付晶晶
- 作品数:18 被引量:67H指数:5
- 供职机构:江西省儿童医院更多>>
- 发文基金:江西省自然科学基金江西省卫生厅科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 靶向PUMA的siRNA对缺氧/复氧诱导大鼠心肌细胞凋亡的保护作用被引量:2
- 2011年
- 为探讨p53上调凋亡调制物(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)在大鼠心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenatio,H/R)损伤中的作用,本研究将靶向PUMA的siRNA(si-PUMA)转染大鼠心肌细胞以建立PUMA沉默表达模型,观察其对心肌细胞H/R损伤的影响.RT-PCR和Western印迹结果表明,最适转染浓度50 nmol/L si-PUMA能靶向抑制H/R损伤心肌细胞的PUMA表达;MTT法检测心肌细胞存活率及培养基乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性测定结果发现,si-PUMA组细胞存活率较H/R 6 h模型组明显提高,培养液中LDH活性显著降低(P<0.01);分光光度法及Annexin V-FITC/PI联合染色流式细胞凋亡检测结果显示,si-PUMA组caspase-3活性较H/R 6h组明显下调,细胞凋亡率明显降低(P<0.01);RT-PCR结果提示,与H/R6 h组相比,si-PUMA组Bax及Bcl-2表达分别出现显著下调及上调(P<0.05).以上结果表明,靶向PUMA的siRNA转染能明显增强心肌细胞耐受H/R损伤的能力,对心肌细胞具有较好的保护作用;PUMA介导H/R诱导的心肌细胞凋亡,是心肌缺血/再灌注损伤基因治疗的一个潜在靶点.
- 付晶晶罗达亚万福生
- 关键词:心肌细胞凋亡
- 肼苯哒嗪对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231雌激素受体α去甲基化的影响被引量:1
- 2009年
- 目的探讨肼苯哒嗪对雌激素受体(ER)α阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化的影响。方法体外细胞培养,按药物浓度分为4组:分别用0、5、10、20μmol/L的肼苯哒嗪作用ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞96 h;按药物作用时间分为4组:分别于0、72、96、120 h 10μmol/L肼苯哒嗪作用ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞,倒置光学显微镜下观察肼苯哒嗪对细胞生长的影响。各组提取MDA-MB-231细胞总RNA,用RT-PCR及图像分析检测肼苯哒嗪对MDA-MB-231细胞ERαmRNA表达的影响;提取MDA-MB-231细胞基因组DNA,纯化、修饰后用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态。结果与对照组比较,5、10、20μmol/L肼苯哒嗪组ER/β-actin光密度积分值比值均明显升高(P<0.05或P<0.01);72、96、120 h 10μmol/L肼苯哒嗪组ER/β-actin光密度积分值比值均明显升高(P<0.05或P<0.01)。5μmol/L肼苯哒嗪作用120 h后ERα基因呈部分去甲基化状态,而经10μmol/L肼苯哒嗪作用120 h后的ERα基因呈完全去甲基化状态。结论肼苯哒嗪可以逆转ERα阴性人乳腺癌细胞株MDA-MB-231 ERα基因启动子区CpG岛DNA甲基化状态,使沉默基因重新表达。
