冯剑锷
- 作品数:15 被引量:62H指数:5
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 套管法与缝合法在建立小鼠颈部心脏移植模型的比较被引量:4
- 2006年
- 目的:比较套管法与缝合法建立小鼠颈部心脏移植模型的优缺点。方法:分别用套管法和缝合法建立小鼠颈部异位心脏移植模型,从供心总缺血时间、手术成功率、手术难度和设备要求、术后血管内膜完整性、并发症发生率、术后生存期及总手术时间来比较。结果:经过25次套管法和39次缝合法实验,各自成功23例、28例,成功率分别是92%、72%;初学者在10倍目镜下就可完成套管吻合,后者要求术者有显微外科基础,至少需借助16倍目镜才能完成;套管法不损伤血管内膜,术后血管通畅性优于缝合法。结论:套管法可缩短供心总缺血时间,简化手术操作,成功率高,术后血管通畅性好,并发症无明显增加,手术时间无明显延长,是初学者建立该模型优先选择的方法。
- 高开柱孙宗全杜心灵冯剑锷苏刚史嘉玮
- 关键词:套管法缝合法心脏移植
- 腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞对调节活化正常T细胞表达和分泌因子趋化功能的影响
- 2014年
- 目的 观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)趋化作用的影响.方法 构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3 FLAG(Ad-S24F)腺病毒载体,将不含目的基因的病毒载体pAV-MCMV-GFP (Ad-Null)为阴性对照组.分离培养HUVECs后分别转染Ad-S24F和Ad-Null,另设不含腺病毒培养基为空白对照.转染后采用荧光显微镜及Western blot检测重组蛋白表达.采用Transwell小室法分析S24F对RANTES趋化作用的影响.结果 Ad-S24F及Ad-Null构建成功,转染HUVECs后荧光显微镜及Western blot能检测到重组蛋白表达,Ad-S24F转染后能够抑制RANTES诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)穿透内皮[Ad-S24F:(9.20 ±0.02)%;Ad-Null:(17.70±0.02)%;空白对照组(15.10±0.01)%]的趋化作用.结论 腺病毒介导S24F基因转染HUVECs能够抑制RANTES的趋化作用.
- 孙永丰冯剑锷史嘉玮董念国
- 关键词:腺病毒载体基因转染
- 细胞移植结合激光肌肉血管重建增强鼠缺血肢体新生血管形成
- 2007年
- 目的:研究激光肌肉血管重建(TMR)和血管内皮祖细胞(EPCs)移植相结合能否增强缺血肢体新生血管形成。方法:密度梯度法分离脐带血单个核细胞并体外培养,免疫组织化学和流式细胞术定量和定性分析。应用DiI标记注射入激光孔道和缺血区的EPCs。结扎裸鼠右侧髂外动脉造成急性肢体缺血模型,随机分为:TMR+EPCs组:EPCs移植入缺血区肌肉的激光孔道;TMR组:缺血区肌肉激光打孔;EPCs组:注射EPCs至缺血区肌肉;对照组:缺血肢体模型。超声多谱勒测定缺血和非缺血后肢的股动脉血流获得比值(FAFI),组织化学和免疫组织化学检查缺血肢体肌肉标本。结果:贴壁细胞表达KDR、CD34、AC133、CD31和vWF,并且吞噬Ac-LDL,有内皮细胞功能,培养7d的细胞流式细胞术检查CD34(62%±7%)和AC133(57.2%±9.8%)阳性。术后28d,TMR+EPCs、EPCs和TMR组FAFI明显高于各自基线水平;TMR+EPCs和EPCs组FAFI明显高于对照组。TMR+EPCs组新生血管形成明显多于对照组。结论:TMR和EPCs移植结合明显改善了缺血肢体的灌注并增强了缺血肢体新生血管形成。
- 刘超赵文增孙宗全杜心灵陈新忠冯剑锷
- 关键词:激光血管重建血管内皮祖细胞细胞移植缺血
- 受体诱导一氧化碳经PI3 K/Akt信号途径抑制冷缺血再灌注诱导的移植心细胞凋亡被引量:2
- 2010年
- 目的 观察受体诱导一氧化碳(CO)对移植心冷缺血再灌注(I/R)损伤中细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 以BALB/C小鼠建立同系移植心冷I/R损伤模型.受体麻醉前3 h以二氯甲烷(MC)500 mg/kg灌胃诱导CO(MC组,n=12),或橄榄油灌胃(IR组,n=12);在MC组的基础上受体在移植心恢复血供前1 h腹腔注射PI3K抑制剂LY294002(40 mg/kg,LY组,n=10)或二甲亚砜(DMSO组,n=10);检测移植后3、24 h移植心细胞凋亡指数(AI)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白、bcl-2与bax蛋白表达比值;设正常对照组(N组,n=5).结果 受体以MC灌胃后血液中碳氧血红蛋白(COHb)浓度与心肌组织CO含量均在3 h达到峰值,分别为(9.82±0.84)%和(2.25±0.08)pmol/mg;与IR组比较,MC组明显降低移植心AI[3 h:(8.65±2.01)%比(19.28±4.94)%,P<0.01;24 h:(5.82±2.36)%比(10.54±3.66)%,P<0.05]、激活Akt蛋白(3 h:P<0.01;24 h:P<0.05)、上调bcl-2/bax比值(3 h:1.97±0.16比0.46±0.07,P<0.01;24 h:1.89±0.10比0.51±0.04,P<0.01);与MC组比较,LY组明显增加AI[3 h:(17.95±4.92)%,P<0.01;24 h:(9.75±3.14)%;P<0.01]、抑制Akt蛋白激活(P<0.01)、下调bcl-2/bax比值(3 h:0.47±0.06,P<0.01;24 h:0.52±0.03,P<0.01);DMSO组与MC组的各个指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 受体诱导C0能明显抑制冷I/R诱导的移植心细胞凋亡,其机制可能与通过PI3K/Akt信号途径上调bcl-2/bax比值有关.
