唐漫书
- 作品数：13 被引量：56H指数：5
- 供职机构：四川大学生命科学学院草原生物防治工程国家专业实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答被引量：3
- 2002年
- 将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 。
- 孟民杰高荣沈斌魏竹波唐漫书沈翼王克非刘世贵
- 关键词：囊虫病抗原基因免疫应答DNA疫苗小鼠
- 猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究被引量：2
- 2003年
- 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。
- 沈翼高荣沈斌武梅孟民杰唐漫书李江凌郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：猪囊尾蚴抗原基因真核表达人畜共患病
- 猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究被引量：11
- 2002年
- 用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0
- 唐漫书高荣孟民杰武梅李江凌龙章富沈翼沈斌刘世贵
- 关键词：原核表达DNA重组基因表达融合蛋白
- 成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2002年
- 将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读框为 40 2bp ,编码 13 4个氨基酸 ,分子量 15 .0ku ,等电点 8.2 4;与人和小鼠的IL 4基因编码的氨基酸序列的同源性分别为 60 %和 42 %。
- 武梅高荣李江凌龙章富唐漫书刘昆郑勇沈翼谢鸿观王丽焕巫雪艳刘世贵
- 关键词：成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因克隆
- CpG序列和猪白细胞介素6基因转染表达对猪囊尾蚴基因疫苗免疫影响的研究被引量：9
- 2002年
- 以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免疫细胞数量显著高于VTS76免疫组和对照组。证明VPIL 6和CpG序列能显著增强动物对DNA疫苗的细胞和体液免疫反应 。
- 李江凌高荣武梅孟明杰龙章富唐漫书沈翼谢鸿观王丽焕巫雪艳殷雪刘世贵
- 关键词：免疫免疫应答CPG序列猪囊尾蚴抗原基因免疫增强剂
- 成华猪γ-干扰素基因分子克隆与序列分析被引量：11
- 2003年
- 为研究猪γ-干扰素在抗御传染性疾病和肿瘤生物治疗中的免疫增强作用,本实验以ConA刺激成华猪外周血淋巴细胞提取激活淋细胞的mRNA,设计合成特异的引物序列,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增和克隆成华猪IFN-γ基因并进行序列测定。成华猪IFN-γcDNA约长500bp,从第68位核苷酸开始编码其信号肽,到569位核苷酸为终止子。IFN-γ基因的开放框架(ORF)由498bp构成,编码166个氨基酸。成华猪IFN-γ与猪IFN-γ基因核苷酸间同源性为98％,在261-269存在点突变,在氨基酸水平完全一致。IFN-γ氨基酸与鼠同源性为30％,与人同源性为40％。
- 李江凌高荣武梅孟民杰唐漫书沈翼王丽焕刘世贵
- 关键词：成华猪分子克隆生物治疗
- 猪囊虫抗原基因TS21的真核表达被引量：2
- 2002年
- 构建了猪囊虫抗原基因TS2 1的VR10 2 0真核表达载体 ,以菌落原位杂交法筛选获得正确插入的重组质粒 ,用RNA印迹 (Northernblotting)和ELISA检测插入片段的转录及其翻译表达产物。结果 ,VTS2 1在真核细胞中能够转录TS2 1基因的mRNA ;兔抗猪囊虫超免疫血清可识别其蛋白表达产物 ,表明VTS2
- 谢鸿观高荣沈斌孟民杰唐漫书沈翼王丽焕刘昆郑勇武梅李江凌刘世贵
- 关键词：猪囊虫真核表达
- 猪囊虫TS21抗原DNA接种小鼠的免疫应答被引量：1
- 2003年
- 将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的诱生活性 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 ,VTS2 1免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠 ;免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强 ,表明VTS2 1具有很强的免疫激活作用 。
- 巫雪艳高荣沈斌孟民杰沈翼李江凌武梅唐漫书郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：小鼠免疫应答MTT比色法猪带绦虫囊虫
- 酶联免疫技术检测玉米弯孢菌叶斑病的研究被引量：4
- 2002年
- 本文通过提取玉米弯孢菌叶斑病病原菌蛋白质 ,免疫家兔制备抗血清 ,用不等弯孢菌、玉米小斑病菌、玉米圆斑病菌和玉米大斑病菌 (与弯孢菌相似或相近 )蛋白吸附除去抗血清中的交叉反应抗体 ,提高了抗体的特异性。建立了酶联免疫检测玉米弯孢菌叶斑病的技术 ,应用ABC -ELISA和间接ELISA检测玉米弯孢菌叶斑病 ,比较了两种方法的灵敏性和特异性。结果显示ABC -ELISA较间接ELISA检测灵敏度高 2到 5倍。
- 王丽焕宁红沈翼唐漫书高荣刘世贵
- 关键词：玉米弯孢菌叶斑病
- 猪白细胞介素-6基因的原核表达及免疫检测研究
- 该文用DNA重组技术将已克隆的猪IL-6 cDNA片断插入pGEX-1λT质粒,构建了猪IL-6基因的原核表达质粒pGPIL-6,转化大肠杆菌,以BamHⅠ酶切筛选、PstⅠ酶切鉴定转化子,获得了含740bp插入克隆基因...
- 唐漫书
- 关键词：原核表达SDS-PAGE免疫PCRELISA
- 文献传递
