姜安丽
- 作品数：40 被引量：91H指数：5
- 供职机构：山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MicroRNA let-7与肺癌关系的研究进展被引量：6
- 2009年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性、非编码的单链小分子RNA,作用广泛,参与生命活动中的一系列重要进程,并与肿瘤的发生、发展密切相关。miRNA let-7是最早发现的miRNA之一,是线虫时序性发育的关键性调控因子;在哺乳动物中调节多种细胞增殖,且在细胞周期调节中起关键作用。let-7与人类多种癌症的发生、发展有关,其中与肺癌的关系最为密切;hsa-let-7在肺癌中表达显著降低,在非小细胞肺癌(NSCLC)中尤为多见,其低表达可能与肿瘤预后不良有关,而高表达则直接抑制肺癌生长;let-7作为肿瘤抑制因子负性调控多种癌基因,如RAS、高迁移率蛋白A2基因(high mobility group proteinA2,HMGA2)等;同时也负性调控多种细胞周期调节因子,如CDC25A、CDK6、Cyclin D2。let-7在肺癌组织中起到了肿瘤抑制因子的作用,有望成为肺癌基因治疗和预后判断的一个新靶标。
- 任为正叶鸿飞赵健姜安丽
- 关键词：MICRORNALET-7肺肿瘤RAS
- miRNA let-7a1真核表达载体的构建及对肺癌细胞增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:构建miRNA let-7a1真核表达载体,研究其在肺癌A549细胞株的表达及对A549细胞增殖的影响。方法:以人肺癌细胞A549的总RNA为模板,RT-PCR扩增miRNApre-let-7a1基因序列,将miRNApre-let-7a1基因克隆到真核表达载体pSilencerTM4.1-CMVneo中,构建成pSilencerTM4.1-let-7a1重组体。将pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体瞬时转染肺癌A549细胞,RT-PCR法检测miRNAlet-7a1在转录水平的表达。根据miRBaseTargets数据库,查hsa-let-7a1靶序列,构建let-7a1靶序列-报道基因融合质粒pMIR-report-let-7a1T,与pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体共转染A549细胞,通过荧光素酶活性检测pSilencerTM4.1-let-7a1质粒对其靶序列的作用。MTT法检测pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,对细胞增殖的影响。结果:pSilencerTM4.1-let-7a1真核表达栽体和let-7a1靶序列-报道基因融合质粒经酶切及测序鉴定正确。pSilen-cerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,经RT-PCR证明能有效表达miRNAlet-7a1。pSilencerTM4.1-let-7a1质粒和pMIR-report-let-7a1T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测,相对荧光素酶活性明显降低,表明pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,可表达let-7a1并具有生物学活性。MTT检测结果显示:pSilencerTM4.1-let-7a1转染后的A549活细胞数目明显减少。结论:成功构建了真核表达载体pSilencerTM4.1-let-7a1,转染肺腺癌A549细胞后能有效表达,miRNAlet-7a1基因过表达抑制A549细胞的增殖。
- 张菊关恒云张鹏举陈蔚文刘闻闻赵健胡晓燕姜安丽
- 关键词：MIRNA真核表达载体A549细胞细胞增殖
- 雄激素应答元件假冒DNA对PSA基因启动子的抑制作用被引量：2
- 2003年
- 研究雄激素应答元件假冒DNA(AREdecoy)对前列腺特异抗原 (PSA)基因启动子的抑制作用 .联合运用报告基因和假冒DNA策略 ,构建了含PSA基因 5′侧启动子区 6 40bpDNA的萤光素酶表达载体pGL3 PSA ,与人工合成的双链硫代ARE假冒DNA共转染前列腺癌细胞株PC3 M并作用不同的时间 (2 4h、4 8h、72h) .应用双萤光素酶测定系统 ,检测萤光素酶的表达活性 .结果显示 :AREdecoyDNA显著抑制报告基因萤光素酶的表达 ,抑制率可达 95 % ,而对照decoyDNA无此作用 .
