姜艳平
- 作品数：171 被引量：314H指数：9
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪细小病毒HLJ-DN株分离鉴定被引量：1
- 2014年
- 按照常规病毒分离方法,从黑龙江省某猪场怀孕母猪所产死胎的肝脏中分离到一株病毒。利用ST细胞进行培养,通过血细胞凝集试验、间接免疫荧光试验及电镜观察等对新分离毒株进行鉴定。结果表明,该病毒能在ST细胞上生长并引起明显拉网状细胞病变,按Reed-Muench法计算出TCID50为10-4.6·0.1 mL-1;通过电镜观察可见直径约为20 nm无囊膜的病毒粒子,该病毒能凝集0.5%的豚鼠红细胞,免疫荧光试验显示在细胞上出现明显荧光,能与特异性抗体发生反应。对VP2基因进行扩增及测序并与GenBank已发表PPV毒株序列进行比对分析,结果显示该毒株与WB-143株在同一个分支里,同源性高达到99.8%,说明分离的病毒为猪细小病毒,命名为HLJ-DN,该病毒的分离为研究当地猪细小病毒的流行、预防和治疗奠定。
- 刘秀芬姜艳平唐丽杰李一经
- 关键词：猪细小病毒ST细胞VP2基因
- 猪流行性腹泻病毒RT-LAMP快速检测方法的建立及应用被引量：6
- 2021年
- 为建立一种适用于现场快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法,本研究以PEDV N基因的保守序列为靶基因设计引物,优化并建立了基于RT-LAMP的PEDV快速检测方法。结果显示,RT-LAMP方法的最佳反应条件为:反应温度为61℃,反应时间为50 min,Mg2+和dNTPs浓度分别为8.0 mmol/L和4.0 mmol/L,外引物和内引物最佳浓度比为1.4。特异性试验结果显示,该方法只能检测出PEDV,对其他病原检测均为阴性,具有良好的特异性;敏感性试验结果显示,该方法能够检测出的最低RNA浓度为6.52×10^(-5)mg/L,而常规RT-PCR能检测到最低浓度为6.52×10-3mg/L,表明RT-LAMP敏感性是RT-PCR的100倍;重复性试验结果显示,批内和批间重复性试验结果无明显差异,重复性较好。利用RT-LAMP和RT-PCR方法分别对3份已知阳性样品,5份已知阴性样品以及52份未知临床样品进行检测。阳性样品经RT-LAMP和RT-PCR方法均检测到PEDV,阴性样品均未检测到PEDV。52份临床样品中,RT-LAMP对PEDV检测阳性率为23.08%(12/52);RT-PCR检测阳性率为17.31%(9/52),二者的符合率为94.23%。以上结果表明,建立的RT-LAMP方法具有成本低、检测快、灵敏度高、特异性强等优点。且结果易于判定、便于现场检测,在病原检测方面具有良好的应用前景,为该病的流行病学调查及综合防制提供重要的实验依据。
- 狄亚心谭飞秦松跃于晓丽崔文姜艳平王丽唐丽杰周晗王晓娜乔薪瑗
- 关键词：猪流行性腹泻病毒RT-LAMPRT-PCR
- 1株E亚群禽白血病病毒的分离鉴定及遗传进化分析被引量：4
- 2022年
- E亚群禽白血病病毒(ALV-E)是指存在于鸡染色体中的内源性逆转录病毒基因组DNA或片段。具有转录活性的ALV-E既会对鸡的生产性能(体重和产蛋率)产生负面影响,又能从抗体水平干扰对外源性ALV的鉴别诊断。为对黑龙江省某鸡场内一禽白血病病毒RT-PCR阳性病料进行病毒分离鉴定及分析其基因组特征和遗传进化情况,通过分子生物学、病毒形态学及全基因组序列测定方法对病毒培养物进行鉴定和分析,结果显示,该分离株可在CEF细胞盲传至第9代,电镜下可观察到近似球形、直径约为80 nm,并具有囊膜和纤突结构的病毒粒子,将其命名为HLJE2020株。序列分析结果显示,其全基因组序列中的gag和pol基因相对保守,LTR和env基因与ALV-E同属一个进化分支,而gp85基因则与ALV-E和ALV-B均具有较高相似性,遗传进化分析显示在ALV-E和ALV-B间出现一个单独的分支,结合RDPv.4和SimPlot软件分析结果,推测该毒株gp85基因可能存在E亚群AF229株与B亚群SDAU09C1株的重组现象。本研究为了解禽白血病病毒基因组遗传演化情况提供数据资料,并为ALV的防控提供参考和依据。
- 王萌张森豪张柳李佳璇王晓娜崔文崔文周晗姜艳平乔薪瑗周晗唐丽杰
- 关键词：禽白血病病毒基因组分析
- 表达大肠杆菌LTAK63与LTB蛋白重组干酪乳杆菌系统的构建及其黏膜佐剂活性的评价
- 目的:采用LTAK63和LTB作为研究对象,构建共表达、融合表达的重组干酪乳杆菌,以探索新型肠道黏膜免疫佐剂为出发点,为进一步增强乳酸杆菌活疫苗载体的免疫效果提供材料.方法:设计引物,从ETEC菌株基因组中扩增LTA成熟...
