孙华
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 姜黄中姜黄素类化合物抗前列腺癌及对15-脂氧合酶抑制活性的初步研究被引量:2
- 2016年
- 目的:研究姜黄中姜黄素类化合物对前列腺癌细胞PC3,DU145,LNCaP增殖及对15-脂氧合酶(15-LOX)抑制作用,并考察两者相关性。方法:应用四甲基偶氮唑比色法(MTT)测定姜黄乙酸乙酯部位、总姜黄素、姜黄素、单去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对前列腺癌细胞PC3,DU145,LNCa P增殖抑制;应用脂氧合酶抑制药筛选试剂盒测定对15-LOX抑制活性,分析两者的相关性。结果:姜黄素对15-LOX抑制活性最好,在6μmol·L^(-1)时,姜黄素抑制率为63.1%,且其对前列腺癌细胞PC3,DU145,LNCa P抑制活性也较好,IC50分别为(14.75±2.37),(18.99±3.43),(19.02±2.52)μmol·L^(-1);天然姜黄素类化合对前列腺癌细胞增殖的抑制活性与对15-LOX抑制活性呈一定的相关性(P<0.05)。结论:天然姜黄素类化合物抗前列腺癌作用与对脂氧合酶的抑制作用具有一定相关性,脂氧合酶可能是天然姜黄素作用于前列腺癌的靶标之一。
- 吴杰李娟叶娟孙华曹威刘刚宋金春江仁望
- 关键词:姜黄素前列腺癌靶标
- 重组人过氧化氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化和活性检测
- 2014年
- 为了了解人过氧化氢酶在各种常见肿瘤细胞中的表达情况,构建人过氧化氢酶的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化人过氧化氢酶,并进行活性检测.我们通过常规分子克隆手段构建原核表达载体pET-15bhCAT,将其转化大肠杆菌Rosetta-gami,经过IPTG诱导,表达产物经超声破碎后用Ni-NTA柱进行亲和层析纯化,用试剂盒检测重组hCAT酶活性,然后检测其对DNA氧化损伤的保护作用.通过荧光定量PCR(qPCR)测定hCAT基因在HLF-1正常细胞与几种常见肿瘤细胞中的表达情况.本研究成功构建了pET-15b-hCAT的原核表达载体,SDSPAGE检测结果表明,IPTG诱导表达出一条分子质量约为59.7 ku的目的蛋白,该蛋白主要以可溶的形式存在,活性检测表明经纯化得到的rhCAT比活力为62.9 U/mg,pUC19质粒氧化损伤保护实验显示rhCAT对DNA有一定的损伤保护作用.qPCR检测显示hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.成功构建了人过氧化氢酶的原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta-gami获得了hCAT的可溶性表达,纯化的rhCAT具有活性,hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.这为后续功能研究及性质实验奠定了基础.
- 孙华张自德江仁望王峰
- 关键词:过氧化氢酶表达纯化过氧化氢酶活性荧光定量PCR
- 脂氧合酶的表达纯化及抑制剂筛选体系的建立
- 目的:利用大肠杆菌原核表达体系表达5-脂氧合酶和15-脂氧合酶,并对重组的蛋白进行纯化、鉴定及活性检测,为其抑制剂的筛选奠定基础。 方法:用PCR技术对5-脂氧合酶和15-脂氧合酶基因进行扩增,得到的目的基因与pET-1...
- 孙华
- 关键词:5-脂氧合酶纯化
- 文献传递
- 天然酚类物质的葡萄糖醛酸化代谢及代谢物外排研究
- 目的: 天然酚类物质具有抗氧化、抗炎及抗肿瘤等多种药理活性,是一类极具药物开发潜力的化合物。然而,该类化合物体内显效形式和机制尚不明确。因此,阐明其体内代谢及处置过程极为重要。本论文将评价葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)在...
- 孙华
- 关键词:药理活性