刘盈盈
- 作品数：18 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生农业科学更多>>
- 耐辐射异常球菌ECF家族Sig1转录因子热胁迫条件下转录组分析
- 外胞质功能σ因子(ECFs)在细菌致病性和抵抗各种胁迫环境发挥重要作用.耐辐射异常球菌作为极端辐射抗性环境微生物,其体内仅含有一个ECF家族Sig1因子,研究表明Sig1在热胁迫调控中发挥重要作用.在热胁迫条件下对野生型...
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- 耐辐射异常球菌亲水蛋白LeaK的抗逆功能研究
- 胚胎发育晚期丰富蛋白(Late Embryogenesis Abundant Protein,LEA)是一类普遍存在于动物、植物和微生物中与渗透调节相关的特异家族蛋白.该类蛋白富含亲水氨基酸,是一类稳定的亲水性蛋白,在生...
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- 戈壁异常球菌角蛋白酶基因的克隆及功能研究被引量：2
- 2019年
- 旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础。从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker。构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进行体外诱导表达纯化,通过对羽毛水解活性的测定探究粗酶液的最适温度和pH。结果显示,Dgker蛋白N端前50个氨基酸对蛋白的表达纯化有很大影响。Dgker的重组菌株3d完全分解羽毛,在奶粉平板上重组菌株粗酶液比空载菌株粗酶液降解圈更显著。Dgker适应的温度和pH较为广泛其中最适温度是60℃、最适pH是5.0。Dgker能降解羽毛在以后的工业生产及处理废弃羽毛有极大的应用空间。
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- 关键词：角蛋白角蛋白酶酶活
- 耐辐射异常球菌铁蛋白DrfE对ROS的影响
- 干旱、氧化、高盐、辐射和极端温度等非生物胁迫产生的大量活性氧分子(ROS)造成细胞内蛋白质、脂类、碳水化合物和DNA等生物大分子的损伤,严重影响生物体正常的代谢进程。据文献报道,耐辐射异常球菌(Deinococcus r...
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- 文献传递
- 耐辐射异常球菌osmC与ohr基因突变株的构建及功能研究
- 2013年
- 渗透胁迫诱导蛋白OsmC与有机氢过氧化物抗性蛋白Ohr都属于OsmC超家族抗氧化物酶,在细菌抵御有机或无机过氧化反应的过程中起重要作用。耐辐射异常球菌(D. radiodurans R1)中osmC基因(DR_1538)与ohr基因(DR_1857)分别编码了OsmC超家族中的这两种抗氧化物酶。运用体外三段融合PCR方法和线性转化方法,首次构建了壮观霉素抗性完全缺失突变株ΔosmC和卡那霉素抗性完全缺失突变株Δohr。对ΔosmC、Δohr突变株和野生型菌株分别都进行CHP(异丙苯基过氧化氢)、H2O2 和NaCl胁迫处理,结果显示,与野生型相比,ΔosmC突变株对H2O2异常敏感,而Δohr突变株对CHP更敏感,两个突变株对NaCl胁迫都没有大的变化。QRT-PCR结果显示在H2O2和NaCl胁迫下野生型菌株中osmC基因都上调,其中H2O2胁迫下基因上调水平显著;在CHP和NaCl胁迫下野生型菌株中ohr基因基因上调大约2倍左右。根据结果推测同属于OsmC超家族的两个过氧化物酶选择底物的偏好性与作用方式可能并不一样,OsmC蛋白可能主要是以无机过氧化物作为底物,而Ohr蛋白可能主要是以有机过氧化物为底物。
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- 关键词：耐辐射异常球菌突变株抗氧化
- 耐辐射异常球菌dlp基因缺失突变株构建及其生物学功能研究被引量：1
- 2017年
