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慢病毒介导的MyoD,Mef2c和Myf6诱导猪骨髓间充质干细胞(pMSC)向成肌样细胞分化的研究: 2012年; 慢病毒是一种以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的逆转录病毒,能够在细胞中长期稳定的表达或者沉默特定的基因,是一种高效的基因治疗载体。慢病毒源于反转录病毒,但在感染能力方面比反转录病毒强,对神经元细胞、肝细胞、干细胞、肿瘤细胞、心肌细胞等多种传统方法难以转染的细胞均有较强的感染能力,因此具有广阔的应用前景。同时。; 宋奇纪元王罡琦周焱逄大欣唐小春; 关键词：反转录病毒肌样细胞慢病毒感染基因治疗载体

用Solexa测序技术分析和鉴定猪胚胎microRNA的研究: microRNA（miRNA）是一类大小21-23个碱基的单链小分子RNA，由具有发夹结构约70-90个碱基的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，其家族能够通过与靶mRNA的3′端非翻译区（UTR）完全或不完全配对...; 周焱; 关键词：胚胎发育 MICRORNA; 文献传递

MyoD、Myf6和Mef2c慢病毒过表达载体构建及诱导猪MSC成肌向分化的研究被引量：2: 2012年; 骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是重要的成体干细胞,具有多向分化的能力,其成肌分化能力在医学上有广泛的应用,可用于多种疾病的治疗。成肌决定因子(MyoD)和成肌调节因子6(Myf6)同属生肌决定因子基因家族,控制着肌细胞的增殖分化,肌细胞增强因子(Mef2c)是一个具有重要功能的转录因子,可以作为心肌分化过程中的特异性标志。本试验通过构建猪MyoD、Myf6和Mef2c慢病毒表达载体,并在体外感染猪间充质干细胞(pMSC),成功在pMSC中过表达MyoD、Myf6和Mef2c三种调节因子,并且诱导MSC表达肌细胞生成素(MyoG)、肌肉特异型肌酸激酶(CKM)等重要的成肌相关因子。本研究为利用慢病毒过表达成肌相关因子诱导MSC细胞向成肌细胞分化奠定基础,为进一步探明MSC向成肌细胞分化的分子机制提供发新思路。; 宋奇纪元高飞武蓉王罡琦周焱唐小春; 关键词：MYOD 慢病毒骨髓间充质干细胞成肌分化

小型猪体细胞克隆试验被引量：1: 2010年; [目的]建立体细胞克隆小型猪的技术平台并了解克隆效率。[方法]运用体细胞核移植技术,以小型猪胎儿成纤维细胞作为核移植供体细胞,以体外成熟卵母细胞作为核移植受体细胞进行体细胞克隆猪生产,并利用STR序列对所出生的克隆猪进行个体识别。[结果]将重构胚胎移植到5头代孕母猪体内,其中一头代孕母猪成功产下2头克隆小型猪。经过个体识别试验证实克隆小型猪来自供核细胞,与代孕母猪无直接亲缘关系。[结论]克隆小型猪的成功出生表明所建立的技术平台适于小型猪的克隆。; 黄永业李小平周焱谢万华段新平谭广云李栋袁婷高飞谢光洪赖良学欧阳红生逄大欣; 关键词：体细胞核移植小型猪克隆猪性别鉴定

绿色荧光小鼠胚胎干细胞的分离与培养: 2010年; 目的:建立绿色荧光小鼠胚胎干细胞系。方法:以ICR及GFP转基因小鼠为实验动物,冲取交配后3.5天小鼠GFP-/+囊胚,去透明带后进行完全培养,以13.5天鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,并对细胞克隆用亚克隆的方法分离扩大培养。结果:获得了边缘清晰,表面平滑,结构致密,隆起生长的鸟巢状克隆,碱性磷酸酶染色呈强阳性,干细胞特异性的多能因子OCT4及Nanog表达呈阳性,且能稳定表达绿色荧光的雄性干细胞系。结论:本文为小鼠ES细胞系的建立提供了一种稳定而可靠的方法。; 谭广云谢万华周焱黄永业宋红肖李栋宋娜袁婷段新平逄大欣欧阳红生; 关键词：EGFP 胚胎干细胞小鼠

使用poly(A)-tailed RT-PCR对猪部分microRNAs在胚胎期的表达进行验证: 2011年; MicroRNAs(miRNAs)是一系列小的非编码的RNA,长度大约为21～22nt。主要通过抑制翻译或者进行mRNA的降解而在多种生理以及发育过程中发挥很重要的作用。miRB ase16.0(2010)数据库中显示,注释的线虫、小鼠、大鼠以及人的miRNAs分别有175种、673种、408种和1048种。而哺乳动物猪的miRNAs仅仅为211种,特别是在胚胎生长发育过程中调节基因表达的miRNAs的研究十分欠缺。因此使用poly(A)-tailed RT-PCR对猪的10种miRNAs的表达在猪胚胎期第33天(E33)进行验证。对于鉴定的这10种miRNAs,通过实时定量PCR对其表达水平进行相对分析,并使用PicTar和TargetScan软件对其靶基因进行预测。结果表明:在头部组织中ssc-miR-9的表达量最高的,而在内脏组织中ssc-miR-1的表达量最高。功能分析表明这些miRNAs可以参与神经、大脑、肌肉、器官的发育。此研究为以后进一步的研究猪以及相关动物胚胎发育的miRNAs的功能提供有用的信息。; 周焱宋齐王欢王海军朱建国逄大新欧阳红生唐小春; 关键词：MICRORNA 胚胎发育 PCR

肌生成抑制素MSTN基因敲除猪的建立: 本发明涉及一种肌生成抑制素MSTN基因敲除猪的建立，其特征在于具体制备方法如下：1、基因打靶载体的构建；2、MSTN基因敲除的猪胎儿成纤维细胞的构建；3、利用体细胞核移植技术构建MSTN基因敲除猪；4、对MSTN基因敲除...; 欧阳红生逄大欣段新平赖良学周杨周焱陈颖李占军欧阳松应赵增明朱建国; 文献传递

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周焱