- 张鹏举张建业陈蔚文姜安丽张莲英郭强
- 关键词：启动子转录因子报告基因
- LDL-ACM复合物对裸鼠皮下移植瘤靶向抑制作用的初步研究被引量：2
- 2003年
- 目的 :通过观察比较LDL -ACM复合物和游离ACM对胃癌SGC - 790 1 ,NKM - 4 5细胞株裸鼠皮下移植的抑制效应 ,从而了解LDL作为抗癌药物靶向载体的应用价值。方法 :首先采用温育交换法制备LDL -ACM复合物 ,然后建立人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤模型 ,以瘤重、肿瘤体积、白细胞计数、抑瘤率、生命延长率等指标观察LDL -ACM对移植瘤的抑制作用。结果 :LDL -ACM组的移植瘤生长速度明显慢于生理盐水组及游离ACM组 ,抑瘤率和生命延长率明显高于生理盐水组及游离ACM组 ,外周白细胞计数无明显变化 ,尤其对SGC - 790 1瘤更为明显。结论 :LDL -ACM复合物与游离ACM相比有更强的抑癌效应。LDL
- 姜安丽康鲁东赵春华毕文祥胡晓燕孔峰徐松德
- 关键词：皮下移植瘤脂蛋白类胃肿瘤细胞株
- 人同源盒基因NKX3·1对前列腺癌细胞的诱导凋亡作用被引量：7
- 2006年
- 构建人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达及对细胞的促凋亡作用.以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3·1基因全长编码片段,将NKX3·1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3·1(+)中;将pcDNA3·1-NKX3·1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP细胞,用RT-PCR和Western印迹检测NKX3·1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达;绘制细胞生长曲线,观察NKX3·1对前列腺癌细胞增殖的抑制作用;用DNA/ladder和流式细胞术检测NKX3·1对前列腺癌细胞凋亡的影响,进一步用RT-PCR检测凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9、Apaf1、survivin和Bcl2表达的变化.人同源盒基因NKX3·1cDNA真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1经酶切及测序鉴定正确.pcDNA3·1-NKX3·1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和Western印迹证明能有效表达NKX3·1.生长曲线显示,前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA后细胞增殖受到抑制;前列腺癌细胞转染NKX3·1cDNA48h后,DNA电泳呈现具有凋亡特征的DNAladder;流式细胞术检测出现明显凋亡峰;RT-PCR检测凋亡相关基因.结果显示,caspase3、caspase8、caspase9基因表达明显增加,Bcl2基因表达明显减少.本研究成功构建了真核表达载体pcDNA3·1-NKX3·1,转染PC-3和LNCaP细胞后能有效表达,并对细胞具有诱导凋亡作用.
- 刘闻闻于春晓崔福爱张鹏举陈蔚文胡晓燕姜安丽张建业
- 关键词：真核表达载体前列腺癌细胞细胞凋亡
- 人NKX3.1基因启动子的克隆及在不同肿瘤细胞系中启动子活性的测定(英文)
- 2006年
- 目的:克隆NKX3.1基因启动子并检测其启动子活性,为研究NKX3.1基因转录调控的基本机制奠定基础。方法:采用PCR方法从人基因组中扩增NKX3.1基因上游1.04 kb启动子片段并分别克隆到报道基因载体pGL3-basic和pEGFP-1中,通过转染细胞、荧光素酶活性测定及荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,检测其启动子活性。结果:DNA测序结果证实克隆的1.04 kb启动子片段序列正确;pGL3-1.04 kb启动子转染LNCaP细胞后,双荧光素酶活性测定M1/M2=2.7,为pGL3-control活性的1.5倍,为pGL3-basic活性的50倍。表明克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性。为检测此1.04 kb启动子在不同组织细胞中的活性,分别将pGL3-1.04 kb启动子和pEGFP-1.04 kb启动子转染入不同的肿瘤细胞系,检测荧光素酶和绿色荧光蛋白的表达。结果显示1.04 kb启动子在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。采用TRANSFAC数据库分析,发现在1 040 bp片段内含有多种顺式作用元件,它们的功能性将需要进一步实验证明。结论:克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性,并且在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高。
