吴燕斌
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省教育厅资助项目福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 原位肝移植慢性排斥反应大鼠模型的建立及其相关差异蛋白表达的初步研究
- 【目的】建立稳定的原位肝移植慢性排斥反应大鼠模型;利用蛋白组学研究方法和生物信息学技术分析慢排移植肝和正常移植肝之间差异表达蛋白,筛选并验证与慢排反应相关的潜在分子标志物,为肝移植慢排早期预警蛋白及早期诊断的多蛋白分子模...
- 吴燕斌刘景丰
- 转化生长因子-β1基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受被引量：3
- 2012年
- 目的观察转化生长因子-β1（TGF-β1）基因转染未成熟树突状细胞（imDC）对大鼠肝移植免疫耐受的诱导作用。方法利用大鼠骨髓细胞诱导培养imDC，以脂质体介导的pIRES2-EGFP—hTGF—Bl转染imDC，于移植前5d输注受体Lewis大鼠体内，移植后分别于3、7、10d抽血检测肝功能[总胆红素（TBIL）和谷丙转氨酶（ALT）]、酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测白细胞介素-12（IL-12）水平、肝组织苏木素-伊红（HE）染色急性排斥反应病理评分、原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测肝脏淋巴细胞的凋亡及观察各组大鼠肝移植后的生存时间。结果TGF-β1组移植后肝功能（TBIL和ALT）优于各对照组（P〈0．05）；TGF—β1组移植后3、7d血清IL-12浓度分别为71．03±10．70、80．88±14．23均低于各对照组（P〈0．05）；TGF-β1组移植后7d出现交界性排斥反应，移植10d后出现轻度排斥反应（P〈0．05）；TGF-β1基因转染组移植后3、7、10d汇管区淋巴细胞凋亡指数分别为6．75±1．93、14．00±2．19、18．25±1．38，较各对照组均明显增高（P〈0．05）；TGF-β1组大鼠移植后中位生存期为58d，明显长于各对照组。结论TGF—β1基因改造的imDC能诱导大鼠移植免疫耐受，在诱导器官移植耐受中有良好时应用前景。
- 陈丽红吴燕斌邱明链高凌云黄爱民刘景丰
- 关键词：树突状细胞肝移植免疫耐受转化生长因子-Β1基因
- 酵母双杂交法筛选与受翻译调节的肿瘤蛋白相互作用的蛋白
- 2011年
- 目的:采用酵母双杂技术筛选与受翻译调节的肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)相互作用的蛋白,以探讨TCTP的生物学功能。方法:采用PCR法扩增获得TCTP基因,并将其插入酵母双杂交诱饵载体中构建获得pDEST32-TCTP;检测pDEST32-TCTP在酵母菌中的表达和自激活情况,利用酵母双杂交系统筛选出带有靶蛋白基因的阳性克隆并测序鉴定;免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)法验证人肝癌细胞Huh7中TCTP与细胞S期激酶相关蛋白-2(S-phase kinase-associated protein2,Skp2)的相互作用。结果:成功构建获得酵母双杂交诱饵载体pDEST32-TCTP,pDEST32-TCTP在酵母菌中可以表达,且在3-氨基-1,2,4-三唑(3-amino-1,2,4-triazole,3AT)浓度为20mmol/L时无自激活作用。采用酵母双杂交系统共筛选获得6个可与TCTP相互作用蛋白的基因,包括Smad4、人热休克蛋白60(heat shock protein60,HSP60)、TAKl、Bcl-xl、卵泡抑素(follistatin,FS)和Skp2。其中Skp2与TCTP蛋白的相互作用在Co-IP中得到验证。结论:应用酵母双杂交系统可筛选获得一组与TCTP相互作用的蛋白,为进一步研究TCTP的生物学功能提供了可靠的实验依据。
- 张国寿罗顺峰吴燕斌池闽辉刘景丰
- 关键词：肿瘤酵母双杂交免疫共沉淀