- 任香罗达亚刘丽乔付晶晶龚慧万福生
- 关键词:肼苯哒嗪雌激素受体ΑDNA甲基化
- 间接免疫荧光法检测血小板相关抗体新判读标准的建立和评价
- 2021年
- 目的通过建立新的判读标准来提高间接免疫荧光法(IIF)检测血小板相关抗体(PAIg)的诊断效能。方法收集2020年全年确诊为免疫性血小板减少症(ITP)患儿261例和红斑狼疮(SLE)患儿50例作为实验组,50例再生障碍性贫血(AA)作为病例对照组,50例健康体检儿童作为正常对照组进行PAIg检测。分析新旧两个判读标准的结果,并与流式细胞仪(FCM)法进行比对,分析两种方法的符合率。结果IIF法使用新的判读标准后,ITP组患儿阳性率从19.54%上升到62.07%,诊断效率从45.01%上升为67.64%。SLE组患儿阳性率从16.00%上升到38.00%。IIF法与FCM法在诊断ITP和SLE中结果具有一致性,kappa值分别为0.680和0.653。结论新的IIF法判读标准提高了对临床疾病的诊断效能,更适合作为ITP患儿PAIg检测的筛查实验。
- 杨细媚万祥辉黄超付晶晶刘志强柯江维
- 关键词:间接免疫荧光法血小板相关抗体
- 一例Treacher-Collins综合征患儿的TCOF1基因突变检测被引量:2
- 2018年
- 目的探讨1例Treacher-Collins综合征患儿的临床特征和基因突变特点。方法收集患儿及其父母的临床资料,并对TCOF1基因所有的外显子进行检测,分析其基因型与临床表型的对应关系。结果患儿主要临床表现包括颧骨发育不全、眼裂向外倾斜、小下颌、外耳发育不全、小耳、腭裂等。基因检测提示患儿携带TCOF1基因第14外显子c.2261insG(p.E95X)插入突变,既往未见报道。患儿表型正常的父母TCOF1基因全外显子检测未发现突变。结论明确了1例颅面畸形患儿的致病原因,为其遗传咨询和生育指导提供了依据。
- 黄慧杨玉吴限段君凯李红易丽君付晶晶郭智彬乐萍黎文婷张晓珍霍晓春陈卡
- 关键词:突变
- PML通过转录调控CTCF影响C-Myc表达的机制研究
- 2018年
- 该研究探讨了PML(promyelocytic leukemia protein)对多功能转录因子CTCF(CCCTCbinding factor)的转录调控及其下游靶基因C-Myc的功能影响。通过荧光定量PCR方法分析儿童急性淋巴细胞白血病样本中PML和CTCF基因的表达水平,并分析二者之间的相关性。构建了PML与CTCF真核表达载体,在共转染细胞中,利用荧光定量PCR方法和Western blot分析PML对CTCF表达水平的影响。通过双荧光素报告基因系统分析了PML对CTCF启动子区的调控,并研究了其对CTCF下游靶基因C-Myc的表达水平的影响。结果显示,在临床样本中PML与CTCF表达水平存在负相关性,PML通过抑制CTCF的转录降低CTCF的表达水平,干扰CTCF对下游靶基因C-Myc的调控功能。同时,在CTCF的启动子区域可能存在着PML的结合区域,从而导致CTCF的启动子活性被抑制。
- 周菁胡清华易丽君付晶晶李红
- 关键词:CTCF转录因子转录调控
- PUMA介导缺氧复氧大鼠心肌细胞凋亡的实验研究
- 凋亡引起的心肌细胞损失是缺血/再灌注损伤(ischemia/perfusion injury,IRI)的重要病理特征。阐明对心肌IRI中心肌细胞凋亡起关键性作用的蛋白质及其信号转导机制,对揭示心肌IRI的本质寻找并确立药...
- 付晶晶
- 关键词:缺血再灌注损伤缺氧复氧损伤细胞凋亡
- 文献传递
- 牛磺酸对心肌细胞缺氧/复氧导致凋亡的保护及机制研究
- 冠心病是当今世界最常见的心血管事件死因之一.随着血管再通技术的广泛应用,心肌I/R损伤已成为影响或阻碍缺血性心脏病治疗的主要原因之一.心肌I/R损伤是指I/R心肌在恢复血运液供应后原损伤反而加重,通常在再灌注后24小时内...
