季韶洋
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：北京林业大学理学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人Fas N 端融合蛋白的原核表达、纯化及初步分析
- 2008年
- 目的:对Fas蛋白N端的30～108位肽段进行原核表达,制备可溶性蛋白,并完成二级结构分析。方法:利用BLAST程序进行同源性分析,确定所要构建的FasN端半胱氨酸富集结构域(CRD),PCR扩增目的基因片段,将其克隆入表达载体pGEX-6P-1,并转化大肠杆菌BL21(DE3),于16℃用0.2mmol/L的IPTG诱导25h表达GST-Fas融合蛋白;用Glu-tathione Sepharose 4B柱分离GST-Fas融合蛋白,用PreScission蛋白酶切去GST标签,将洗脱的蛋白样品经Superdex 75凝胶预装柱进一步纯化;对所获得的可溶性、高纯度蛋白进行圆二色谱分析。结果与结论:获得重组质粒pGEX-6P-1-fas,并在大肠杆菌中可溶性表达了FasN端CRD功能结构域蛋白;经亲和层析、酶切、分子筛层析后,获得了可溶的、高纯度的FasN端CRD功能结构域蛋白;圆二色谱结果揭示目标蛋白富含β-折叠,为进一步研究Fas的结构和功能奠定了基础。
- 季韶洋张祥雪
- 关键词：FAS原核表达蛋白质纯化圆二色谱
- TNFRSF11B（OPG）蛋白功能结构域的研究
- Tnfrsf11b蛋白是1997年新发现的肿瘤坏死因子受体超家族的一个新成员,被称为破骨细胞形成抑制因子/(osteoclastogenesis inhibitory factor, OCIF或称osteoprotrge...
- 季韶洋
- 关键词：骨保护素蛋白质纯化圆二色谱
- 文献传递
- 人Tnfrsf11b-N端多肽的原核表达、纯化及其初步分析被引量：1
- 2008年
- 目的对原核表达和可溶性纯化后的Tnfrsf11b蛋白氨基端的24．106位肽段进行二级结构分析。方法根据已经发表的人Tnfrsf11b氨基酸序列，利用BLAST程序进行同源性分析，确定所要构建的Tnfrsf11bN端CRD功能结构域；将目的基因片段克隆入表达载体pGEX-6P-1并转化大肠杆菌BL21（DE3），于16℃、0．1mmol／LIPTG诱导25—30h可获得可溶性融合蛋白，经过Glutathione Sepharose^TM 4B亲和层析纯化和PreScission Protease酶切，洗脱的蛋白样品经过Superdex75凝胶预装柱进一步纯化，最终获得可溶性、高纯度的蛋白；对目标蛋白进行圆二色谱分析。结果获得重组质粒pGEX-6P-1-tnfrsf11b并在大肠杆菌中可溶性表达，经亲和层析、酶切、分子筛层析后获得了可溶的、高纯度的Tnfrsf11bN端功能结构域蛋白并对其进行了圆二色谱分析，发现目标蛋白富含β-sheet。结论高含量的β—sheet更有利于蛋白质参与与相互作用，这对其功能的发挥有着重要意义；对此进行研究可以更好的理解这种相互作用，并为进一步研究Tnfrsf11bN端的结构和功能奠定了基础。
- 季韶洋张祥雪
- 关键词：骨保护素原核表达蛋白质纯化圆二色谱
- 植物花粉萌发与极性生长中的钙信号
- 2007年
- 概述了国内外对植物花粉萌发、花粉管生长的生理过程、植物体内的相关Ca2+离子通道和Ca2+泵的分类、信号转导、花粉极性生长的现象、Ca2+离子可能参于花粉萌发和极性生长的模式系统和机理。
- 季韶洋张祥雪
- 关键词：花粉萌发
