叶丽萍
- 作品数:12 被引量:27H指数:4
- 供职机构:福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金农业科技园更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 外源NO对铜胁迫下小白菜SBPase基因表达特性及其光合速率的影响被引量:3
- 2016年
- 【目的】本研究通过克隆小白菜光合暗反应中限制核酮糖-1,5-二磷酸(Ru BP)再生的关键酶景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(sedoheptulose-1,7-bisphosphatase,SBPase)基因,分析铜胁迫及添加外源一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)缓解铜胁迫时该基因的表达情况,并将其与对应处理下小白菜净光合速率(Pn)的变化情况结合在一起进行分析,以期为全面了解外源NO缓解铜胁迫植物光合作用机理提供理论依据。【方法】以小白菜品种"上海青"3~4片真叶大的幼苗为材料,采用RT-PCR技术克隆小白菜SBPase基因,铜处理浓度为200μmol/L,外源NO供体SNP浓度为300μmol/L,同时设置相关的4个对照组排除其他可能因素的干扰,在添加处理液后的0、4、8、12d上午九点测定各处理小白菜相同节位叶片的净光合速率,并利用实时荧光定量PCR技术检测在对应的处理时间及对应节位小白菜叶片中SBPase基因的表达情况。试验环境条件为光照强度200μmol/(m^2·s),光周期12 h,温度25℃/18℃。【结果】1)克隆得到小白菜SBPase基因(Genbank登录号:AHY18974.1),开放阅读框为1182 bp,编码393个氨基酸,蛋白质分子量为42.34k D,理论等电点为5.85。2)序列分析表明其含有氧化还原活性位点,包含一个具有59个氨基酸残基的叶绿体转移肽序列。小白菜SBPase基因推导的氨基酸序列与其他物种中已分离的SBPase编码的氨基酸序列具有很高的同源性。3)实时荧光定量PCR分析表明,SBPase基因在铜胁迫下的小白菜叶片中表达量下降,且随着胁迫时间的延长下降程度加剧;而在铜胁迫的基础上添加外源NO可以在一定程度上缓解铜胁迫引起的小白菜叶中SBPase基因表达量的下降。4)铜胁迫下小白菜叶片Pn显著下降,且随着胁迫时间的延长,Pn下降加剧,施加外源NO后Pn的下降得到一定程度的缓解,各处理下Pn的变化与SBPase基因表达量变化趋势一致。【结论】铜胁迫及在铜胁迫的基�
- 叶丽萍钟凤林林义章林琳琳
- 关键词:小白菜铜胁迫一氧化氮实时荧光定量PCR
- 外源NO对铜胁迫下小白菜光合碳同化的影响
- 一氧化氮(NO)是一种重要的氧化还原信号分子,参与植物对多种非生物胁迫的响应。适宜浓度的外源NO可以缓解植物受到重金属胁迫引起的植物光合速率的下降,在一定程度上提高植物光合速率,但铜胁迫及添加外源NO缓解铜胁迫对植物光合...
- 叶丽萍
- 关键词:小白菜铜胁迫外源一氧化氮光合作用实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 一种即食西葫芦片及其制作方法
- 本发明公开了一种即食西葫芦片及其制作方法,通过选材、切片、漂烫、装盘、预冻结、升华干燥、解析干燥、真空包装得到即食西葫芦片,所得西葫芦片的安全含水率为1%~5%。本发明通过沸水漂烫熟制西葫芦片,结合真空冷冻干燥技术对熟制...
- 钟凤林赵瑞丽林俊芳林义章叶丽萍高世超
- 文献传递
- 铜胁迫下小白菜叶片基因表达谱的cDNA-AFLP分析被引量:4
- 2014年
- 本研究以小白菜品种‘上海青’为试验材料,利用Cu2+质量浓度为10mg·L-1的营养液水培小白菜幼苗,通过cDNA—AFLP技术分析小白菜响应铜胁迫相关基因及其表达情况。试验中利用多态性较好的135对引物进行扩增,共获得5800多条转录衍生片段(TDFs),平均每个5J物组合扩增出30~60条,片段大小主要集中在100~1000bp,根据条带强弱和有无的变化,其表达模式可以分为持续表达、瞬时表达、上调表达和下调表达4种情况。通过筛选获得180条差异表达TDFs,其中上调表达77条(42.8%),下调表达61条(33.9%),瞬时表达42条(23.3%)。选取其中152条差异表达TDFs进行回收测序,最终得到151个有效序列,其中上调表达68条(45%1,下调表达50条(33.1%),瞬时表达33条(21.9%)。Blastx比对结果显示,112条TDFs序列与已知基因具有较高的相似度,涉及能量代谢、物质合成与运输、逆境响应、信号转导等多种途径,16条TDFs序列与功能未知或假定基因的同源性较高,其余23条TDFs序列与已知功能基因的同源性较低或零匹配,可能是一些新的铜胁迫应答基因。从151条TDFs选取4条TDFs,以小白菜actin基因为内参照,对其在不同胁迫处理时间的表达情况进行荧光定量RT—PCR验证,分析结果与cDNA.AFLP结果基本吻合,表明cDNA—AFLP技术是研究小白菜铜胁迫相关基因差异表达的有效方法。小白菜铜胁迫相关基因表达情况较为复杂,涉及多种代谢途径。本研究结果可为探讨小白菜铜胁迫的分子机理和相关基因的克隆提供理论依据。
- 赵瑞丽钟凤林林义章高世超林俊芳叶丽萍
- 关键词:小白菜铜胁迫基因表达谱CDNA-AFLP
- 一种即食西葫芦片及其制作方法
- 本发明公开了一种即食西葫芦片及其制作方法,通过选材、切片、漂烫、装盘、预冻结、升华干燥、解析干燥、真空包装得到即食西葫芦片,所得西葫芦片的安全含水率为1%~5%。本发明通过沸水漂烫熟制西葫芦片,结合真空冷冻干燥技术对熟制...
