吴小玮
- 作品数：7 被引量：35H指数：3
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- 内质网应激在白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的探讨内质网应激在白蛋白超负荷诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用和分子机制。方法Western印迹法检测肾小管上皮细胞（HKC）内质网伴侣蛋白糖调节蛋白78（GRP78）和内质网应激蛋白CHOP（CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白，也称为GADD153）表达与人血清白蛋白（HSA）作用时间和浓度的关系。实时荧光定量PCR法检测CHOP siRNA对CHOP基因转录的抑制情况。Western印迹法检测CHOP siRNA转染后CHOP蛋白水平的变化。膜联蛋白V和碘化丙锭（Annexin V-FITC和PI）双染的流式细胞术检测白蛋白诱导HKC凋亡的变化以及CHOP siRNA对HKC凋亡的影响。结果（1）分别以0、5、10、20g／L白蛋白作用于HKC 24h，GRP78、CHOP蛋白表达及细胞凋亡均随白蛋白浓度的增加而上调，各组间差异有统计学意义（P〈0．01）；以20g／L白蛋白分别作用于HKC 0、6、12、24、36h，GRP78蛋白表达在6h即显著增加，CHOP蛋白表达及HKC凋亡则在12h显著增加，各组间差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）CHOP siRNA显著抑制白蛋白诱导的CHOP基因转录及蛋白表达（P〈0．01），对白蛋白诱导的HKC凋亡有显著抑制作用（P〈0．01）。结论白蛋白超负荷可诱导肾小管上皮细胞发生内质网应激，并通过上调促凋亡因子CHOP表达引起肾小管上皮细胞内质网相关的细胞凋亡，这可能是蛋白尿引起肾小管间质病变的重要机制。
- 吴小玮何娅妮王惠明李开龙丁涵露吕顺巧
- 关键词：白蛋白类内质网细胞凋亡肾小管上皮细胞
- 慢性肾病患者肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系被引量：18
- 2008年
- 目的探讨慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)患者蛋白尿诱导肾小管上皮细胞内质网应激与细胞凋亡的关系。方法应用免疫组织化学技术检测CKD患者肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白氧调节蛋白150(cells-oxy-gen-regulated protein150,ORP150)和糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)的表达;TUNEL法检测细胞凋亡。对各指标与CKD患者24h尿蛋白量进行相关性分析。结果CKD患者肾小管上皮细胞细胞质中ORP150、GRP78的表达较正常对照组显著增强(P<0.01),且轻、中、重度蛋白尿3组各组间亦均有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关(r=0.695,r=0.76,P<0.01);各组小管上皮细胞凋亡系数(apoptosis index,AI)均亦有显著性差异(P<0.01),并与尿蛋白水平呈正相关性(r=0.835,P<0.01)。结论CKD患者肾小管上皮细胞有内质网应激与凋亡的发生,并且其强度与蛋白尿水平呈正相关关系。内质网应激可能是大量蛋白尿引起小管上皮细胞凋亡的重要环节。
- 吴小玮何娅妮丁涵露王惠明李开龙杨聚荣詹俊张建国
- 关键词：慢性肾病内质网应激细胞凋亡
- 人NaDC1基因启动子序列转录调控元件的初步分析
- 2007年
- 目的对hNaDC1基因启动子序列转录调控元件进行初步分析。方法构建hNaDC1基因5′侧翼序列系列缺失质粒,以双荧光素酶报告基因检测系统检测hNaDC1基因5′侧翼区(-2232/+136)的转录调控元件与转录调控蛋白之间的相互作用。结果pGL3-hNaDC1A质粒的转录活性最高,为(2.98±0.45);pGL3-hNaDC1D的转录活性最低,为(0.45±0.14)。以pGL3-hNaDC1A质粒的转录活性为基准(100%),其他4种质粒相应的转录活性分别为:pGL3-hNaDC1B86.7%,pGL3-hNaDC1C89.4%,pGL3-hNaDC1D15.8%,pGL3-hNaDC1E61.2%。MatInspector5.0软件预测结果显示hNaDC1基因5′侧翼启动子序列共含有22个14种转录因子结合位点。结论hNaDC1基因5′侧翼区-1084/-254和-12/+136区域可能存在有正性作用转录因子的结合位点。
- 杨聚荣何娅妮张剑凯李新伦梁海君林静吴小玮王惠明李开龙
- 关键词：转录调控
- Cubilin白蛋白结合域重要功能残基的研究
- 目的Cubilin是肾近曲小管上皮细胞负责重吸收白蛋白等大分子物质的吞饮受体,研究发现其在蛋白尿相关性肾损害中具有重要作用。本研究结合生物性信息学、基因工程以及生物传感器技术对cubilin白蛋白结合域重要氨基酸残基进行...
- 杨聚荣何娅妮李新伦梁海君林静吴小玮
- 文献传递
- 内质网源性转录因子CHOP在蛋白尿诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用及其调控机制研究
- 大量蛋白尿是慢性肾病(chronickidneydisease,CKD)最常见的临床表现之一，它不仅是反映肾小球损伤程度的重要标志，还可以引起肾小管间质损伤促使肾脏病变持续进展，是CKD病程进展中的一个独立危险因素。白蛋...
- 吴小玮
- 关键词：蛋白尿肾小管上皮细胞肾小球损伤细胞凋亡
- 文献传递
- 人cubilin蛋白与其配体白蛋白结合特定结构域的预测
- 2007年
- 目的同源模建cub8功能域的三维模型,并以计算机辅助的分子对接方法预测cub8功能域与白蛋白的候选结合氨基酸残基。方法采用insightⅡ工作站对cub8蛋白进行同源模建,对cub8蛋白和白蛋白进行分子对接,寻找白蛋白和cub8的候选结合氨基酸残基。结果cub8蛋白三维结构为两个反平行的β片层结构,中间以β转角相连。cub8蛋白片段与白蛋白通过正负电势的吸引完成受体与配体的结合。Asp59-Tyr60-Leu61-Glu62-Leu63-Tyr64和Arg72-Tyr73肽段可能是cubilin与白蛋白结合的关键氨基酸残基。结论利用计算机辅助的分子对接技术,获得cub8和白蛋白相互作用的两个候选结合域,为进一步研究cubilin与白蛋白相互作用奠定基础。
- 杨聚荣何娅妮李新伦梁海君林静吴小玮
- 关键词：同源模建白蛋白
- 内质网应激与肾脏疾病被引量：12
- 2007年
- 吴小玮何娅妮
- 关键词：内质网应激肾脏疾病肾脏病亚细胞水平