- 张松林孙宗全冯剑锷吴龙于利王国华
- 关键词:心脏移植一氧化碳
- 应用Cuff技术建立小鼠异位心脏移植模型被引量:20
- 2005年
- 目的建立简单易行、稳定可靠的小鼠颈部异位心脏移植模型。方法自制血管套管,运用Cuff技术吻合移植心的动、静脉。结果正式实验25次,成功23例,供心缺血时间均少于 30 min。结论该方法明显降低了手术难度,具有手术时间短,创伤小,成功率高的优点,是一种简单实用的方法。
- 冯剑锷孙宗全
- 关键词:心脏移植动物模型小鼠异位心脏
- 激光心肌血管重建缓解心绞痛的机制研究
- 2006年
- 目的:探讨激光心肌血管重建(TMLR)缓解心绞痛的机制。方法:犬冠状动脉前降支结扎加空气栓塞造成心肌梗塞模型,随机分为实验组(n=6)和对照组(n=6)。术后4周实验组心肌梗塞区行TMLR,对照组做假手术。第一次术后8周多巴酚丁胺试验前、后心大静脉内抽取血样,放射免疫法测定血浆腺苷含量,RT-PCR检测心肌腺苷A1受体mRNA的表达变化,比较其积分光密度值。结果:在静息状态,实验组冠状静脉内血浆腺苷含量(842.5±173.7 pm ol/mL)与对照组(888.2±273.0 pm ol/mL)相比差异无显著性(P=0.77)。多巴酚丁胺负荷试验后,对照组冠状静脉血浆腺苷含量(1273.0±247.1 pm ol/mL)明显高于静息状态(P<0.05);实验组冠状静脉血浆腺苷含量(950.8±223.0 pm ol/mL)与静息状态相比差异无显著性(P=0.45)。心肌组织腺苷A1受体mRNA相对积分光密度值两组之间差异无显著性。结论:心脏负荷增加时实验组冠状静脉内腺苷处于低水平可能是TMLR缓解心绞痛的机制。
- 刘超赵文增孙宗全杜心灵陈新忠冯剑锷
- 关键词:激光心肌血运重建腺苷
- 套管法建立小鼠颈部心脏移植模型的探讨被引量:6
- 2006年
- 目的探讨套管法建立小鼠颈部心脏移植模型的优越性。方法供体、受体均为小鼠,将受体颈总动脉、颈外静脉制成套管,再分别与供心升主动脉、肺动脉行套管吻合。结果经过25次正式实验,手术成功率为92.0%,供心总缺血时间约20 min,术后平均存活(16.0±2.5)d。结论套管法简单可靠,手术成功率高,术后并发症少,供心总缺血时间短,术后血管通畅性好,是建立小鼠颈部心脏移植模型的优选方法。
- 高开柱孙宗全杜心灵史嘉玮冯剑锷苏刚刘超
- 关键词:套管法心脏移植小鼠动物模型
- 体外培养的未成熟树突状细胞对延长小鼠同种异体移植心存活时间的影响被引量:2
- 2005年
- 目的观察术前输注用低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)培养的小鼠骨髓源性未成熟树突状细胞(DC)对小鼠同种异体移植心存活时间的影响。方法分别用常规剂量和低剂量GM-CSF培养小鼠骨髓源性成熟DC和未成熟DC,采用流式细胞术检测细胞表型,比较其在体外刺激同种异体T细胞增殖的能力,并将培养的未成熟DC约1.0×106个于术前7d输注受者体内,观察同种异体移植心存活的时间。结果与常规剂量GM-CSF下培养出的成熟DC不同,低剂量GM-CSF培养出的DC为较单纯的未成熟DC,表型为CD11c+,CD80-,CD86-,MHCⅡlow,在体外不能有效刺激同种异体T细胞活化增殖,将其于术前输注受者体内,移植心的存活时间由6.3±1.2d延长至14.3±1.9d(P<0.01)。结论用低剂量GM-CSF可培养出表型和功能均未成熟的小鼠骨髓源性DC,将其在术前7d输注受者体内,可明显延长移植心的存活时间。
- 冯剑锷孙宗全高开柱史嘉玮
- 关键词:树突状细胞粒细胞巨噬细胞集落刺激因子免疫耐受
- 去胸腺小鼠模型的建立与改进被引量:1
- 2005年
- 目的建立简单易行、稳定可靠的去胸腺小鼠模型。方法采用术中呼吸机辅助呼吸,术后胸管抽气的方法建立成年去胸腺小鼠模型,结果实验20次,成功16例,成功率为80%。结论用该方法建立去胸腺小鼠模型成活率高,胸腺切除彻底,效果满意。
- 冯剑锷孙宗全
- 关键词:胸腺切除小鼠气管插管
- 体外培养的小鼠骨髓源性未成熟树突状细胞对小鼠同种异体移植心存活时间影响的实验研究
- 20世纪以来,随着器官移植技术,移植免疫基础以及各种免疫抑制剂的研究进展,心脏移植已成为治疗终末期心脏病的有效手段。但是,由于急慢性排斥反应造成的移植心脏功能障碍仍是影响疗效的主要原因。而且,尽管现行的免疫抑制剂能在一定...
- 冯剑锷
- 关键词:树突状细胞心脏移植抗原负载
- 文献传递