张乐萃
- 作品数：71 被引量：362H指数：10
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 1株鸭源Ⅰ类新城疫病毒分离株F和HN基因的分子特性分析被引量：1
- 2011年
- 采用RT-PCR技术对Ⅰ类新城疫病毒(NDV)09-014分离株完整的融合蛋白(F)基因和血凝素-神经氨酸酶(HN)基因进行了扩增和遗传进化分析。F基因的序列测定结果表明:该分离株F基因全长为1 792 bp,可编码553个氨基酸,裂解位点的氨基酸组成为112E-R-Q-E-R-L117,具有典型的新城疫弱毒株特征。同源性分析表明本分离株的F基因与Ⅰ类新城疫病毒代表毒株之间核苷酸的同源性为93%～95.2%,而与Ⅱ类新城疫病毒代表毒株的同源性较低,介于70.6%～72.4%。HN基因的序列测定结果表明:HN基因全长2 001 bp,可编码616个氨基酸,同源性分析表明本分离株的HN基因与Ⅰ类新城疫病毒代表毒株之间核苷酸的同源性在92.7%～94.7%之间,而与Ⅱ类新城疫病毒同源性较低,为70.7%～71.5%。根据完整的F基因和HN基因构建的遗传进化树均表明:本分离株在分类地位上属于Ⅰ类新城疫病毒基因3型,因此Ⅰ类新城疫病毒的F基因和HN基因具有相似的进化速率。
- 冯莉莉刘华雷郑东霞赵云玲张维张乐萃王志亮
- 关键词：分子特性
- 牛肠道病毒2型单克隆抗体的制备及其应用研究被引量：2
- 2015年
- 旨在制备牛肠道病毒2型(BEV-2)单克隆抗体,建立检测BEV-2抗原的ELISA方法。将纯化的BEV-2VP1+重组蛋白质接种BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2/0用PEG4000进行融合,对杂交瘤培养上清进行筛选,获得2株稳定分泌抗BEV-2VP1+蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1G1、5G6)。用制备的单克隆抗体包被酶标板,通过一系列的优化,建立了BEV-2双抗夹心ELISA检测方法。建立的ELISA方法检测BEV-2病毒量的最低限为100TCID50·0.1mL-1,与BVDV、IBRV、BLV等病毒无交叉反应。本研究首次制备了牛肠道病毒2型单克隆抗体,建立了检测BEV-2抗原的双抗体夹心ELISA方法,该方法特异性强、敏感性高、重复性好,为进一步研究和开发快速诊断牛肠道病毒试剂盒奠定了基础。
- 郭金玉张鹤晓吴丹高志强张冉张乐萃
- 关键词：单克隆抗体夹心ELISA
- 黄芪多糖对免疫抑制鸡某些免疫指标影响的研究被引量：33
- 1999年
- ２８０ 只健康罗曼雏鸡，应用黄芪多糖和环磷酰胺后，检测某些免疫指标。结果表明， 环 磷酰胺能使外周血中淋巴细胞总数、淋巴细胞百分含量、 Ａ Ｎ Ａ Ｅ 阳性淋巴细胞百分率和新城疫 Ｈ Ｉ 抗体水平下降。黄芪多糖能使这几个指标上升。黄芪多糖并能使环磷酰胺的这种作用逆转。
- 孙月平王金宝张乐萃史美丽刘文华
- 关键词：黄芪多糖环磷酰胺免疫增强HI抗体
- 拯救新城疫病毒LaSota株辅助质粒的构建
- 2010年
- 本实验室保存的LaSota株新城疫病毒经SPF鸡胚增殖,收集尿囊液并纯化病毒,提取病毒基因组RNA。参考GeneBank收录的LaSota株新城疫病毒基因组序列,设计6对特异性引物,分别扩增病毒的NP、P和L1～L4六个基因片段,并将目的片段回收纯化,克隆至pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒并酶切鉴定,鉴定正确的样品进行序列测定,并比对测序结果。结果证明测序结果与GeneBank上公布的LaSota株新城疫病毒序列完全一致,没有任何氨基酸和核苷酸的变化,将NP、P、L分别连接至pVAX载体,其中L1～L4为顺次连接。鉴定结果表明NP、P和L基因已正确克隆至pVAX表达载体,证明3个辅助质粒构建成功,分别命名为pVAX-NP、pVAX-P和pVAX-L。
- 康震扈荣良房丽君张守峰张乐萃
- 关键词：反向遗传操作
- 热应激对肉鸡免疫器官形态学影响的研究被引量：21
- 1998年
- 热应激对肉鸡免疫器官形态学影响的研究张乐萃刘世华王述柏（莱阳农学院，山东２６５２００）侯世忠（胜利油田农业公司肉鸡场，山东２５７１０２）刘永庆（山东省农科院家禽所，济南２５０１００）在我国大部分地区夏季出现持续性高温、高湿天气，在温度超过３０℃时，鸡...
