刘国祥
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- HIV-1 gagpol病毒样颗粒疫苗免疫小鼠的实验研究
- 2009年
- 目的:为构建含中国流行株HIV-1核心蛋白(gag、pol)基因的病毒样颗粒疫苗(VLP疫苗),并评价其诱导的体液和细胞免疫反应效果。方法:将重组质粒pcDNA3.1/gagpol稳定转染HEK293细胞,上清液经蔗糖垫层超速离心纯化后,用收获的VLP疫苗免疫小鼠,通过ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ,通过乳酸脱氢酶(LDH)实验检测小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果:VLP疫苗免疫组小鼠血清的抗HIV-1 gp160抗体滴度和IFN-γ均升高(P<0.01),其特异性CTL活性均高于PBS对照组(P<0.01)。结论:构建的VLP疫苗免疫小鼠可以诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步研制HIV治疗性疫苗奠定基础。
- 张一折唐保宏张守涛刘国祥
- 关键词：HIV-1核心蛋白免疫
- 罗尔斯通氏菌菌株H16新毒素蛋白Reu对菜青虫中肠组织病理学研究
- 2010年
- 在从罗尔斯通氏菌菌株H16内分离纯化出具有胃毒活性的毒素蛋白Reu的基础上,将毒素Reu饲喂菜青虫幼虫,通过观察菜青虫中肠组织的变化研究毒素Reu的杀虫机理。经毒素Reu处理的菜青虫幼虫,中肠组织的病理变化类似于发光杆菌Tca毒素和苏云金芽孢杆菌δ-内毒素。菜青虫4龄幼虫口服毒素Reu 16 h后,中肠组织开始发生变化,围食膜前端破碎,中肠柱状细胞伸长;32 h后整个围食膜被破坏消失,中肠组织病变加重,肠壁细胞排列疏松混乱。
- 张一折刘国祥刘永涛包振霞
- 关键词：中肠组织菜青虫
- 罗尔斯通氏菌菌株H16新杀虫蛋白的纯化及活性测定被引量：1
- 2009年
- 利用(NH4)2SO4盐析、超滤、Sephacryl-400HR凝胶过滤层析及DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析等方法,从罗尔斯通氏菌菌株H16(Ralstonia eutropha H16)中分离纯化出一种新的杀虫毒素蛋白。生物活性测定结果表明,此杀虫毒素蛋白存在于胞内和胞外上清液中,电泳结果显示胞内和分泌到胞外的杀虫毒素可能是同一种物质。此毒素对菜青虫初孵幼虫有较强的口服毒性,LD50为2.7mg/头。SDS-PAGE图谱显示此杀虫毒素是由两个亚基组成的复合蛋白。
- 张一折刘国祥刘伟张守涛王芳
- 关键词：毒素蛋白纯化杀虫活性
- 光杆状菌属细菌杀虫毒素研究进展
- 2008年
- Bt制剂的大量使用及表达Bt毒素的转基因植物的应用已引发了抗性昆虫种群的发展,光杆状菌属细菌产生的杀虫毒素蛋白是一类高效、杀虫谱广的新型杀虫蛋白,使得有限的用来开发转基因抗虫作物的基因资源得到了补充。对近年来发现的Tc蛋白毒素复合体、PirAB双元毒素及其致软毒素(Mcf)的最新研究进展进行了综述,并对今后的研究方向提出了见解。
- 张一折王吉中刘国祥
- 关键词：杀虫毒素转基因植物
- 稳定表达HIV-1 GagPol基因真核表达载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体。方法:用PCR方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1(-)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol分别瞬时和稳定转染HEK293细胞,经G418筛选,建立稳定转染GagPol基因的细胞系,并应用Western Blot方法鉴定表达产物。结果:酶切鉴定和Western Blot检测证实重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol构建正确,并能稳定表达HIV-1 GagPol蛋白。结论:成功构建携带HIV-1 GagPol基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/GagPol,并在HEK293细胞中获得稳定表达。
- 张一折王鹏张守涛刘伟刘国祥
- 关键词：HIV-1
- 罗尔斯通氏菌菌株H16新毒素蛋白Reu理化性质的研究被引量：1
- 2010年
- 为深入研究罗尔斯通氏菌H16新毒素蛋白Reu的理化性质,以初孵菜青虫四龄幼虫为试虫,进行Reu胃毒毒力测定,计算其LD50,检测Reu的热稳定性及其对蛋白酶的敏感性,通过非变性梯度凝胶电泳测定Reu的分子量;SDS-PAGE电泳分析Reu的亚基组成;等电聚焦电泳测定Reu的等电点等。结果表明,Reu对菜青虫四龄幼虫毒力LD50为110.84μg/g;此毒素蛋白经80℃处理10min和蛋白酶K处理后,基本丧失了对菜青虫幼虫的毒杀作用;Reu的分子量为221.3kDa,由64.4kDa和57.5kDa2种亚基组成,等电点为7.08。
- 张一折包振霞刘国祥刘永涛
- 关键词：细菌理化性质杀虫活性