- 耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans,DR)因其具有对非生物胁迫超强的抵抗能力而备受关注。旨在了解该菌亲水蛋白Dlp在细胞耐受非生物胁迫中的作用,采用融合PCR和基因同源重组技术,获得了dlp基因缺失突变株Δdlp,对野生型DR及突变株Δdlp进行非生物胁迫。结果表明,dlp的缺失导致DR细胞对高盐和氧化胁迫敏感。体外检测氧化胁迫条件下Dlp蛋白对苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的保护,结果显示,Dlp蛋白的加入能缓解氧化胁迫条件下MDH、LDH酶活性的损失。由此表明,亲水蛋白Dlp增强了耐辐射异常球菌对非生物胁迫的抗性,并能以类似分子伴侣的形式保护胁迫条件下酶的活性。
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- 关键词：耐辐射异常球菌非生物胁迫
- 铁蛋白DrfE对耐辐射异常球菌抗氧化酶活性的影响
- 2017年
- 为研究耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)中drf E编码的铁蛋白Drf E的功能,通过基因回补试验构建drf E基因的回补菌株(pdrf E∷Δ),对野生型WT、突变株Δdrf E及回补菌株pdrf E∷Δ进行不同浓度H_2O_2和Na Cl胁迫,分别测定野生型WT、突变株Δdrf E和回补菌株pdrf E∷Δ体内Fe2+含量及抗氧化酶类活性。结果显示,drf E基因缺失导致菌株对氧化和盐胁迫敏感,该基因的回补能够恢复菌株对氧化和盐胁迫的抗性。drf E基因缺失导致耐辐射异常球菌体内Fe2+浓度由232μmol/L增加至293μmol/L;80 mmol/L H_2O_2处理30 min后,突变株Δdrf E的CAT活性下降32.74%,SOD下降41.3%。以上结果表明Drf E蛋白可能参与耐辐射异常球菌铁代谢途径,并且在细胞抗氧化体系中发挥重要作用。
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- 关键词：耐辐射异常球菌非生物胁迫抗氧化酶铁离子
- IrrE定向突变位点A184S显著提高耐辐射异常球菌UV辐射、MMC冲击抗性
- 耐辐射异常球菌属(Deinococcus)中全局调控蛋白IrrE高度保守,其在UV辐射、电离辐射和干燥胁迫环境下起着重要的调控作用.来源于耐辐射异常球菌R1(Deinococcus radiodurans R1)的Dra...
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- 非生物胁迫下戈壁异常球菌LEA3蛋白Dgl3抗逆功能研究
- 2019年
- LEA3(group 3 late embryogenesis abundant proteins)是一类非生物胁迫响应蛋白,能够保护细胞免受胁迫损伤。戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis) I-0分离于干旱、温差大及强阳光辐射的戈壁沙漠环境,具有超强的耐受紫外(UV)辐射、电离辐射和干燥等胁迫的能力,其基因组中Dgo_CA1631基因编码蛋白与LEA3具有一定同源性,将该蛋白命名为Dgl3,并对其生物学功能展开研究。非生物胁迫实验表明,Dgl3蛋白能够显著增强表达菌株BL21对氧化和冷冻胁迫的抗性,最大限度地保护宿主菌免受损伤。体外酶活保护实验结果进一步表明,氧化和反复冻融胁迫条件下Dgl3蛋白能够保护苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。因此推测,Dgl3蛋白通过保护细胞体内相关酶类的活性,增强宿主细胞对氧化和冷冻胁迫的抵抗能力。
- 韩佳慧刘盈盈江世杰陈云耿秀秀平淑珍王劲
- 关键词：非生物胁迫酶活
- 非生物胁迫下耐辐射异常球菌drB0118基因功能分析被引量：1
- 2015年
- 【目的】鉴定和确定被预测为编码干燥相关蛋白的耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)dr B0118基因功能,探讨该基因对盐、渗透和氧化胁迫抗性的作用。【方法】构建dr B0118基因缺失突变株(ΔB0118),通过氯化钠、D-山梨糖醇和过氧化氢等胁迫冲击实验及氧化胁迫条件下q RT-PCR分析,研究dr B0118突变对非生物胁迫反应及氧化胁迫相关基因表达的影响。【结果】dr B0118突变导致菌株对Na Cl和D-sorbitol胁迫的抗性降低;对氧化胁迫(H2O2)敏感;q RT-PCR分析显示,dr B0118突变引起氧化胁迫抗性基因pod和oxy R分别下调4倍和10倍。【结论】D.radiodurans中dr B0118参与了盐、渗透和氧化等多种非生物胁迫反应。
- 刘盈盈张陈江世杰周正富陈明张维王劲
- 关键词：耐辐射异常球菌QRT-PCR非生物胁迫
