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半枝莲抑制人肝癌QGY-7701细胞增殖研究被引量：45: 2006年; 目的探讨半枝莲抑制人肝癌QGY-7701细胞的初步机制。方法MTT法检测半枝莲作用后QGY-7701细胞增殖的改变,光、电镜观察其形态变化,流式细胞仪检测其凋亡细胞比例、细胞周期的变化及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Fas表达。结果半枝莲能抑制QGY-7701细胞的增殖,作用72h后,细胞呈现凋亡早期形态;凋亡细胞增多;G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增多;Bax表达增强,Bcl-2表达减少,Fas表达变化不明显。结论半枝莲可抑制QGY-7701细胞增殖,可能与通过激活Bcl-2基因家族抑癌基因、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期有关。; 林敬明刘煜罗荣城; 关键词：半枝莲原发性肝癌凋亡

一种人糖基磷脂酰肌醇－CD80融合蛋白: 本发明提供了一种人糖基磷脂酰肌醇－CD80融合蛋白，该融合蛋白的的氨基酸序列为SEQNO.1，其人糖基磷脂酰肌醇信号肽来源于人CD58，能稳定地锚定于肿瘤细胞表面。该融合蛋白锚定于肿瘤细胞表面后能促使脾淋巴细胞增殖以及I...; 林敬明刘煜张雪; 文献传递

稳定表达GPI-CD80融合蛋白CHO细胞株的构建被引量：2: 2007年; 目的将糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定型人CD80重组基因的真核细胞表达质粒pRM10/GPI-CD80转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),构建CHO/GPI-CD80稳定表达细胞株。方法将pRM10/GPI-CD80用脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选出阳性细胞克隆。采用流式细胞术和免疫荧光染色检测CHO/GPI-CD80稳定表达细胞株表达GPI-CD80蛋白的效率的变化。结果转染GPI-CD80基因的CHO细胞在G418筛选下出现阳性克隆,且经过传代后不同代数的克隆细胞表面表达GPI-CD80的阳性率差异无统计学意义。结论pRM10/GPI-CD80在CHO细胞中成功表达,表达稳定且效率较高。; 刘煜张雪刘胜军林敬明; 关键词：糖基化磷脂酰肌醇脂质体真核表达

半枝莲的化学成分及其抗肿瘤作用的研究现状被引量：34: 2006年; 综述有关国内外对半枝莲的化学成分研究,及其抗肿瘤作用方面的研究概况,为进一步开发应用半枝莲资源提供参考。; 林敬明刘煜罗荣城; 关键词：半枝莲化学成分肿瘤

在血管平滑肌细胞增殖过程中MAPK对细胞周期素依赖性激酶抑制因子的调节作用: 血管平滑肌细胞(VSMC)的异常增殖是许多血管增殖性疾病发生发展的重要致病机理之一,细胞增殖周期的顺利进行有赖于细胞周期素-细胞周期素依赖性激酶复合体(Cyclin-CDK)和细胞周期素依赖性激酶抑制因子(CKI)的相互...; 刘煜; 关键词：细胞周期免疫沉淀法 DNA芯片技术; 文献传递

GPI-CD80融合蛋白的抗肿瘤作用研究被引量：3: 2007年; 目的研究GPI-CD80融合蛋白对肿瘤生长的抑制作用及其机制。方法将纯化的GPI-CD80蛋白与HepG2细胞共培养后用丝裂霉素灭活,制成肿瘤疫苗。设单纯丝裂霉素灭活的HepG2细胞为对照疫苗。将两组疫苗与裸鼠脾淋巴细胞共培养,MTT法检测淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2、IFN-γ量的变化;乳酸脱氢酶法检测CTL的活性变化;将两组疫苗接种于荷瘤裸鼠,测量裸鼠肿瘤体积的变化。结果脾淋巴细胞经肿瘤疫苗刺激后,OD值、IL-2、IFN-γ的量和CTL的活性均高于对照疫苗组,差异有统计学意义;实验组荷瘤裸鼠平均肿瘤体积小于阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义。结论GPI-CD80融合蛋白能够抑制荷瘤裸鼠瘤体的生长速度,其机制可能与诱导T淋巴细胞增生、刺激细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌、增强CTL活性等有关。; 刘煜刘胜军张雪林敬明; 关键词：GPI CD80 肿瘤疫苗

人CD80基因转染U251瘤株细胞的实验研究: 2007年; 目的构建编码人CD80基因的真核表达载体,转染神经胶质瘤细胞株U251,并检测CD80基因在U251中的表达。方法PCR法扩增人类CD80基因的开放阅读框(ORF)全长,酶切法连接入真核表达载体pcDNA3.1,构建为重组质粒pcDNA3.1/CD80,双酶切及测序鉴定。利用脂质体法将pcDNA3.1/CD80转染U251细胞株,应用RT-PCR、流式细胞术、免疫细胞化学法、Western blotting等技术从细胞及分子水平检测人CD80分子在U251细胞表面的表达情况。结果重组质粒pcDNA3.1/CD80双酶切可切出约900 bp目的片段,测序结果和NCBI检索CD80序列吻合;RT-PCR检测到pcDNA3.1/CD80转染后的U251细胞中CD80mRNA表达:荧光显微镜下观察可见大量免疫荧光标记的绿色荧光细胞,检测转染效率约31.8%;Western blotting可检测到约60kD蛋白条带。结论本实验成功构建了pcDNA3.1/CD80真核表达载体,并实现了在神经胶质瘤细胞株U251中的表达,为后续研究CD80的表达对肿瘤细胞免疫原性的影响以及制备神经胶质瘤肿瘤疫苗提供了重要的实验材料。; 张雪林敬明姜晓丹马宏伟秦琨郭爱林刘煜; 关键词：CD80 神经胶质瘤肿瘤疫苗

半枝莲提取物抗人肝癌Hep-G2细胞增殖及其机制研究被引量：32: 2006年; 目的探讨半枝莲提取物(ESB)对人肝癌Hep-G2细胞体外增殖的影响及其作用机制。方法以MTT法检测ESB对Hep-G2细胞增殖的影响;光镜、电镜观察ESB作用后Hep-G2细胞形态的变化;流式细胞仪检测ESB作用后Hep-G2凋亡细胞、细胞周期的变化及凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Fas表达。结果ESB能明显抑制Hep-G2细胞的增殖,并有剂量效应及时间效应关系。ESB作用Hep-G2细胞72h后,呈现凋亡早期的形态学改变;凋亡细胞增多;S期细胞减少,G0/G1期细胞增多;Fas表达增强,Bcl-2及Bax表达变化不明显。结论ESB可抑制Hep-G2细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡,可能与激活FNFR超家族有关。; 林敬明刘煜罗荣城; 关键词：半枝莲原发性肝癌凋亡

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刘煜