- 钟凤林赵瑞丽林俊芳林义章叶丽萍高世超
- 文献传递
- 响应面法优化超声辅助提取紫色小白菜花青苷的工艺研究被引量:9
- 2014年
- 为探讨从紫色小白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis(L.)Makino var.communis Tsen et Lee)叶片中提取花青苷的最佳工艺条件,在超声功率为420 W、40%乙醇和两次超声提取条件下,采用Box-Behnken的中心组合试验设计原理,设计4因素3水平试验,研究了pH、料液比、超声温度、超声时间对花青苷得率的影响。结果表明,紫色小白菜叶片花青苷提取的优化工艺参数为料液比1∶16(pH 2.76),在超声功率为420 W、温度为58℃下超声12 min,花青苷的提取得率可达4.11 mg g–1 DW。
- 杨碧云叶丽萍林琳琳汪镇坤邹伟明曾晓兰钟凤林林义章
- 关键词:花青苷超声波响应面法
- 一种金线莲水培装置
- 本实用新型涉及一种金线莲水培装置,包括座板,所述座板上设置有贮液箱,所述贮液箱上设置有立柱,所述立柱上设置有水培槽,所述水培槽内设置有能在槽内上下移动的Db定植板,所述贮液箱内设置有往水培槽供液的水泵,所述水培槽底部设置...
- 钟凤林林俊芳许茹赵瑞丽林义章叶丽萍高世超
- 文献传递
- 不结球白菜氯离子通道蛋白ClC-d基因的克隆及表达分析
- 2014年
- 根据从不结球白菜中获得的与铜胁迫相关的氯离子通道蛋白基因ClC-d的TDF片段设计引物,运用RACE技术克隆出具有完整阅读框的不结球白菜氯离子通道蛋白基因ClC-d,该基因全长2 752bp,开放阅读框为2 376bp,编码792个氨基酸,分子量为87.06kD,理论等电点为8.35,为碱性蛋白。结构分析表明:该蛋白含有1个电压门控的氯离子通道和2个CBS结构域。进化树分析显示,不结球白菜氯离子通道蛋白基因ClC-d推导的氨基酸序列与拟南芥氯离子通道蛋白基因的相似度高达100%,属于ClC类氯离子通道蛋白。RT-PCR结果表明在铜胁迫下该基因表达量增加,处理10d时达到最高,推测其可能参与对铜胁迫的应答反应。本研究结果有助于进一步研究该基因在不结球白菜逆境应答中的作用及其作用机制。
- 赵瑞丽钟凤林林义章高世超叶丽萍林琳琳
- 关键词:不结球白菜RACERT-PCR
- 青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的克隆及在模拟酸雨胁迫下的表达分析被引量:4
- 2014年
- 由糖基转移酶催化产生的次生代谢物质对植物抵御和适应环境的变化起着重要作用。为探讨青花菜在酸雨胁迫下糖基转移酶的表达变化,对青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA序列全长进行克隆,并对其进行生物信息学和表达分析。结果表明:青花菜β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的cDNA全长为1 550 bp,开放阅读框为1 155 bp,编码384个氨基酸,推测分子式为C1964H3044N558O567S11,分子量为43 897.8,没有信号肽。系统进化树分析结果表明,该青花菜基因与拟南芥聚类关系最近。利用实时荧光定量PCR研究模拟酸雨胁迫下β-1,4-木糖基转移酶IRX9H基因的表达量,结果显示该基因的表达量在模拟酸雨胁迫初期显著增大,随着时间的延长,又开始下降,这表明其在青花菜抗酸雨胁迫中发挥了作用。
- 高世超钟凤林林义章赵瑞丽林俊芳叶丽萍
- 关键词:青花菜分子克隆模拟酸雨
- 钙信使在植物适应非生物胁迫中的作用被引量:5
- 2015年
- Ca2+作为植物细胞中的第二信使,参与植物对多种非生物逆境信号的转导。在非生物逆境条件下,植物细胞质内的钙离子在时间、空间及浓度上会产生特异性变化,钙信号再通过其下游的钙结合蛋白进行感受和转导,进而在细胞内引起一系列的生物化学反应,以适应或抵制各种逆境胁迫。通过从植物在非生物逆境条件下钙信号的产生、传递、特点和作用方式,以及钙在各种非生物逆境响应中的作用等方面对钙信号转导进行综述。
- 林琳琳沈立林义章钟凤林叶丽萍璩小龙
- 关键词:钙信号非生物逆境