姚志刚
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
- 供职机构：河北医科大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目河北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 杂色曲霉素诱导胃黏膜上皮细胞细胞周期G_2期阻滞被引量：3
- 2009年
- 探讨杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对体外培养的永生化胃黏膜上皮细胞GES-1细胞周期的影响及细胞周期蛋白D1、真核起始因子eIF4E和其结合蛋白4E-BP1在ST诱导细胞周期变化中的可能作用。采用细胞培养、噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞定量检测(FCM)、吉姆萨(Giemsa)染色、蛋白质免疫印迹(Western印迹)以及反转录聚合酶联反应(RT-PCR)等方法,研究不同浓度(100、500、1000、2000μg/L)ST处理24h后,GES-1细胞的增殖、细胞周期分布及eIF4E、4E-BP1及细胞周期蛋白D1表达的变化情况。MTT法检测结果显示,ST可明显抑制GES-1细胞的增殖,ST100、500、1000、2000μg/L处理组的增殖抑制率分别为12.76%、16.35%、21.65%和32.06%。FCM检测结果显示,给予500、1000和2000μg/LST处理24h可剂量依赖性提高G2/M期细胞比例。吉姆萨染色结果表明,在0～2000μg/L的剂量范围内随ST剂量增高,细胞分裂指数逐渐降低,提示ST可诱导胃黏膜上皮细胞周期发生G2期阻滞。Western印迹分析结果显示,在0～2000μg/L浓度范围内,ST可剂量依赖性地上调eIF4E和4E-BP1在蛋白质水平上的表达(eIF4E:r=0.844,P<0.01;4E-BP1:r=0.930,P<0.01),而降低eIF4E和4E-BP1的磷酸化水平(peIF4E:r=-0.663,P<0.01;p4E-BP1:r=-0.656,P<0.01);同时使细胞周期蛋白D1的表达下降(r=-0.559,P<0.05)。RT-PCR检测在mRNA水平进一步证实了ST对eIF4E和4E-BP1表达的影响。研究结果表明,ST可抑制体外培养永生化胃黏膜上皮细胞增殖,诱导细胞发生G2期阻滞,4E-BP1表达升高,而eIF4E和4E-BP1的磷酸化水平降低及细胞周期蛋白D1表达下降可能是ST抑制胃黏膜上皮细胞增殖,诱导周期分布变化的重要机制。
- 邢欣邢凌霄李月红王娟姚志刚王俊灵刘亚玲张祥宏
- 关键词：杂色曲霉素EIF4E细胞周期蛋白D1
- 颅内动脉瘤破裂伴颅内血肿的诊断与显微手术治疗被引量：1
- 2013年
- 目的探讨颅内动脉瘤破裂伴发颅内血肿的诊断和显微手术治疗效果。方法回顾性分析13例颅内动脉瘤破裂伴发颅内血肿患者的临床资料。术前5例患者进行了DSA检查,3例患者进行了CT血管造影检查,5例进行了头部CT检查(4例经术中证实为动脉瘤,1例术后经DSA证实为动脉瘤)。其中大脑中动脉动脉瘤5例,前交通动脉动脉瘤4例,后交通动脉动脉瘤3例,骈周动脉动脉瘤1例。结果 13例患者中有12例行开颅动脉瘤夹闭及血肿清除术;1例仅行血肿清除术,术后行血管内栓塞治疗。所有患者术后随访3个月,根据GOS分级,Ⅰ级3例,Ⅱ级4例,Ⅲ级3例,Ⅳ级1例,Ⅴ级2例。结论颅内动脉瘤破裂伴颅内血肿需尽早行DSA或CT血管造影检查明确诊断;治疗方式应首选开颅动脉瘤夹闭+血肿清除术。
- 姚志刚刘宏雷郝亮武海龙冯岩郑中慧孙晓立
- 关键词：破裂颅内动脉瘤颅内血肿显微手术
- 脑胶质瘤中细胞凋亡及相关基因Fas、bcl-2和survivin表达的研究
- 目的:该文通过检测胶质瘤中细胞凋亡、增殖活性及其凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2和survivin的表达,进一步探讨肿瘤细胞凋亡在胶质瘤发生、发展及其恶性转化过程中所起的作用.试图找到更多与肿瘤发生、发展和预后...
