吴春平
- 作品数:7 被引量:6H指数:2
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- 葡萄糖转运蛋白介导孕酮对于氧糖剥夺PC12细胞的防护作用
- 2012年
- 目的探讨葡萄糖转运蛋白抑制剂细胞松弛素B(CB)对孕酮抗氧糖剥夺(OGD)防护PC12细胞的作用及机制。方法选取生长状态良好及诱导分化均一的PC12细胞随机分为5组:正常(normal)组、氧糖剥夺(OGD)组、孕酮(PROG)组、孕酮+细胞松弛素B(PROG+CB)组、细胞松弛素B(CB)组,后4组均行氧糖剥夺。XTT检测细胞活力,胎盘蓝染色法计数活细胞,氧化酶法测定培养基中糖含量。上述检测在OGD后24h进行。结果 OGD后PC12细胞肿胀变圆,突起减少或消失,细胞活力(P<0.01)和活细胞数(P<0.05)降低,培养液葡萄糖含量明显升高(P<0.05)。PROG减轻胞体水肿,增加细胞活力(P<0.01)和活细胞数(P<0.05),降低培养液葡萄糖含量(P<0.05)。先用CB抑制葡萄糖转运蛋白,再给PROG(PROG+CB组)则抵消PROG的防护作用。单用CB(CB组)则细胞活力仅为1.8%,活细胞数为2.9%,培养液中葡萄糖含量明显升高。可见,孕酮对氧糖剥夺PC12细胞防护作用可被葡萄糖转运蛋白的抑制剂抵消。结论葡萄糖转运蛋白可能是介导孕酮防护氧糖剥夺PC12细胞的重要分子靶标。
- 吴春平李颖虹张勇李超堃李东亮
- 关键词:孕酮细胞松弛素BPC12细胞氧糖剥夺
- 孕酮对氧糖剥夺PC12细胞的作用
- 目的:探讨大鼠肾上腺嗜铬细胞(rat pheochromocytoma cell line,PC12)氧糖剥夺(oxygen-glucosedeprivation,OGD)后葡萄糖转运体(glucose transpor...
- 侯志慧吴春平李东亮
- 关键词:孕酮PC12细胞神经元氧糖剥夺GLUT3
- 文献传递
- 4孕酮保护氧糖剥夺PC12细胞是基因效应吗?
- 吴春平沈慧李娜张勇王国红李超堃路承彪李东亮
- 关键词:孕酮PC12细胞神经元氧糖剥夺基因效应
- 文献传递
- 米非司酮对孕酮防护PC12细胞氧糖剥夺损伤的影响被引量:2
- 2013年
- 目的:观察孕酮核受体阻断剂米非司酮对孕酮防护大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)氧糖剥夺(OGD)损伤的影响,从而研究孕酮对氧糖剥夺PC12细胞的防护作用是否是核受体介导的基因效应。方法:运用XTT法、台盼蓝拒染色、氧化酶法检测米非司酮阻断孕酮核受体前后氧糖剥夺PC12细胞活力、活细胞数及培养基中糖含量的变化。结果:米非司酮显著消除孕酮对氧糖剥夺损伤PC12细胞的防护作用。结论:孕酮防护PC12细胞氧糖剥夺损伤的作用可能主要是通过核受体介导的基因效应实现的。
- 吴春平王国红张勇李东亮
- 关键词:米非司酮孕酮氧糖剥夺核受体
- 三磷腺苷损伤PC12细胞的剂量和时间依赖性观察
- 2012年
- 目的探讨细胞外三磷腺苷(ATP)对PC12细胞损伤作用的剂量和时间依赖性特点。方法将对数生长期的PC12细胞分别用0.00、0.03、0.10、0.30、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP处理3 h后,光学显微镜下观察细胞形态的变化,甲氮甲唑蓝(XTT)比色法检测细胞死亡率,锥虫蓝染色检测细胞存活率。将对数生长期的PC12细胞分别在7.00 mmol·L-1ATP作用0、1、2、3、6、12、24 h时,用XTT比色法检测细胞死亡率。结果 (1)XTT比色法检测结果显示,0.03、0.10、0.30、0.50、1.00和2.00 mmol·L-1ATP组PC12细胞死亡率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。随着浓度升高,ATP诱导PC12细胞死亡作用逐渐增强,3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP明显增加细胞的死亡率,与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)锥虫蓝染色检测结果显示,0.03、0.10、0.30、0.50和1.00 mmol·L-1ATP组细胞存活率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异无统计学意义(P>0.05);2.00、3.00、5.00、7.00和9.00 mmol·L-1ATP组细胞存活率与0.00 mmol·L-1ATP组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。(3)XTT法检查7.00 mmol.L-1ATP处理细胞死亡率显示,1、2 h组与0 h组比较差异有统计学意义(P<0.05),3、6、12、24 h组与0 h组比较差异更显著(P<0.01),3、6、12、24 h组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ATP对PC12细胞毒性作用具有剂量和时间依赖性特点。
- 张勇吴春平李娜李东亮
- 关键词:三磷腺苷PC12细胞
- 孕酮对氧糖剥夺损伤的PC12细胞的保护作用被引量:5
- 2012年
- 目的:观察孕酮(PROG)对氧糖剥夺(OGD)PC12细胞活力及葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)表达的影响,在培养细胞证明孕酮抗缺氧缺血损伤的神经保护作用。方法:神经生长因子诱导分化良好的PC12细胞,随机分为3组:(1)正常对照组:常规培养,不进行OGD处理;(2)OGD组:无糖培养基、低氧环境(95%N2和5%CO2持续通气)进行OGD 30 min处理,然后复氧复糖培养24 h;(3)PROG+OGD组:培养液含终浓度为10 nmol/L孕酮,余同OGD组。WST-8法检测各组PC12细胞的活力;检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,判断细胞损伤的程度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PC12细胞GLUT1 mRNA和GLUT3 mRNA表达;Western blotting法检测PC12细胞GLUT3蛋白表达。结果:孕酮可以减轻OGD引起的PC12细胞肿胀,降低LDH漏出,减轻细胞损伤,显著增加OGD组PC12细胞的活力(P<0.01)。RT-PCR显示PROG+OGD组GLUT3 mRNA的表达明显高于OGD组(P<0.05),Western blotting显示PROG+OGD组GLUT3蛋白的表达显著高于OGD组(P<0.01)。结论:孕酮对体外培养OGD损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能与上调GLUT3蛋白的表达有关。
- 侯志慧王国红吴春平李东亮
- 关键词:孕酮PC12细胞神经元氧糖剥夺
- 孕酮保护氧糖剥夺PC12细胞是基因效应吗?
- <正>尽管脑外伤、脑卒中的治疗现状不容乐观,但孕酮带给人们期待的希望。遍及全球25个独立实验室,用22种不同的损伤模型,在细胞、形态和功能方面都证明孕酮可产生可靠、恒定的神经保护作用。然而,孕酮对缺氧缺血脑细胞的保护是通...
- 吴春平沈慧李娜张勇王国红李超堃路承彪李东亮
- 文献传递