单军
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：东南大学医学院遗传学研究中心更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅科研基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗ARL-1单克隆抗体的制备及初步应用被引量：2
- 2005年
- 目的: 制备抗醛糖还原酶相似蛋白(aldosereductaselikeprotein, ARL- 1)的单克隆抗体 (mAb)并进行初步应用。方法: 用纯化的ARL- GST蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb。间接ELISA法、Westernblot及免疫组织化学染色法, 对mAb进行鉴定及初步应用。结果: 获得 1株可稳定分泌抗ARL -1蛋白mAb的杂交瘤细胞系。mAb的Ig亚类为IgG2b, 轻链属于κ型。腹水mAb的效价为: 1∶4. 096×105。Westernblot的结果表明, ARL 1蛋白在被检测的肝癌组织中呈高表达, 而在相应的癌旁组织中不表达。免疫组织化学染色的结果表明, ARL -1蛋白在肝癌组织中呈高表达且主要定位在胞质内。结论: 成功地制备 1株抗ARL -1蛋白的mAb。初步应用的结果表明, ARL- 1蛋白在肝癌组织中呈高表达, 为进一步研究ARL -1蛋白的功能, 以及其与肝癌的确切关系奠定了基础。
- 单军张建琼金俊飞马达鲍海逊缪凤琴谢维
- 关键词：单克隆抗体免疫组化染色
- 抗醛糖还原酶单克隆抗体的制备与特性鉴定
- 2005年
- 目的: 制备抗醛糖还原酶(AR)的单克隆抗体(mAb),并与本室制备的抗醛糖还原酶相似蛋白(ARL-1) mAb进行比较. 方法: 经RT-PCR获得AR基因, 将基因插入Pgex- 4T-1(His)6C中, 构建重组质粒Pgex- 4T-1(His)6C-AR, 以重组质粒转化E.coli Rosetta诱导表达GST-AR蛋白.以纯化的GST-AR蛋白免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb.应用间接ELISA和Western blot方法对mAb进行筛选和鉴定.使用Clustalx和 Antheprot软件, 比较AR与ARL-1的同源性, 表达GST-Dar[80～142氨基酸(aa)], 与ARL-1差异较大; 并分析AR的抗原性, 表达GST-Da1(1～79 aa)、GST-Da2(80～99 aa)、 GST-Da3(111～142 aa)、 GST-Da4(143～316 aa).利用AR全长及截短蛋白, 采用Western blot分析制备的抗AR mAb识别AR抗原的部位.结果: 获得3株稳定分泌抗AR mAb的杂交瘤细胞系ARB3、 AR7B3G4和ARF10.3株抗GST-AR的 mAb均为IgG1(κ型), 腹水mAb效价为1∶ 4×105, 细胞培养上清mAb效价为1∶ 1×104, 3株mAb均可与胎盘组织中的AR蛋白起反应, 而与GST-ARL-1和GST蛋白无交叉反应.它们分别为抗GST-Da1、GST-Da3和GST-Da4蛋白的mAb.结论: 成功地制备了3株特异性抗AR mAb,可分别识别AR的 1～79、111～142、143～316位氨基酸.将它们与抗ARL-1 mAb联合应用,将有助于进一步研究AR与ARL-1蛋白的功能, 并为深入探讨AR、ARL-1与相关疾病的关系及进行大规模的流行病学调查提供了有力的工具.
- 马达金俊飞孙明宽单军张建琼谢维
- 关键词：醛糖还原酶单克隆抗体
- 抗ARL-1单克隆抗体的制备及初步应用
- 醛糖还原酶(AldoseReductase)是醛酮还原酶超家族中的一员。它催化葡萄糖还原为山梨醇，通过减少内源或外源性代谢产物而起到解毒作用。已经明确AR与糖尿病并发症有密切关系。一些研究发现AR基因在大鼠原发性肝癌中高...
- 单军
- 关键词：肝癌单克隆抗体醛糖还原酶
- 文献传递
- 食管癌组织HLA-I类抗原及相关分子的表达及意义被引量：11
- 2004年
- 为探讨HLA抗原及相关分子在食管癌中的表达水平及其与病理学分型的关系 ,应用了 5种HLA抗原及相关分子单抗 ,采用免疫组织化学方法 (ABC法 )对江苏省 83例食管癌组织石蜡切片进行检测并结合肿瘤的临床病理资料综合分析 .得出结果 :HLA B/C、HLA A、β2 m、LMP2、calnexin各分子的下调率分别为 12 %、2 5 .3 %、15 .7%、19.3 %、2 0 .8% ;丢失率分别为 2 9%、3 3 .7%、49.3 %、2 4.1%、41.5 % .其中LMP2位点的表达与肿瘤分型相关 ,随着食管癌分化程度降低 ,下调率增加 .2 7例病例有淋巴结转移 ,但统计学分析各分子的表达与转移均无明显相关性 .研究表明 ,食管癌中有明显的HLA I类分子表达下调或缺失 .
- 缪凤琴张建琼单军蒋芹陈昊李淑锋张建民谢维
- 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法
- 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法，属于生物工程开发新型肝癌诊断试剂的技术领域。其制备的方法是采用基因重组的方法表达、纯化ARL－GST重组蛋白，将ARL－GST免疫小鼠制备脾细胞悬液，在聚乙二醇作用下与处于...
- 谢维金俊飞张建琼单军
- 文献传递