- 姚志刚
- 关键词：胶质瘤细胞凋亡SURVIVIN
- 文献传递
- 杂色曲霉素对小鼠胸腺和脾脏转录因子Foxp3^+调节性T淋巴细胞的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨杂色曲霉素(ST)对机体免疫调节功能的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、ST3,30,300和3000μg·kg-1组。小鼠ip给药24h后,处死取胸腺和脾脏,采用流式细胞术测定胸腺和脾脏细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞及转录因子Foxp3阳性(Foxp3+)调节性T淋巴细胞的百分率,免疫组织化学法检测胸腺和脾脏组织中Foxp3+调节性T淋巴细胞数量,Western蛋白印迹法和RT-PCR分别测定胸腺和脾脏组织中Foxp3蛋白和mRNA的表达。结果溶剂对照组与正常对照组比较,小鼠胸腺和脾脏CD4+,CD8+和Foxp3+T淋巴细胞百分率均无明显差异。与溶剂对照组比较,ST3μg·kg-1组胸腺CD8+T淋巴细胞百分率降低,ST3和30μg·kg-1组脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率明显升高,ST300和3000μg·kg-1组胸腺和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率无明显变化。在ST3～3000μg·kg-1内,胸腺和脾脏细胞中Foxp3+调节性T淋巴细胞百分率、胸腺和脾脏组织内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量、Foxp3蛋白和mRNA表达均随ST浓度的增高而增加。结论ST可诱导小鼠淋巴器官内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量增加,从而影响机体免疫耐受功能。
- 刘亚玲邢欣邢凌霄姚志刚王娟严霞王俊灵张祥宏
- 关键词：杂色曲霉素胸腺脾脏
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇抑制人食管上皮细胞HLA-Ⅰ分子蛋白表达被引量：1
- 2011年
- 目的探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对人正常食管上皮细胞(human leukocyteantigen-Ⅰ,HLA-Ⅰ)表达的影响。方法采用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)、免疫细胞化学染色(immunohistochemistry,IHC)以及反转录聚合酶链反应(reversetranscliption-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,从蛋白水平和mRNA水平上分析不同浓度DON处理24h后,体外培养的人正常食管上皮细胞HLA-Ⅰ表达的变化及剂量-效应关系。结果 IHC检测结果,不同浓度(50、100、1 000、2 000μg/L)DON处理24 h后,各处理组HLA-Ⅰ蛋白阳性细胞百分数均低于空白对照组,其中100、1000和2 000μg/L处理组差异有统计学意义(P<0.05);相关分析表明在0～2 000μg/L范围内,DON浓度与HLA-Ⅰ蛋白阳性细胞百分数之间存在明显的剂量-效应关系(r=-0.756,P<0.05)。FCM检测结果表明,DON在0～2 000μg/L范围内,随着浓度增加食管上皮细胞HLA-Ⅰ蛋白表达的荧光指数逐渐降低,两者之间存在明显的剂量-效应关系(r=-0.634,P<0.05)。RT-PCR结果显示,各处理组HLA-a mRNA的表达量与空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DON可剂量依赖地抑制体外培养的人正常食管上皮细胞HLA-Ⅰ蛋白的表达,但是对于mRNA表达无明显影响。
- 孙巍李月红严霞王娟王俊灵姚志刚
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇上皮细胞HLA抗原
- 成人食管上皮细胞的原代培养方法被引量：3
- 2009年
- 探讨一种简便实用、成本低、纯度高并且成熟稳定的成人食管上皮原代培养的方法。成人食管上皮细胞来源于食管癌患者手术切除食管的正常黏膜上皮。采用组织块法,分别在DMEM/F12混合培养基和1640培养基中培养成人正常食管上皮细胞。通过直接观察、细胞形态学观察和免疫细胞化学方法观察细胞的生长情况、细胞形态学特征及鉴定所得到的细胞。结果表明,与1640培养基相比,应用DMEM/F12混合培养基具有明显的优越性。正常食管上皮细胞在DMEM/F12混合培养基中生长较好,细胞融合快,成纤维细胞污染少,可以生长成为典型的"铺路石"样,可连续培养21天,组织块最多可以被迁移4次,且细胞生长状态良好。免疫细胞化学染色鉴定证实95%的细胞具有广谱细胞角蛋白,即确定是食管上皮来源的细胞。本研究应用改良的组织块法培养的正常食管上皮细胞纯度高、产量较大,可以满足正常食管上皮细胞恶性转化方面的研究工作,而且方法简便易行、成熟稳定,是一种适合推广应用的正常食管上皮细胞培养方法。
- 孙巍李月红张祥宏严霞曹富民王俊灵王娟姚志刚
- 关键词：食管上皮细胞细胞培养
- 天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究被引量：15
- 2009年
