于波
- 作品数：3 被引量：14H指数：1
- 供职机构：福建中医学院骨伤系更多>>
- 发文基金：福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人KiSS-1基因克隆及其慢病毒载体的构建
- 2008年
- 背景:慢性病毒载体技术是目前转基因中最有效和最成功的方法,技术操作简便。目的:克隆转移抑制基因KiSS-1基因不含信号肽的表达序列,构建人KiSS-1基因的慢病毒表达载体。设计、时间及地点:开放性实验于2006-09/2007-12在福建师范大学发育学院实验室完成。材料:载体pNL-IRES2-EGFP由福建师范大学发育学院实验室保存。方法:从人正常胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链反应得到KiSS-1基因开放阅读框cDNA序列,并将其克隆到慢病毒载体pNL-IRES2-EGFP中,构建其表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1。主要观察指标:KiSS-1目的基因片段的克隆,重组表达质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1的酶切鉴定及测序。结果:经酶切鉴定和基因序列测定,证实重组入载体pNL-IRES2-EGFP的片段为目的基因开放阅读框的核苷酸序列。结论:成功构建了重组质粒pNL-IRES2-EGFP-KiSS-1。
- 于波张俐
- 关键词：基因克隆分子病毒载体
- 中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞诱导凋亡的作用被引量：14
- 2009年
- 目的:研究中药片仔癀对骨肉瘤U-2OS细胞的诱导凋亡作用。方法:①采用1月龄SD大鼠16只,雌雄各半,体重120g左右,随机分为2组(空白血清组和片仔癀治疗组),每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS,片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U-2OS细胞培养于含10%胎牛血清,青霉素100IU/ml,链霉素100μg/ml的RPMI1640培养液中,置于37℃、5%CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养。用MTT法检测不同含药血清浓度对骨肉瘤U-2OS细胞增殖的影响,筛选对骨肉瘤U-2OS细胞作用最佳的片仔癀含药血清浓度。③在倒置相差显微镜和电镜下观察骨肉瘤U-2OS细胞形态。④TUNEL原位末端标记法检测细胞的凋亡。⑤提取基因DNA,琼脂糖凝胶电泳,以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果:①20%片仔癀含药血清对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用最佳。②倒置相差显微镜观察可见空白血清组细胞呈梭形贴壁生长,在20%片仔癀胶囊含药血清组,可见部分细胞体积变小、变圆,细胞膜完整但出现发泡现象,折光性增强。随作用时间延长,变圆细胞逐渐增多,部分贴壁细胞皱缩、变圆、脱落,可见坏死细胞及碎片。③20%片仔癀胶囊含药血清组TUNEL检测阳性。④DNALadder电泳结果:含药血清组细胞基因DNA凝胶电泳出现明显的梯状带。⑤透射电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚,细胞表面出现凋亡小体。结论:中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-2OS细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。
- 张俐于波林建华
- 关键词：细胞凋亡中药片仔癀
- 陶瓷型人工全髋关节治疗股骨头缺血性坏死早期临床疗效与分析
- 2008年
- 目的:研究陶瓷型人工全髋关节置换治疗股骨头缺血性坏死的中短期疗效,以探讨此假体的临床应用价值。方法:对陶瓷-陶瓷非骨水泥型假体23例28髋进行随访,应用Harris评分标准进行功能评价,应用股骨Gruen与髋臼Delee-Charnly分区方法进行影像学评价。结果:Harris评分可见显著性差异;影像学上无明显的假体松动。结论:对于股骨头缺血性坏死患者,新型的陶瓷-陶瓷假体随访2年效果良好,影像学表现无明显松动。
- 于波谢进张俐
- 关键词：陶瓷股骨头缺血性坏死