- 人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共修饰树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究被引量：5
- 2011年
- 目的联合人凋亡相关因子配体（hFasL）及人转化生长因子-β1（hTGF-β1）基因共修饰大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（imDC），提高imDC诱导大鼠同种异体原位肝移植免疫耐受的能力，以延长受鼠生存期。方法行以DA大鼠为供体、近交系Lewis大鼠为受体的同种异体原位肝移植140例，随机均分为7组：未给移植受鼠注射DC组（对照组）、mDC组、imDC组、空载体组、FasL组、TGF组及共转染组；分别于移植前5d每天给Lewis大鼠腹腔注射mDC、imDC、空载体转染的imDC、hFasL修饰的imDC、hTGF-β1修饰的imDC、hFasL和hTGF-β1共修饰的imDC各2×10^6个，于肝移植术后3、7、10d各处死4只，观察外周血肝功能变化[丙氨酸转氨酶（ALT）和总胆红素（TBIL）]，肝脏病理改变，肝脏凋亡，外周血清细胞因子，并进行生存分析。结果肝脏病理示术后7d，7组差异有统计学意义（P〈0．01），共转染组排斥反应均轻于TGF组和FasL组；10d时，7组差异有统计学意义（P〈0．01），共转染组排斥反应轻于TGF组和FasL组，TGF组轻于FasL组。肝功能示共转染组于7d时就已基本恢复正常，FasL组于7d时有所降低，但10d时反而升高，ALT及TBIL的浓度均高于共转染组（P〈0．01，P〈0．05）；TGF组到10d时，肝功能已恢复正常，ALT及TBIL的浓度均低于FasL组（P〈0．01，P〈0．05），但与共转染组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测示，术后7d共转染组和TGF组的血清白细胞介素（IL）-1、IL-10及IL-12与FasL组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；但共转染组和TGF组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。TUNEL显示FasL组的肝、脾及腹腔淋巴结中淋巴细胞凋亡指数与共转染组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05），但多于TGF组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。FasL组中位生存期20d与imDC组（23d）�
- 曾金华邱明链陈丽红吴燕斌方航荣刘景丰
- 关键词：树突状细胞免疫耐受FASL转化生长因子-Β1肝移植
- 人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共转染大鼠未成熟树突状细胞对其生物学活性的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察人凋亡相关因子配体（hFasL）及人转化生长因子-β1（hTGF-β1）基因共转染的大鼠未成熟树突状细胞（imDC）对其生物学活性影响。方法实验分6组：mDC组、imDC组、空载体组、hFasL基因转染组、hTGF-β1基斟转染组及hFasL—hTGF-β1基因共同转染组（即共转染组）。用hFasL或（和）hTGF-β1真核表达载体（pIRES2-EGFP—hFasL、pIRES2-EGFP-hTGF-β1）转染培养6d后大鼠骨髓来源的imDC，转染24～48h后应用荧光显微镜、酶联免疫吸附试验（ELISA）、Westernblot、流式细胞术及混合淋巴细胞反应（MLR）检测不同基因修饰的imDC的生物学活性。结果荧光显微镜观察显示pIRES2-EGFP—hFasL及pIRES2-EGFP-hTGF-β1质粒转染imDC后可见绿色荧光；ELISA检测共转染组和转化生长因子（TGF）组TGF-β1基因表达均高于mDC组、imDC组、空载体组及FasL组（P值均〈0．01），imDC组、空载体组及FasL组的TGF-β1基因表达均高于mDC组（P〈0．05）。hFasL基凶表达各组间的差异均无统计学意义（P值均〉0．05）；经Westenblot检测hFasL及hTGF-β1基因转染组有均有相应蛋白表达（相对分子质量分别为31×10^3和43×10^3）；流式细胞术显示表面分子CD86、CD80在mDC表达高于imDC及各基因转染组和空载体组；转染后混合淋巴细胞反应（MLR）显示，共染组T细胞的增殖反应均明显弱于TGF组和FasL组（P〈0．05）。结论联合FasL和TGF-β1基因转染的imDC存体外诱导同种异体免疫耐受的能力强于FasL或TGF-β1单基因转染。