- 目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物。方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Giemsa染色法观察TCS作用后细胞形态学的变化,FCM检测不同浓度TCS作用48h后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期分布情况,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测MDA-MB-231细胞经TCS作用前后syk基因甲基化状态的改变,RT-PCR方法分析TCS作用后MDA-MB-231细胞中syk、Dnmts和MBD2 mRNA表达量的变化,比色法检测TCS对MDA-MB-231细胞DNA甲基转移酶活性的影响。结果:TCS体外对MDA-MB-231细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性;TCS可诱导MDA-MB-231细胞出现空泡样变性、核固缩和核碎裂等细胞凋亡形态学改变,能使MDA-MB-231细胞凋亡并可诱导细胞生长周期阻滞,凋亡率明显高于对照组(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性。TCS可以逆转MDA-MB-231细胞syk基因启动子区甲基化状况;MDA-MB-231细胞syk mRNA表达阴性,经TCS作用后,syk mRNA表达阳性;MDA-MB-231细胞经TCS作用48h前后Dnmts和MBD2 mRNA表达量没有明显变化(P>0.05),但Dnmts活性降低。结论:TCS在抑制MDA-MB-231细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中对syk基因具有明显的去甲基化作用,因而可能成为新型的去甲基化药物。
- 华芳单保恩赵连梅姚志刚彭华
- 关键词：天花粉蛋白蛋白质酪氨酸激酶
- 枕部头皮巨大血管畸形1例报告
- 2015年
- 患者男,43岁。因＂发现枕部肿物进行性增大20 a,肿物破溃出血1 d＂于2013年6月16日入院。患者枕部肿物发现时呈黄豆大小,位于皮下,质软,曾在当地县医院手术切除,当时出血较多。之后肿物又出现并逐年增大,经过10 a,再次手术,出血汹涌,肿物未能全切。本次入院前2 a枕部肿物破裂出血,行右枕动脉介入栓塞治疗.
- 姚志刚郝亮冯岩刘宏雷武海龙孙晓立
- 关键词：枕部介入栓塞枕动脉供血动脉动静脉畸形毛细血管瘤
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人食管上皮细胞TAP-1和LMP-2表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的：探讨不同浓度脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）处理,体外原代培养的人正常食管上皮细胞TAP-1、LMP-2表达的变化。方法：采用Western blot和RT-PCR技术从蛋白水平和mRNA水平上分析不同浓度的DON处理24小时,体外培养的人正常食管上皮细胞TAP-1、LMP-2分子表达的变化规律及其量-效关系。结果：不同浓度（50、100、1 000、2 000μg/L）DON处理人食管上皮细胞24小时后,DON各处理组食管上皮细胞TAP-1蛋白的Western blot半定量检测结果分别为0.47±0.22、0.28±0.16、0.24±0.18和0.21±0.19,统计分析表明DON 100、1 000、2 000μg/L处理组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。相关分析表明,在0~2000μg/L浓度范围内,随DON处理浓度增高,食管上皮细胞TAP-1蛋白的表达量逐渐降低（r=-0.595,n=4,P〈0.01）。RT-PCR结果发现,经不同浓度DON处理食管上皮细胞TAP-1mRNA的相对表达量虽然呈现先升高后降低的趋势,但与对照组相比无统计学差异。DON各处理组LMP-2蛋白的Western blot半定量检测结果分别为2.25±1.03、3.31±1.35、1.90±1.19和2.12±0.22均高于空白对照组（0.91±0.21）,其中100μg/L处理组相对表达量最高,差异有统计学意义（P〈0.05）。RT-PCR结果,DON 100μg/L处理组的LMP-2 mRNA的相对表达量最高为2.23±0.56,明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。其余处理组差异无统计学意义。结论：DON可剂量依赖地抑制体外培养的人正常食管上皮细胞的TAP-1蛋白的表达,但对TAP-1的mRNA未见显著影响。DON（100μg/L）可以促进食管上皮细胞LMP-2蛋白和mRNA表达,其余各浓度未见明显影响。
- 李月红孙巍严霞王娟王俊灵姚志刚张祥宏
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇
- 伏马菌素对GES-1细胞HLA-Ⅰ类分子及其抗原加工转运相关分子LMP2、TAP1影响的实验研究
- 目的：人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-Ⅰ类分子分布于所有有核细胞表面，由一条α重链（被糖基化的）和一条β2-微球蛋白（β2m）轻链非共价结合而成。HLA-Ⅰ类分子可与内源性抗原（...
- 姚志刚
- 关键词：伏马菌素LMP2TAP1细胞免疫化学
- 文献传递