- 张乐萃刘世华王述柏侯世忠刘永庆
- 关键词：鸡病热应激免疫器官形态学
- 牛肠道病毒2型VP1^+表达和间接ELISA方法的建立与应用被引量：10
- 2014年
- 根据2005年从北京某牛场分离得到的一株牛肠道病毒2型(BEV-2)毒株序列,设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增BEV-2包含VP1(840 bp)蛋白基因片段的VP1+(1 275 bp)序列,扩增产物克隆到p MD-T19,进行测序验证。验证该序列为目的片段后,将其克隆到表达载体p ET-32a。重组质粒转化至Rosetta,经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示重组蛋白在大肠杆菌中高效表达。将重组蛋白作检测抗原包被酶标板,成功建立了检测牛肠道病毒2型抗体的间接ELISA方法。上述工作,为下一步BEV-2单克隆抗体的制备打下了基础。
- 郭金玉高志强张鹤晓张乐萃吴丹
- 关键词：间接ELISA
- 中药对免疫抑制鸡免疫器官形态学影响的研究被引量：11
- 1998年
- 将６０只星杂２８８雏鸡随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４组，每组１５只，Ａ组只应用中药；Ｂ组在应用氢化可的松的同时使用中药；Ｃ组只使用氢化可的松；Ｄ组为空白对照组。４组鸡均在９日龄、２８日龄时ＮＤ弱毒疫苗免疫，３５日龄称重、剖解、取材做石蜡切片，观察鸡免疫器官的形态学变化。结果表明，氢化可的松可使鸡免疫器官发育不良，抑制免疫活性细胞的生成，而中药对免疫抑制有调节作用，可使氢化可的松造成的免疫抑制转至正常水平。
- 张乐萃王金宝周克年孙月平任慧英吕永艳
- 关键词：中药免疫器官
- 水貂生长激素基因重组腺病毒的构建被引量：1
- 2010年
- 本研究利用AdEasyTMXL腺病毒载体系统构建了水貂生长激素基因重组腺病毒。利用PCR、酶切、凝胶回收等方法,从质粒pCMVmGH中获得水貂生长激素基因(mGH),构建穿梭质粒pShuttle-CMV-mGH。pShuttle-CMV-mGH经PmeⅠ酶切线性化后转化至BJ5183感受态大肠杆菌内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组,构建重组腺病毒质粒pAd-CMV-mGH。重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD-293细胞。PacⅠ酶切结果表明质粒重组成功。转染第10天,细胞出现圆缩、死亡、漂浮等典型病变,透射电镜检测到重组病毒。TCID50测得第2代重组病毒的滴度达到10-7.89/0.1ml。RT-PCR结果证实,重组病毒能够正确转录目的基因。结果表明本试验成功构建了水貂生长激素基因重组腺病毒,为水貂促生长的研究提供了新的科学手段。
- 王友东张乐萃
- 关键词：水貂生长激素基因重组腺病毒
- 一种防治禽流感的药物组合物及其制备方法
- 本发明公开了一种防治禽流感的药物组合物及其制备方法，属于禽畜药物技术领域，该药物组合物是贯叶连翘、苍术、草果、金荞麦、败酱草等原料药，根据药物不同性质分别采用水提取和接收蒸馏液等方式提取有效成分，并制成合剂或口服液。该药...
- 单虎张乐萃秦志华马晶蔡秀磊张洪亮
- 文献传递
- Internet对我国传统农业生产模式的影响(上)被引量：8
- 2006年
- 本文阐述了我国农业信息网络发展的概况,分析了农业信息网络发展的特征及其迅速发展的技术原因和社会原因。论述了Internet对我国传统农业生产模式的宏观影响,这些影响主要表现在Internet的发展对农民传统的生产观念的影响,对政府指导农业生产形式的影响,对农业信息网络发展的影响,对数字农业发展的影响等方面。
- 臧运平张乐萃盖明媚王政军
- 关键词：INTERNET传统农业