- 姜安丽张鹏举胡晓燕陈蔚文贺美兰孔峰张建业
- 关键词：启动子细胞系
- 作为抗肿瘤药物靶向载体LDE的可行性研究
- 2001年
- 目的 :观察LDE ACM复合物对裸鼠胃癌SGC 790 1、NKM 45细胞株皮下移植肿瘤的抑制作用 ,了解LDE作为抗肿瘤药物靶向载体的可行性。方法 :采用密度梯度离心和SephadexG 5 0层析以及超声法制备LDE和LDE ACM复合物 ,建立裸鼠胃癌皮下移植肿瘤模型 ,观察LDE ACM对移植肿瘤的抑制作用。结果 :LDE ACM复合物可明显抑制裸鼠皮下移植瘤的生长 ,与其他实验对照组比较 ,LDE ACM组的瘤重明显减轻 ,抑瘤率明显增高 ,而外周白细胞计数无明显降低。结论 :LDE ACM复合物有较强的抑制肿瘤效应且副作用明显减轻 ;LDE作为抗肿瘤药物靶向载体是可行的。
- 沈恩允康鲁东姜安丽赵春华毕文祥李静徐松德
- 关键词：SGC-7901细胞抗肿瘤药
- N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ和Ⅴ必需基团的研究(英文)
- 2000年
- 目的 研究化学修饰剂对N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ和Ⅴ活性的影响以探讨这两种酶的必需基团。方法 采用七种化学修饰剂分别修饰N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ和Ⅴ中的一些基团 ,用高效液相法测定酶的活性。结果 巯基、羧基、吲哚基和胍基被修饰后 ,N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ活性丧失 ,而氨基、羧基和吲哚基被修饰后 ,N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ活性丧失。结论 结果表明羧基、吲哚基和胍基是N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ的必需基团 ;氨基、羧基和吲哚基是N 乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ的必需基团。根据结果可推测羧基、吲哚基可能与酶的底物结合部位有关 ,而胍基、氨基分别是N
- 姜安丽安蔚王泽平马培珍
- 关键词：N-乙酰氨基葡萄糖转移酶化学修饰
- 血管内皮生长因子水平在诊断食管癌和胃癌中的临床价值被引量：1
- 2004年
- 目的:探讨人血清血管内皮生长因子穴VEGF雪诊断食道肿瘤和胃肿瘤的临床价值。方法:采用酶联免疫检测法(ELISA)定量检测37例食管癌、31例胃癌及15例正常对照者血清中VEGF的含量。结果:两种恶性肿瘤患者血清VEGF水平均显著高于正常对照组(P<0.01)并与临床病理特征,如浸润深度、淋巴结转移、TNM分期等密切相关。结论:血清VEGF水平在食管癌、胃癌的浸润和转移中起重要作用熏可作为食管癌、胃癌进展和评估预后的血清学指标。
- 康鲁东吴伟芳马宪军胡晓燕于清水姜安丽
- 关键词：内皮血管生长因子食管肿瘤胃肿瘤
- 神经营养肽NP14基因的合成及其在大肠杆菌中的高表达
- 2007年
- 目的:根据鞘脂激活蛋白原神经营养序列设计并构建短肽(neurotrophic peptide,NP)多拷贝串连表达载体,利用基因工程的方法制备短肽NP。方法:根据大肠杆菌的偏爱密码子设计并合成NP的碱基片段,通过PCR方法合成串联双拷贝2NP片段,经平端连接克隆到载体pUC18中。利用EcoT14I酶切pUC18-2NP后可产生非镜相对称黏性末端,与表达载体pETEcoT一次连接反应,得到一系列含有不同片段拷贝数的表达载体pETE-coT-multiNP,经PCR-array方法进行阳性克隆筛选、测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行原核表达。结果:经IPTG诱导后,在BL21(DE3)菌中高效表达了2、4、8拷贝融合蛋白,并在每个单拷贝之间加入了溴化氢的切割位点,使融合蛋白切割后能够得到单拷贝的短肽。结论:短肽NP在大肠杆菌中获得高效表达,为进一步研究其生物活性奠定了基础。
- 张之勇苑辉卿姜安丽蔡捷任凯胡晓燕孔峰张建业
- 关键词：融合蛋白质类原核表达