- 邱明链吴燕斌陈丽红方航荣曾金华刘景丰
- 关键词：树突状细胞FASL转化生长因子-Β1基因修饰
- 血管内皮细胞生长因子在排斥反应中的作用的研究进展被引量：1
- 2010年
- 黄启明吴燕斌刘景丰
- 关键词：术后排斥反应血管内皮细胞生长因子同种异体移植移植物失功功能衰竭外科技术
- CT引导下肝癌的无水酒精注射的介入治疗被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨CT引导下无水酒精注射介入治疗肝癌的方法及疗效。方法:在CT导引下对15例原发性肝癌(共17个病灶)行无水酒精注射治疗,在治疗前均经CT或MR,AFP检查临床诊断为原发性肝癌。治疗使用18～21G穿刺针,注入无水酒精量为3～10 ml不等。结果:15例17个病灶中12个病灶注射3次,4个病灶注射4次,1个病灶注射5次,10个病灶肿瘤坏死,4个病灶肿瘤残留,3个病灶肿瘤增大。结论:CT引导下经皮肝无水酒精注射治疗原发性肝癌是一种安全有效的方法。
- 吴燕斌黄启明刘景丰
- 关键词：原发性肝癌介入治疗无水酒精
- 单人行大鼠原位肝移植手术难点及技巧的探讨
- 2010年
- 目的探讨单人建立稳定大鼠原位肝移植模型的手术难点及技巧。方法对200只成年雄性SD大鼠,采用改良的Kamada二袖套法,单人及双人裸眼下行大鼠原位肝移植各50对。结果单人与双人操作组供体手术时间、受体手术时间、无肝期分别为(27.22±1.03)min和(26.47±1.16)min、(50.58±3.10)min和(48.18±3.70)min、(11.60±0.11)min和(11.28±0.08)min。单人与双人操作组手术成功率、1周存活率、1个月存活率分别为90%和94%、88%和88%、84%和86%。结论改良的二袖套法,单人操作简便,成功率高,无需助手协助,可为大鼠原位肝移植实验提供稳定可靠的动物模型。
- 黄启明吴燕斌刘景丰邱明链
- 关键词：肝移植动物模型
- 两种大鼠原位肝移植急性排斥模型的对比观察被引量：1
- 2013年
- 目的对比观察两种大鼠原位肝移植急性排斥模型。方法进行改良二袖套法大鼠原位肝移植;分为Sprague Dawley(SD)→SD组(24例),SD→Wistar组(24例)及Dark Agouti(DA)→Lewis组(24例)。术后3,5,7,10d分别随机处死4只受鼠,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)变化,并观察肝脏病理组织学改变;每组剩余受鼠进行生存分析。结果手术成功率为94.4%;DA→Lewis组中位生存时间(8d)短于SD→Wistar组(16d)(P=0.000)。SD→Wistar组71.4%受鼠移植肝急性排斥反应逐渐加重(RAI:3～7分),28.6%逐渐好转;DA→Lewis组受鼠移植肝发生重度急性排斥反应(RAI:7～9分)。在7,10d,DA→Lewis组受鼠血清ALT、TBIL浓度均高于SD→Wistar组(7d:P=0.000、0.007;10d:P均=0.000)。结论 SD→Wistar组合的大鼠肝移植术后大部分可发生急性排斥反应,但会出现自发耐受现像,从而导致急性排斥反应基础研究偏移;而DA→Lewis组合的大鼠肝移植术后均出现重度的急性排斥反应,是一种理想的急性排斥反应模型。
- 邱明链陈丽红吴燕斌曾金华刘景丰
- 关键词：肝移植免疫耐受移植物排斥
- hFasL及hTGF-β1基因共转染大鼠imDC对其生物学活性的影响
- 【目的】将hFasL和hTGF-β1基因共转染大鼠imDC,观察imDC生物学特性的改变。【方法】将实验分6组:mDC组、imDC组、空载体组、hFasL基因转染组、hTGF-β1基因转染组及hFasL-hTGF-β1基...
- 邱明链吴燕斌