- 杨晓红付晶晶刘卓琦涂硕刘丽乔余乐涵余波万福生
- 关键词:心肌损伤牛磺酸
- 文献传递
- 5-Aza-CdR对人结肠癌Caco-2细胞系P16基因甲基化状态及其生物学表型的影响被引量:7
- 2011年
- 目的观察人结肠癌Caco-2细胞系P16基因启动子区甲基化状态,并探讨去甲基化制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)诱导高甲基化失活的P16基因重新表达的可能性及其对细胞生长的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理Caco-2细胞系,MSP法检测用药前后P16基因的甲基化状态,RT-PCR方法检测P16基因mRNA表达。MTT法观察细胞生长速度,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率。结果 P16基因在人结肠癌细胞系Caco-2中启动子区呈甲基化状态,经过5-Aza-CdR处理后,P16基因启动子区呈去甲基化状态,其mRNA重新表达。CpG岛去甲基化后能明显地抑制细胞的生长,诱导细胞凋亡,影响细胞周期分布,并具有良好的量效依赖关系。结论 5-Aza-CdR能够逆转P16基因甲基化状态,调控P16基因表达并有效地抑制肠癌细胞增殖。
- 刘丽乔罗达亚付晶晶龚慧万福生
- 关键词:5-氮杂-2-脱氧胞苷P16基因
- 引起儿童急性下呼吸道感染的常见病毒分析被引量:12
- 2013年
- 目的分析江西地区引起儿童急性下呼吸道感染的病毒谱特点,为临床合理用药提供参考。方法收集2011年9月-2012年8月江西省儿童医院2276例患有急性下呼吸道感染住院患儿的鼻咽分泌物标本,采用直接荧光法检测流感病毒A、B型(IVA、IVB)、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型(PIVⅠ、PIVⅡ、PIVⅢ)、呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(ADV)7种呼吸道病毒抗原。结果 2276例鼻咽分泌物标本中,共957例标本至少1种病毒阳性,总检出率为41.9%;7种病毒检出率构成比从高到低依次为:RSV 69.7%、PIVⅢ14.1%、ADV 8.7%、IVA2.6%、PIVⅠ2.4%、IVB 2.0%及PIVⅡ0.5%;RSV为秋、冬、春季导致儿童急性下呼吸道感染的主要病毒,3个季节的检出率分别为59.5%、45.4%和38.2%,PIVⅢ在夏季的检出率达高峰,为13.2%;婴儿组、幼儿组、学龄前组和学龄组病毒的检出率分别为43.9%、28.6%、14.3%和5.6%。结论江西地区引起儿童急性下呼吸道感染的主要病毒为RSV,其次为PIVⅢ和ADV,病毒感染具有明显的季节性且随儿童年龄的增长而降低。
- 付晶晶柯江维李红黄蓉刘志强段荣
- 关键词:急性下呼吸道感染病毒儿童
- PUMA介导大鼠缺氧/复氧心肌细胞凋亡的研究被引量:4
- 2011年
- 目的研究促凋亡蛋白p53上调凋亡调制物(PUMA)在大鼠缺氧/复氧(H/R)心肌细胞凋亡中的作用及意义。方法原代培养的大鼠心肌细胞缺氧5 h后复氧2~12 h以制备缺氧/复氧损伤模型,靶向PUMA的siRNA转染大鼠心肌细胞以建立PUMA沉默表达模型。采用Annexin V-FITC联合PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;分光光度法检测Caspase-3活性变化;RT-PCR、Western blot等方法分析PUMA及凋亡相关基因Bax、Bcl-2的mRNA及蛋白表达变化。结果与正常对照组相比,H/R处理后心肌细胞凋亡率及Caspase-3活性迅速上升;PUMA mRNA及蛋白表达上调,凋亡相关蛋白Bax表达上调及Bcl-2的表达下调。靶向PUMA的siRNA转染后,Bax上调表达及Bcl-2下调表达的程度明显被抑制。结论在大鼠心肌细胞缺氧/复氧过程中,PU-MA表达明显升高,其可能通过下调Bcl-2表达及上调Bax表达导致Caspase-3活性增加以介导心肌细胞凋亡。
- 付晶晶段荣李红万福生
- 关键词:心肌细胞小干扰RNA