脑内 CD13 3阳性细胞的可行性 ,本研究取人胎儿脑室下区并制备单细胞悬液 ,采用磁珠分选法选择 CD13 3阳性细胞群 ,台盼蓝染色观察活力并采用流式细胞仪鉴定纯化前后 CD13 3的阳性表达率。结果显示 ,分选后所得细胞纯度为 ( 85 .5 7± 1.66) % ,回收率为 ( 62 .3± 18) % ,纯化前后细胞活力无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :联合应用CD13 3表面标志及免疫磁珠分选系统可有效地从人胎儿脑组织中直接分离得到高纯度的 CD13 3阳性干细胞 。
- 余爽张京钟张海燕赵春礼徐群渊
- 关键词：免疫磁珠纯化人胎儿CD133细胞活力