- 陈朝阳葛俊伟姜艳平崔文李海滨李一经
- 关键词：亚单位单克隆抗体黏膜佐剂
- 一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物
- 本发明涉及一种作为断乳仔猪饲料添加剂的表达乳铁蛋白重组乳酸菌组合物，其特征在于，所述组合物将戊糖乳杆菌（Lactobacillus pentosus KLDS1.0413）和植物乳杆菌（Lactobacillus pla...
- 唐丽杰李一经乔薪瑗姜艳平崔文于慧刘敏
- 文献传递
- 表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌中饲喂小鼠的生物学活性分析
- 引言乳铁蛋白肽(LFcin)是乳铁蛋白经胃蛋白酶水解后释放的一种天然抗菌肽,具备抗菌、抗病毒、抑制肿瘤和增强免疫等多项生物学活性。屎肠球菌(Enterococcus faecium,E.faecium)属于人和动物胃肠道...
- 何佳王丽刘敏乔薪瑗崔文姜艳平李一经唐丽杰
- 文献传递
- 一种检测牛细小病毒的信号增强型胶体金免疫层析试纸条及其应用
- 本发明公开了一种检测牛细小病毒的信号增强型胶体金免疫层析试纸条及其应用。所述的试纸条按照连接顺序依次包括样品垫，胶体金垫，硝酸纤维素膜，吸水垫及位于下方的作为组装平台使用的PVC底板，所述的胶体金垫上吸附有胶体金和辣根过...
- 乔薪瑗于晓丽单智夫王丽周晗李佳璇王晓娜姜艳平崔文唐丽杰李一经
- 文献传递
- 基于重组IBDV VP3蛋白的免疫磁珠间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2019年
- 本研究旨在毕赤酵母中表达鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的VP3蛋白,以重组VP3蛋白作为包被抗原建立IBDV血清抗体免疫磁珠间接ELISA检测方法并进行初步应用。利用毕赤酵母表达系统获得约为39 ku的重组VP3蛋白,Western-blotting检测表明,重组VP3蛋白具有良好的特异性和反应原性。免疫磁珠间接ELISA的最佳反应条件:磁珠和抗原偶联的缓冲液是50 mmol/L MES(p H 8.0),偶联时间为3 h,抗原加入量为95μg,抗原与羧基磁珠最大偶联量为80μg。待检血清和酶标二抗的稀释度分别为1∶1 600和1∶4 000,血清孵育时间为30 min,酶标二抗孵育时间为20 min。在该优化条件下,阴性、阳性临界值判定标准为0.134。特异性试验显示,对抗AIV、IBV、MDV、NDV阳性血清检测结果均为阴性。敏感性试验显示,本试验所建立的检测方法敏感性高于商品化IBDV血清抗体检测试剂盒。重复性试验显示,批内和批间重复试验的最大变异系数分别为3.8%和5.9%。稳定性试验结果显示变异系数小于7%。用建立的检测方法和商品化IBDV血清抗体检测试剂盒同时检测50份血清,结果显示两种检测方法的相对敏感性为94.6%,相对特异性为92.3%,符合率为94.0%。本试验建立的检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好、稳定性高特点,为其应用于临床IBDV血清抗体的检测奠定了基础。
- 龚如月于淑媛王书博姜艳平崔文崔文王丽乔薪瑗徐义刚王丽唐丽杰
- 关键词：IBDVVP3蛋白毕赤酵母表达系统
- 组成型融合表达鸡致病性大肠杆菌fimA与ompC蛋白重组乳酸杆菌的构建及其在鸡肠道定殖特性的研究
- 禽大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏菌(APEC)感染引起的多种临床病型总称,主要表现有胚胎和幼雏的死亡、败血症、气囊炎、心包炎、输卵管炎、肠炎、腹膜炎和大肠杆菌性肉芽肿等.由于致病性大肠埃希氏菌血清型众多,抗原结构复杂,给...
- 韩乐濛姜艳平崔文王丽周晗乔薪瑗徐义刚唐丽杰李一经
- 关键词：禽致病性大肠杆菌
- 检测牛轮状病毒抗体的双抗原夹心ELISA方法的建立被引量：2
- 2022年
- 为建立一种检测牛轮状病毒(BRV)抗体的双抗原夹心ELISA方法,本试验根据NCBI公布的BRV参考毒株NCDV序列,设计针对牛轮状病毒VP6基因的引物,用载体pCold-TF表达VP6蛋白,将表达的VP6蛋白作为捕获抗原,HRP标记的VP6蛋白作为检测抗原,建立检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法。特异性试验表明该方法特异性良好;敏感性试验显示,该方法可检测到血清最大稀释倍数为1∶1600;重复性试验表明,批间变异系数在4.21%~7.24%之间,批内变异系数为在1.35%~3.52%之间,重复性良好;临床样品检测表明与微球间接凝集方法检测结果符合率为94.4%。结果表明,建立的检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法适用于临床样本的检测,可为牛轮状病毒的快速诊断提供技术支持。
- 吴畏耿旭陈铭泽秦松跃李佳璇姜艳平崔文王丽王晓娜周晗唐丽杰李一经乔薪瑗
- 关键词：牛轮状病毒
